中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-19页 |
·引言 | 第9-10页 |
·光合细菌产氢研究进展 | 第10-15页 |
·重组载体定点敲除基因方法介绍 | 第15-16页 |
·研究内容及技术路线 | 第16-17页 |
·研究内容 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17页 |
·创新之处 | 第17-19页 |
2 菌株的分离纯化及鉴定 | 第19-27页 |
·试剂与仪器 | 第19-21页 |
·菌株 | 第19页 |
·主要试剂及培养基 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·细菌的分离与纯化 | 第21页 |
·菌落形态、培养特征和菌体观察 | 第21-22页 |
·16S rDNA 扩增与测序比对 | 第22-23页 |
·回收产物与载体pMD18-T 连接 | 第23页 |
·氯化钙法高效感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·氯化钙法热击转化 | 第24页 |
·测序 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-26页 |
·菌株的获得 | 第24页 |
·菌落和菌体形态观察 | 第24-25页 |
·16S rDNA 序列扩增结果 | 第25-26页 |
·16S rDNA 序列分析 | 第26页 |
·本章小结 | 第26-27页 |
3 沼泽红假单胞菌吸氢酶缺失突变株的构建 | 第27-46页 |
·引言 | 第27-28页 |
·材料、试剂与仪器 | 第28-31页 |
·菌株、载体和引物 | 第28-29页 |
·主要试剂 | 第29-31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
·细菌全基因组DNA 提取 | 第31-32页 |
·hupL 两侧基因克隆及测序 | 第32-33页 |
·自杀载体pBPZ 的构建与鉴定 | 第33-39页 |
·R. palustris hupL 缺失突变株的筛选及鉴定 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-44页 |
·基因扩增结果 | 第40页 |
·pBPZ 载体构建结果 | 第40-42页 |
·R. palustris hupL 缺失突变株的验证 | 第42-44页 |
·R. palustris hupL 缺失突变株稳定性测定 | 第44页 |
·本章小结 | 第44-46页 |
4 沼泽红假单胞菌野生菌株与突变株的产氢特性 | 第46-53页 |
·试剂与仪器 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·仪器 | 第46页 |
·亚甲基蓝显色法测定吸氢酶活性 | 第46-47页 |
·生长特性及氢气产量测定 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-52页 |
·突变株吸氢酶活性测定 | 第47-48页 |
·野生菌株与突变株生长特性比较 | 第48-49页 |
·野生菌株与突变株产氢特性比较 | 第49-52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
5 主要研究结论及后续研究建议 | 第53-56页 |
·分离筛选获得两株产氢沼泽红假单胞菌 | 第53页 |
·成功构建沼泽红假单胞菌吸氢酶缺失突变株 | 第53-54页 |
·突变株产氢量约提高 50% | 第54页 |
·研究方法的评价 | 第54-55页 |
·后续研究建议 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-63页 |
作者在攻读硕士学位期间发表论文 | 第63页 |
作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第63页 |