ABSTRACT | 第1-10页 |
Chapter 1 Literature review | 第10-22页 |
·Research progress of insects odorant binding proteins | 第11-22页 |
·OBP research methods | 第11-13页 |
·OBP types and existing sites | 第13-15页 |
·OBP of biochemistry | 第15页 |
·OBP biosynthesis and degradation | 第15-16页 |
·OBP physiological function | 第16-18页 |
·Odorant binding proteins and neural membrane protein interactions between caused by chemical signal transduction | 第18-20页 |
·Prospect | 第20-22页 |
Chapter 2 Research content and the technical route | 第22-24页 |
·Research content | 第22-23页 |
·PxPBPⅠgene cloning and sequence analysis | 第22页 |
·PxPBPⅠgene prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation | 第22页 |
·PxPBPⅠgene transcription and expression profile of PxPBPⅠ | 第22-23页 |
·Technical route (Figure 2-1) | 第23-24页 |
Chapter 3 General materials and methods | 第24-30页 |
·Materials | 第24页 |
·Insects, strain and other materials | 第24页 |
·Tools enzyme and the kit | 第24页 |
·Other reagents | 第24页 |
·Methods | 第24-27页 |
·Calcium chloride alchemical strategies for efficient competent cells | 第24-25页 |
·Plasmid DNA transforming competent cell | 第25页 |
·Alkaline method of small amount preparation for plasmid DNA | 第25页 |
·Polymerase chain reaction (PCR) | 第25-26页 |
·DNA fragment separation and recovery | 第26页 |
·Double restriction Endonuclease Reaction | 第26页 |
·Connection reaction | 第26页 |
·SDS-PAGE | 第26页 |
·Western blot | 第26-27页 |
·Expression of foreign gene in E.coli | 第27页 |
·Total RNA extraction, the mRNA purification and its 1st chain cDNA synthesis of Plutella xylostella | 第27页 |
·Conventional experiment dosing of reagent | 第27-30页 |
·LB medium | 第27页 |
·Extract plasmid DNA useing alkaline method | 第27-28页 |
·Trace agarose gel electrophoresis | 第28页 |
·SDS-PAGE reagents | 第28页 |
·Western blot reagents | 第28页 |
·ELISA reagents | 第28-29页 |
·Antibiotics | 第29页 |
·RNA enzymes | 第29-30页 |
Chapter 4 PxPBPⅠgene cloning and sequence analysis | 第30-40页 |
·Materials and methods | 第30-33页 |
·Materials | 第30页 |
·Methods | 第30-33页 |
·Results and analysis | 第33-38页 |
·P.xylostella antennae total RNA extraction,purification of mRNA and synthesis of the 1st Strand cDNA | 第33-34页 |
·PxPBPⅠgene cloning | 第34-35页 |
·Sequence analysis | 第35-38页 |
·Summary and disscussion | 第38-40页 |
·Summary | 第38页 |
·Discussion | 第38-40页 |
Chapter 5 Prokaryotic expression of PxPBPⅠgene and preparation of polyclonal antibody | 第40-47页 |
·Materials and methods | 第40-43页 |
·Materials | 第40页 |
·Methods | 第40-43页 |
·Results | 第43-46页 |
·Construction of fusion expression vector pMAL-c4E-PxPBPⅠ | 第43-44页 |
·Expression of pMAL-c4E-PxPBPⅠin TB1(DE3) | 第44-45页 |
·Express condition optimizing | 第45页 |
·Affinity chromatography purification of recombined protein PxPBPⅠ | 第45页 |
·Identification and titer determination of PxPBPⅠpolyclonal antibody | 第45-46页 |
·Summary and discussion | 第46-47页 |
·Summary | 第46页 |
·Disscussion | 第46-47页 |
Chapter 6 Transcriptional analysis and encoded protein tissue localization of PxPBPⅠ | 第47-51页 |
·Materials and method | 第47-48页 |
·Materials | 第47页 |
·Methods | 第47-48页 |
·Results | 第48-49页 |
·Transcriptional analysis | 第48-49页 |
·Expression profile of PxPBPⅠ | 第49页 |
·Summary and disscussion | 第49-51页 |
·Summary | 第49-50页 |
·Dissussion | 第50-51页 |
Chapter 7 Conclusion and disscussion | 第51-53页 |
·Conclusion | 第51页 |
·Gene cloning and sequence analysis of PxPBPⅠ | 第51页 |
·Prokaryotic expression of PxPBPⅠ and polyclonal antibody preparation | 第51页 |
·PxPBPⅠgene transcriptional analysis | 第51页 |
·Tissue localization of PxPBPⅠprotein | 第51页 |
·Discussion | 第51-53页 |
References | 第53-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |
发表论文情况 | 第57页 |