| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 英文缩写注解 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 技术路线一 | 第16-17页 |
| 第一章:PDXA12启动子的克隆、pPDXA12-EGFP-C3载体的构建及其体外转染试验 | 第17-41页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| ·质粒 | 第17页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·细胞株 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17-18页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-24页 |
| ·DPDXA1-pMD19T和DPDXA2-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第18-20页 |
| ·PDXA1-pMD19T和PDXA2-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第20-21页 |
| ·用双酶切方法构建PDXA12-pMD19T载体 | 第21页 |
| ·亚克隆重组子pPDXA12-EGFP-C3构建及鉴定 | 第21-22页 |
| ·重组载体体外转染实验 | 第22-24页 |
| 技术路线二 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-37页 |
| ·DPDXA1-pMD19T和DPDXA2-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第25-26页 |
| ·PDXA1-pMD19T和PDXA2-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第26-29页 |
| ·重组质粒PDXA12-pMD19T构建及鉴定结果 | 第29-31页 |
| ·亚克隆重组子pPDXA12-EGFP-C3构建及鉴定结果 | 第31-34页 |
| ·重组载体体外转染实验 | 第34-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 第二章:rPNCE-Lenti1259慢病毒载体的构建、体外转染试验及慢病毒感染人类ES细胞 | 第41-63页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| ·质粒 | 第41页 |
| ·菌株 | 第41页 |
| ·细胞株 | 第41-42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| ·MPDXA12-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第42页 |
| ·MPDXA12亚克隆到慢病毒载体Lenti1259载体中 | 第42-43页 |
| ·重组载体体外转染实验 | 第43页 |
| ·饲养层的制备 | 第43页 |
| ·人类ES细胞的培养与冻存 | 第43-44页 |
| ·用慢病毒方法感染人类ES细胞 | 第44-45页 |
| 技术路线三 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-57页 |
| ·MPDXA12-pMD19T重组载体构建及鉴定 | 第46-48页 |
| ·亚克隆重组子rPNCE-Lenti1259慢病毒载体的构建及鉴定结果 | 第48-51页 |
| ·重组慢病毒载体rPNCE-Lenti1259体外转染实验 | 第51-53页 |
| ·人类ES细胞的培养 | 第53-54页 |
| ·慢病毒感染人类ES细胞 | 第54-57页 |
| 4 讨论 | 第57-62页 |
| ·rPNCE-Lenti1259慢病毒载体的构建及其鉴定 | 第57-59页 |
| ·人ES细胞的培养及感染人ES细胞 | 第59-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 综述 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 个人简历 | 第75页 |
