| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-15页 |
| ·减数cDNA文库 | 第8-10页 |
| ·使用磁珠的减数技术 | 第9页 |
| ·Oligo(dT)_(30)乳胶和PCR结合的方法 | 第9页 |
| ·代表性差别筛选法 | 第9-10页 |
| ·酶降解减数法 | 第10页 |
| ·标准化cDNA文库 | 第10-11页 |
| ·固相cDNA文库构建 | 第11-12页 |
| ·差示cDNA文库 | 第12-13页 |
| ·抑制消减杂交 | 第13页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第13-15页 |
| 第二章 cDNA文库的构建 | 第15-23页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·实验方法 | 第15-20页 |
| ·草鱼的诱导 | 第15页 |
| ·草鱼肝、肾组织的分离 | 第15-16页 |
| ·样品total RNA抽提 | 第16页 |
| ·mRNA纯化 | 第16-17页 |
| ·cDNA合成、酶切及分级分离 | 第17-19页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第17页 |
| ·LD PCR扩增cDNA | 第17-18页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第18-19页 |
| ·Sfi I消化 | 第19页 |
| ·cDNA的分级分离 | 第19页 |
| ·将cDNA与pBluescript II SK~*载体相连 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的转化 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-23页 |
| ·Total RNA的质量检测 | 第20-21页 |
| ·紫外分析RNA的质量 | 第20页 |
| ·保温实验检测RNA质量 | 第20-21页 |
| ·mRNA质量检测 | 第21页 |
| ·双链cDNA的合成检测 | 第21-22页 |
| ·cDNA分级分离结果检测 | 第22页 |
| ·重组率及库容 | 第22页 |
| ·计算菌落数及蓝白斑比例 | 第22页 |
| ·库容量 | 第22页 |
| ·小结 | 第22-23页 |
| 第三章 cDNA文库的筛选及保存 | 第23-28页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·cDNA文库的筛选 | 第24-25页 |
| ·感受态细胞的制备和连接产物的转化 | 第24页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第24-25页 |
| ·cDNA文库的保存 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-28页 |
| ·PCR检测插入片段 | 第25-28页 |
| 第四章 测序结果及部分功能基因序列分析 | 第28-38页 |
| ·草鱼肝肾cDNA文库中部分基因及其序列的初步统计 | 第28-34页 |
| ·全长序列分析 | 第34-37页 |
| ·文库的初步评估 | 第37-38页 |
| 第五章 讨论 | 第38-43页 |
| ·cDNA全长文库 | 第38-39页 |
| ·构建cDNA文库的基本步骤 | 第39-40页 |
| ·构建cDNA文库注意事项 | 第40-41页 |
| ·如何判断全长序列 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 1:缩略语 | 第48-49页 |
| 附录 2:论文发表情况 | 第49页 |
