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天花粉蛋白抑制乳腺癌生长及逆转ERα基因甲基化的研究

中文文摘第1-7页
英文摘要第7-14页
英文缩略词表第14-15页
第一章 TCS对MDA-MB-231和MCF—7乳腺癌细胞的影响第15-31页
 前言第15页
 1 材料与方法第15-19页
   ·实验细胞与细胞培养条件第15页
   ·实验材料第15-17页
     ·主要实验仪器第15-16页
     ·细胞培养主要实验材料和试剂第16页
     ·主要溶液的配制第16-17页
   ·实验方法第17-19页
     ·细胞台盼蓝拒染试验计数活细胞、绘制细胞生长曲线第17页
     ·TCS处理前后细胞形态学观察第17-18页
     ·MTT实验第18-19页
     ·流式细胞术测乳腺癌细胞周期和凋亡第19页
 2 实验结果第19-26页
   ·细胞生长曲线第19-20页
   ·TCS处理前后两种乳腺癌细胞的形态学变化第20-21页
   ·MTT结果第21-24页
     ·TCS对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用第21-22页
     ·TCS对MCF-7细胞的生长抑制作用第22-23页
     ·TCS作用下不同乳腺癌细胞系之间生长抑制率的比较第23-24页
     ·MDA-MB-231细胞的药物浓度作用曲线第24页
   ·流式细胞仪分析结果第24-26页
     ·MDA-MB-231和MCF-7细胞经TCS处理前后的细胞周期第24-26页
     ·MDA-MB-231和MCF-7细胞经TCS处理前后细胞凋亡值第26页
 3 讨论第26-30页
   ·天花粉蛋白的抗肿瘤作用第26-27页
   ·TCS对MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响第27-28页
   ·TCS对MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞的敏感性差异第28-29页
   ·TCS对MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞周期和凋亡的影响第29-30页
 4 小结第30-31页
第二章 TCS对MDA-MB-231乳腺癌细胞ERα基因表达及甲基化的影响第31-57页
 前言第31页
 1 材料与方法第31-47页
   ·实验细胞与细胞培养条件第31页
   ·实验材料第31-36页
     ·细胞培养主要实验仪器和试剂第31-32页
     ·RT-PCR仪器和试剂第32-33页
     ·MSP试剂第33页
     ·Western-blot材料和试剂第33-34页
     ·主要溶液的配制第34-36页
   ·实验方法第36-47页
     ·RT-PCR检测细胞ERαmRNA的表达第36-40页
     ·MSP检测TCS、5-Aza-C处理前后细胞ERα甲基化状态第40-43页
     ·Western blot法第43-47页
     ·TCS对MDA-MB-231乳腺癌细胞内分泌治疗敏感性的影响第47页
 2 实验结果第47-51页
   ·RT-PCR结果第47-48页
   ·MSP结果第48-49页
   ·Western blot结果第49-50页
   ·TCS对MDA-MB-231乳腺癌细胞内分泌治疗敏感性的影响第50-51页
 3 讨论第51-56页
   ·ERα阴性乳腺癌基因表达沉默的研究第51-53页
   ·ERα基因5'端核心启动子区CpG岛甲基化检测第53-54页
   ·天花粉蛋白的去甲基化效应第54页
   ·TCS处理MDA-MB-231乳腺癌细胞株后恢复对他莫昔芬的敏感性第54-56页
 4 小结第56-57页
第三章 TCS对ERα阴性乳腺癌裸鼠移植瘤生长及ERα表达的影响第57-72页
 前言第57页
 1 材料与方法第57-62页
   ·材料和试剂第57-58页
     ·主要仪器和材料第57页
     ·主要溶液的配制第57-58页
   ·裸鼠饲养第58页
   ·细胞培养第58页
   ·人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立第58-59页
   ·各组不同处理和检测方法第59-62页
     ·给药步骤第59页
     ·乳腺癌裸鼠移植瘤体积、重量的测量和血液常规生化的检测第59页
     ·苏木精伊红(HE)染色光镜观察第59-60页
     ·RT-PCR检测裸鼠皮下移植瘤ERαmRNA的表达第60-61页
     ·MSP检测裸鼠皮下移植瘤ERα的甲基化状态第61-62页
     ·Western blot印迹法检测裸鼠皮下移植瘤ERα蛋白表达第62页
 2 结果第62-67页
   ·人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的成功建立第62-64页
   ·TCS对裸鼠移植瘤的影响第64-65页
   ·TCS对荷瘤裸鼠肝肾功能及血液系统的影响第65-66页
   ·TCS对裸鼠移植瘤细胞形态学(HE染色)的改变第66页
   ·TCS对裸鼠移植瘤ERα基因mRNA的表达第66-67页
   ·裸鼠皮下移植瘤ERα的甲基化状态第67页
   ·TCS对裸鼠移植瘤ERα蛋白表达的影响第67页
 3 讨论第67-71页
   ·TCS对乳腺癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用第67-69页
   ·TCS对乳腺癌裸鼠移植瘤ERα的去甲基化效应第69-70页
   ·TCS的不良反应第70-71页
 4 小结第71-72页
问题与展望第72-73页
结论第73-74页
参考文献第74-84页
综述一第84-107页
综述二第107-123页
致谢第123-124页
攻读学位期间主要的研究成果第124页

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