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重组酿酒酵母乙醇高产菌株的构建及清洁发酵工艺研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-10页
第一章 文献综述第10-27页
   ·乙醇的国内外发展状况和发展前景第10-12页
     ·国外乙醇发展状况第10-11页
     ·我国的乙醇发展状况第11-12页
   ·发酵法生产乙醇的研究第12-17页
     ·发酵法生产乙醇的原料第12页
     ·发酵法生产乙醇的工艺第12-16页
       ·干碾法与湿碾法第12-14页
       ·浓醪发酵第14-16页
     ·酿酒酵母代谢工程研究第16-17页
   ·酿酒酵母发酵乙醇的生物代谢机理第17-21页
     ·乙醇发酵的代谢途径第18页
     ·甘油生成的生理意义第18-19页
     ·酿酒酵母中甘油的生成与运输第19-20页
     ·酿酒酵母的铵代谢途径第20-21页
   ·发酵过程的动力学研究第21-22页
   ·发酵条件的优化研究第22-25页
     ·发酵的影响因素第22-24页
     ·发酵条件的优化方法第24-25页
   ·选题背景以及研究内容第25-27页
第二章 实验材料与方法第27-48页
   ·菌株与质粒第27-28页
   ·药品与试剂第28-31页
   ·培养基第31-33页
     ·基因操作用培养基第31-32页
     ·发酵用培养基第32-33页
   ·主要仪器第33-34页
   ·主要基因操作方法第34-40页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第34-35页
     ·大肠杆菌的转化(CaC1_2 法)第35页
     ·质粒的提取(CTAB 法)第35页
     ·酵母染色体的快速分离第35-36页
     ·酵母细胞的转化第36页
     ·凝胶电泳法检测DNA第36-37页
     ·DNA 的纯化第37页
     ·DNA 连接反应第37-38页
     ·酵母交配型的验证第38-39页
     ·二倍体细胞的孢子形成以及四分体拆分第39页
     ·3′-凹端的补平第39-40页
   ·发酵过程的主要分析方法第40-45页
     ·菌体生长量的检测第40页
     ·还原糖测定第40-41页
     ·总糖的测定第41页
     ·甘油含量测定第41页
     ·乙醇含量测定第41-42页
     ·乙酸含量测定第42-44页
     ·活菌计数方法第44页
     ·细胞干重的测定第44-45页
     ·CO_2测定第45页
   ·玉米糖化液的制备方法第45-46页
   ·种子培养与接种第46-48页
第三章 GDH1 基因缺失菌株的构建与发酵性能考查第48-63页
   ·pUC18-RKUR质粒的构建第48-51页
     ·Kl.URA3 基因的扩增第49-50页
     ·载体的制备第50页
     ·连接,构建质粒第50-51页
     ·pUC18-RKUR质粒的应用第51页
   ·GDH1 基因缺失菌株的构建第51-56页
     ·所用质粒的构建第51-54页
     ·Δgdh1 菌株的构建第54-56页
     ·在工业菌株中过量表达 GLN1 基因第56页
   ·GDH1 基因缺失菌株的发酵性能考查第56-61页
     ·发酵条件第56-57页
     ·结果与讨论第57-61页
   ·本章小结第61-63页
第四章 双倍体基因工程菌株的构建及发酵性能考察第63-79页
   ·双倍体菌株的构建第63-67页
     ·交配型转换法构建双倍体第63-65页
     ·杂交法构建双倍体第65-67页
   ·双倍体菌株的发酵性能比较第67-69页
   ·接种量对KZ4-D发酵性能的影响第69-70页
   ·添加氨基酸对KZ4-D的影响第70-72页
   ·KZ4-D 的乙醇抗性研究第72-76页
   ·KZ4-D 在5L 发酵罐中的代谢情况第76-78页
   ·本章小结第78-79页
第五章 清液发酵及其动力学研究第79-92页
   ·清液发酵与传统发酵比较第79-82页
   ·清液发酵的动力学特性第82-87页
     ·菌体生长的动力学模型第82-84页
     ·产物生成的动力学第84-85页
     ·基质消耗的动力学模型第85-87页
   ·清液发酵营养条件的确定第87-91页
   ·本章小结第91-92页
第六章 乙醇高产重组菌株的发酵条件优化第92-103页
   ·玉米面的选择第92-94页
   ·液化酶和糖化酶的最佳条件的选择第94-96页
     ·液化酶作用温度的考查第94页
     ·液化酶添加量的影响第94页
     ·底物pH 对液化酶作用的影响第94-95页
     ·糖化酶作用温度的考查第95页
     ·糖化酶添加量对糖化效果的影响第95-96页
     ·底物pH 对糖化酶作用的影响第96页
   ·发酵条件的优化第96-102页
     ·Plackett-Burman 设计寻找重要因素第97-98页
     ·响应曲面法考察重要因素第98-102页
     ·优化条件的验证实验第102页
   ·本章小结第102-103页
第七章 结论与展望第103-105页
   ·结论第103-104页
   ·创新点第104页
   ·对今后工作的建议与展望第104-105页
参考文献第105-115页
发表论文和参加科研情况说明第115-116页
致谢第116页

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