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小菜蛾触角性信息素结合蛋白Ⅰ(PxPBP Ⅰ)基因的表达谱与组织定位研究

ABSTRACT第1-10页
Chapter 1 Literature review第10-22页
   ·Research progress of insects odorant binding proteins第11-22页
     ·OBP research methods第11-13页
     ·OBP types and existing sites第13-15页
     ·OBP of biochemistry第15页
     ·OBP biosynthesis and degradation第15-16页
     ·OBP physiological function第16-18页
     ·Odorant binding proteins and neural membrane protein interactions between caused by chemical signal transduction第18-20页
     ·Prospect第20-22页
Chapter 2 Research content and the technical route第22-24页
   ·Research content第22-23页
     ·PxPBPⅠgene cloning and sequence analysis第22页
     ·PxPBPⅠgene prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation第22页
     ·PxPBPⅠgene transcription and expression profile of PxPBPⅠ第22-23页
   ·Technical route (Figure 2-1)第23-24页
Chapter 3 General materials and methods第24-30页
   ·Materials第24页
     ·Insects, strain and other materials第24页
     ·Tools enzyme and the kit第24页
     ·Other reagents第24页
   ·Methods第24-27页
     ·Calcium chloride alchemical strategies for efficient competent cells第24-25页
     ·Plasmid DNA transforming competent cell第25页
     ·Alkaline method of small amount preparation for plasmid DNA第25页
     ·Polymerase chain reaction (PCR)第25-26页
     ·DNA fragment separation and recovery第26页
     ·Double restriction Endonuclease Reaction第26页
     ·Connection reaction第26页
     ·SDS-PAGE第26页
     ·Western blot第26-27页
     ·Expression of foreign gene in E.coli第27页
     ·Total RNA extraction, the mRNA purification and its 1st chain cDNA synthesis of Plutella xylostella第27页
   ·Conventional experiment dosing of reagent第27-30页
     ·LB medium第27页
     ·Extract plasmid DNA useing alkaline method第27-28页
     ·Trace agarose gel electrophoresis第28页
     ·SDS-PAGE reagents第28页
     ·Western blot reagents第28页
     ·ELISA reagents第28-29页
     ·Antibiotics第29页
     ·RNA enzymes第29-30页
Chapter 4 PxPBPⅠgene cloning and sequence analysis第30-40页
   ·Materials and methods第30-33页
     ·Materials第30页
     ·Methods第30-33页
   ·Results and analysis第33-38页
     ·P.xylostella antennae total RNA extraction,purification of mRNA and synthesis of the 1st Strand cDNA第33-34页
     ·PxPBPⅠgene cloning第34-35页
     ·Sequence analysis第35-38页
   ·Summary and disscussion第38-40页
     ·Summary第38页
     ·Discussion第38-40页
Chapter 5 Prokaryotic expression of PxPBPⅠgene and preparation of polyclonal antibody第40-47页
   ·Materials and methods第40-43页
     ·Materials第40页
     ·Methods第40-43页
   ·Results第43-46页
     ·Construction of fusion expression vector pMAL-c4E-PxPBPⅠ第43-44页
     ·Expression of pMAL-c4E-PxPBPⅠin TB1(DE3)第44-45页
     ·Express condition optimizing第45页
     ·Affinity chromatography purification of recombined protein PxPBPⅠ第45页
     ·Identification and titer determination of PxPBPⅠpolyclonal antibody第45-46页
   ·Summary and discussion第46-47页
     ·Summary第46页
     ·Disscussion第46-47页
Chapter 6 Transcriptional analysis and encoded protein tissue localization of PxPBPⅠ第47-51页
   ·Materials and method第47-48页
     ·Materials第47页
     ·Methods第47-48页
   ·Results第48-49页
     ·Transcriptional analysis第48-49页
     ·Expression profile of PxPBPⅠ第49页
   ·Summary and disscussion第49-51页
     ·Summary第49-50页
     ·Dissussion第50-51页
Chapter 7 Conclusion and disscussion第51-53页
   ·Conclusion第51页
     ·Gene cloning and sequence analysis of PxPBPⅠ第51页
     ·Prokaryotic expression of PxPBPⅠ and polyclonal antibody preparation第51页
     ·PxPBPⅠgene transcriptional analysis第51页
     ·Tissue localization of PxPBPⅠprotein第51页
   ·Discussion第51-53页
References第53-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页
发表论文情况第57页

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