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农杆菌介导的DHAR基因转化甜瓜和苹果的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-23页
   ·植物抗坏血酸和脱氢抗坏血酸还原酶的研究进展第10-12页
     ·植物抗坏血酸的研究第10页
     ·抗坏血酸对抵抗植物逆境胁迫的研究第10-11页
     ·植物脱氢抗坏血酸还原酶及其遗传转化的研究第11-12页
   ·甜瓜组织培养及遗传转化的研究进展第12-15页
     ·甜瓜组织培养研究进展第12-13页
     ·影响甜瓜再生频率的因素第13页
     ·甜瓜遗传转化的研究进展第13-15页
     ·存在的问题与展望第15页
   ·苹果遗传转化的研究进展第15-22页
     ·苹果遗传转化取得的成果第15-18页
     ·农杆菌介导的转化系统的研究第18-21页
     ·苹果遗传转化中存在的问题及展望第21-22页
   ·本试验的目的和意义第22-23页
第二章 甜瓜再生体系的建立第23-27页
   ·材料与方法第23-24页
     ·材料与试剂第23页
     ·培养基第23页
     ·无菌外植体的获得第23页
     ·子叶外植体的处理第23-24页
     ·叶片外植体的处理第24页
   ·结果与分析第24-27页
     ·不同浓度组合的6-BA 和IAA 对子叶和叶片不定芽发生的影响第24-25页
     ·叶龄对再生的影响第25-26页
     ·暗培养时间对再生的影响第26页
     ·外植体放置方式对再生的影响第26页
     ·再生不定芽的伸长与生根第26-27页
第三章 DHAR 基因植物表达双元载体的构建第27-34页
   ·试验材料与方法第27-31页
     ·菌株与质粒第27页
     ·酶及生化试剂第27页
     ·PCR 引物第27页
     ·植物表达双元载体pCSB-DHAR 的构建第27-31页
   ·结果与分析第31-34页
     ·中间表达载体的构建及鉴定第31-32页
     ·脱氢抗坏血酸还原酶基因植物表达载体的构建第32-33页
     ·根癌农杆菌的转化及鉴定第33-34页
第四章 DHAR 基因转化甜瓜植株的获得第34-39页
   ·材料与方法第34-36页
     ·材料与试剂第34页
     ·培养基配方第34页
     ·甜瓜子叶抗生素敏感性的确定第34-35页
     ·根癌农杆菌介导甜瓜的转化第35页
     ·抗性植株的再生第35页
     ·转基因植株的PCR 检测第35页
     ·PCR 检测阳性株系AsA 和DHA 含量的测定第35-36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·甜瓜子叶潮霉素抗性筛选第36页
     ·抑菌素浓度对农杆菌生长的影响第36页
     ·预培养对转化效率的影响第36页
     ·不同菌液浓度和侵染时间对甜瓜转化效率的影响第36-37页
     ·共培养对转化效率的影响第37页
     ·甜瓜抗性植株的获得与转基因植株的PCR 鉴定第37-38页
     ·甜瓜叶片AsA 和DHA 含量第38-39页
第五章 DHAR 基因转化苹果植株的获得第39-42页
   ·材料与方法第39-40页
     ·材料与试剂第39页
     ·培养基配方第39页
     ·苹果叶片潮霉素(Hyg)选择压的确定第39页
     ·根癌农杆菌介导苹果的转化第39-40页
     ·抗性植株的再生第40页
     ·转基因植株的PCR 检测第40页
   ·结果与分析第40-42页
     ·苹果叶片潮霉素抗性筛选第40页
     ·苹果转基因植株的PCR 鉴定第40-42页
第六章 讨论第42-45页
   ·甜瓜子叶和叶片再生体系的建立第42页
   ·甜瓜遗传转化体系的建立第42-43页
   ·抗生素浓度对叶片遗传转化的影响第43页
   ·选择方式和外植体放置方式对转化的影响第43页
   ·载体构建第43-45页
第七章 结论第45-46页
参考文献第46-54页
附录第54-57页
致谢第57-58页
个人简介第58页

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