利用半乳糖修饰葡萄糖氧化酶的研究
| 摘要 | 第1页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-35页 |
| ·葡萄糖氧化酶 | 第9-14页 |
| ·葡萄糖氧化酶的酶学性质 | 第9-10页 |
| ·葡萄糖氧化酶的作用机理 | 第10页 |
| ·葡萄糖氧化酶的生产 | 第10-12页 |
| ·菌种 | 第10-11页 |
| ·葡萄糖氧化酶的生产 | 第11-12页 |
| ·葡萄糖氧化酶的应用 | 第12-14页 |
| ·葡萄糖氧化酶在食品工业中的应用 | 第12页 |
| ·葡萄糖氧化酶在饲料行业中的应用 | 第12-13页 |
| ·葡萄糖氧化酶在医药行业中的应用 | 第13页 |
| ·生产葡萄糖酸 | 第13页 |
| ·生产生物传感器(电极) | 第13-14页 |
| ·小结 | 第14页 |
| ·酶的化学修饰 | 第14-22页 |
| ·酶化学修饰的定义 | 第15页 |
| ·酶化学修饰的目的 | 第15页 |
| ·酶化学修饰的方法 | 第15-19页 |
| ·利用糖类对酶进行化学修饰 | 第16-18页 |
| ·单甲氧基聚乙二醇对酶的化学修饰 | 第18页 |
| ·蛋白质交联 | 第18-19页 |
| ·辅因子的引入 | 第19页 |
| ·其他 | 第19页 |
| ·修饰效果的分析与评价 | 第19-20页 |
| ·氨基修饰率的测定 | 第19-20页 |
| ·修饰产物相对分子质量及等电点的检测 | 第20页 |
| ·蛋白质构想或微环境变化的检测 | 第20页 |
| ·酶通过化学修饰获得的新的性质及其原理 | 第20-22页 |
| ·增强酶的稳定性 | 第20-21页 |
| ·降低或者消除酶的免疫原性 | 第21页 |
| ·延长酶在生物体内的半衰期 | 第21页 |
| ·提高酶的活力 | 第21-22页 |
| ·小结 | 第22页 |
| ·亲和层析 | 第22-33页 |
| ·亲和层析的基本原理 | 第22-23页 |
| ·亲和吸附剂 | 第23-28页 |
| ·基质 | 第23-25页 |
| ·配体 | 第25-28页 |
| ·亲和吸附剂的再生和保存 | 第28页 |
| ·亲和层析的基本操作 | 第28-30页 |
| ·上样 | 第28-29页 |
| ·洗脱 | 第29-30页 |
| ·亲和层析的应用 | 第30-33页 |
| ·抗原和抗体 | 第30-31页 |
| ·生物素和亲和素 | 第31页 |
| ·维生素、激素和结合转运蛋白 | 第31页 |
| ·激素和受体蛋白 | 第31-32页 |
| ·凝集素和糖蛋白 | 第32页 |
| ·辅酶 | 第32页 |
| ·氨基酸 | 第32页 |
| ·染料配体 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33页 |
| ·本研究的内容、目的、意义 | 第33-35页 |
| 第二章 利用琼脂糖凝胶CL-6B纯化蓖麻凝集素 | 第35-44页 |
| ·实验材料与仪器 | 第35-38页 |
| ·材料和试剂 | 第35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·试剂的配制 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·蛋白粗提液的制备 | 第38页 |
| ·琼脂糖凝胶CL-6B亲和层析 | 第38-39页 |
| ·凝血活性与凝血活性抑制的测定 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE的测定 | 第39-40页 |
| ·实验结果与分析 | 第40-42页 |
| ·亲和层析的结果 | 第40页 |
| ·凝血活性与凝血活性抑制测定结果 | 第40-41页 |
| ·SDS-PAGE结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 利用半乳糖修饰葡萄糖氧化酶 | 第44-55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·蓖麻凝集素亲和层析柱的制备 | 第44-45页 |
| ·制作蓖麻凝集素标准曲线 | 第44-45页 |
| ·载体Sepharose 4B的活化 | 第45页 |
| ·蓖麻凝集素的偶联 | 第45页 |
| ·利用半乳糖修饰葡萄糖氧化酶 | 第45-46页 |
| ·末端基团胺化半乳糖的合成 | 第45页 |
| ·葡萄糖氧化酶的化学修饰(Gal-GOD的制备) | 第45-46页 |
| ·Gal-GOD的分离纯化 | 第46页 |
| ·光学检测 | 第46-47页 |
| ·修饰酶热稳定性分析 | 第47-48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-54页 |
| ·蓖麻凝集素亲和层析柱偶联效果 | 第48-49页 |
| ·Gal-GOD的分离 | 第49页 |
| ·GOD修饰前后的光学检测 | 第49-53页 |
| ·考马斯亮蓝法标准曲线 | 第49-51页 |
| ·吸收光谱比较 | 第51-52页 |
| ·荧光光谱比较 | 第52-53页 |
| ·热稳定性分析 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 小结与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
