中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-25页 |
1 土壤石油污染危害 | 第11-12页 |
2 土壤石油污染微生物修复 | 第12-13页 |
3 降解石油的微生物种类 | 第13-14页 |
4 微生物对烃的传输和摄取 | 第14-15页 |
5 石油烃类的降解途径 | 第15-17页 |
·烷烃的降解 | 第15-16页 |
·环烷烃的降解 | 第16页 |
·芳香烃的降解 | 第16-17页 |
6 微生物降解石油的影响因素 | 第17-19页 |
·环境因素 | 第17-18页 |
·生物因素 | 第18页 |
·石油烃状况 | 第18-19页 |
7 分子生物学技术在石油微生物研究中的应用 | 第19-23页 |
·聚合酶链式反应法 | 第20页 |
·165 rRNA 序列分析 | 第20-21页 |
·变性梯度凝胶电泳 | 第21-23页 |
8 石油污染微生物修复发展方向 | 第23-25页 |
·同生菌群的培养 | 第23页 |
·表面活性剂的应用 | 第23-24页 |
·降解菌的质粒研究与基因工程菌的开发 | 第24页 |
·加强系统工程的研究 | 第24-25页 |
第二部分 实验方法与结果 | 第25-49页 |
1 材料与方法 | 第25-34页 |
·石油降解菌菌种来源 | 第25页 |
·不同来源石油降解菌的分离 | 第25-26页 |
·石油中石油烃降解菌的分离 | 第25页 |
·土壤中石油烃降解菌的富集及分离纯化 | 第25-26页 |
·石油降解菌基于PCR-DGGE 法的分析鉴定 | 第26-31页 |
·纯化菌株和混合菌群DNA 的提取 | 第27-28页 |
·纯化菌株及混合菌群的PCR-DGGE | 第28-30页 |
·石油降解菌纯菌株的测序与进化树的构建 | 第30-31页 |
·石油降解菌株和富集混合菌的石油烃降解能力研究 | 第31-32页 |
·石油降解菌株的石油烃降解能力研究 | 第31页 |
·富集混合菌的石油烃降解能力研究 | 第31-32页 |
·高效石油降解菌酶学性质研究 | 第32-33页 |
·脱氢酶活性测定 | 第32-33页 |
·邻苯二酚2,3-双加氧酶活性测定 | 第33页 |
·高效石油降解菌群的构建 | 第33-34页 |
·石油降解微生物菌群构建原则及方法 | 第33-34页 |
·组合菌柴油降解能力测定 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-46页 |
·不同来源细菌分离结果 | 第34页 |
·石油降解菌株的PCR-DGGE 分析 | 第34-36页 |
·纯菌株DNA 提取和165 rDNA V3 区扩增结果 | 第34-35页 |
·纯菌株DGGE 结果 | 第35-36页 |
·纯菌株和富集混合菌群石油降解能力分析 | 第36-37页 |
·高效石油降解菌株的测序与进化树的构建 | 第37-39页 |
·纯菌株165 rDNA 扩增结果 | 第37-38页 |
·同源性分析及进化树的建立 | 第38-39页 |
·高效石油降解菌株的脱氢酶和邻苯二酚2,3-双加氧酶活性 | 第39-41页 |
·石油降解菌脱氢酶活性 | 第39-40页 |
·石油降解菌邻苯二酚2,3-双加氧酶活性 | 第40-41页 |
·富集培养混合菌PCR-DGGE 分析 | 第41-44页 |
·混合菌DNA 提取和165 rDNA V3 区扩增结果 | 第41页 |
·不同富集条件下混合菌DGGE 分析 | 第41-43页 |
·不同富集条件下混合菌DGGE 结果与纯菌株DGGE 结果的比对 | 第43-44页 |
·石油降解组合菌群的构建及其柴油降解能力分析 | 第44-46页 |
·石油降解组合菌群的构建依据 | 第44页 |
·石油降解组合菌群柴油降解能力的分析 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55页 |