致谢 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
目次 | 第12-13页 |
1 引言 | 第13-16页 |
2 主要仪器设备、材料与试剂 | 第16-27页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·主要耗材 | 第17-18页 |
·细胞、细菌及其培养液 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-20页 |
·缓冲液和试剂的配制 | 第20-27页 |
3 原理和技术路线 | 第27-35页 |
·酵母双杂交技术 | 第27-29页 |
·免疫共沉淀技术 | 第29-30页 |
·荧光共振能量转移技术 | 第30-32页 |
·免疫荧光技术 | 第32-33页 |
·GST融合蛋白下拉技术 | 第33-35页 |
4 实验方法 | 第35-51页 |
·质粒的构建 | 第35-42页 |
·酵母细胞感受态的制备 | 第42-43页 |
·酵母细胞的转化 | 第43页 |
·X-gal活性检测 | 第43-44页 |
·~(35)[S]标记的颗粒蛋白前体蛋白的体外表达 | 第44页 |
·免疫共沉淀 | 第44-45页 |
·细胞培养 | 第45页 |
·激光共聚焦显微镜的观察和FRET分析 | 第45-46页 |
·间接免疫荧光实验 | 第46页 |
·GST融合蛋白的原核表达 | 第46-47页 |
·GST pull-down试验 | 第47页 |
·蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第47-49页 |
·Western印迹 | 第49页 |
·荧光素酶活性检测 | 第49-50页 |
·Luciferase活性实验的数据处理 | 第50-51页 |
5 结果 | 第51-74页 |
1 质粒的构建和鉴定 | 第51-53页 |
2 颗粒蛋白前体和血管生成素相互作用的鉴定及验证 | 第53-61页 |
3 颗粒蛋白前体抑制血管生成素促ABE转录活性 | 第61-62页 |
4 颗粒蛋白前体与血管生成素之间的相互作用位点 | 第62-71页 |
5 颗粒蛋白前体的结构域grnPGF和grnDE均能抑制血管生成素的促ABE转录活性 | 第71-74页 |
6 讨论 | 第74-78页 |
7 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
综述一 | 第84-96页 |
综述二 | 第96-110页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第110-111页 |