| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-29页 |
| ·大麦黄矮病毒的研究进展 | 第11-15页 |
| ·大麦黄矮病毒的生物学特性 | 第11页 |
| ·大麦黄矮病毒的分类地位 | 第11页 |
| ·大麦黄矮病毒的株系划分 | 第11-12页 |
| ·大麦黄矮病毒的基因组结构 | 第12-14页 |
| ·大麦黄矮病毒的基因功能 | 第14-15页 |
| ·大麦黄矮病毒的常规检测方法 | 第15页 |
| ·环介导等温扩增技术-LAMP 的研究进展 | 第15-20页 |
| ·LAMP 的引物设计 | 第15-16页 |
| ·扩增原理 | 第16页 |
| ·LAMP 扩增产物的检测 | 第16-18页 |
| ·LAMP 的特点 | 第18页 |
| ·LAMP 反应体系 | 第18-19页 |
| ·LAMP 的应用领域 | 第19-20页 |
| ·LAMP 的展望 | 第20页 |
| ·RNA 沉默与病毒编码的RNA 沉默抑制子 | 第20-28页 |
| ·RNA 沉默研究进展 | 第20-24页 |
| ·病毒编码的RNA 沉默抑制子 | 第24-28页 |
| ·本实验的研究目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-36页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·试验材料 | 第29页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·酶及生化试剂 | 第29页 |
| ·RNAi 抑制子鉴定相关引物 | 第29-30页 |
| ·基本实验方法 | 第30-36页 |
| ·植物总RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·RNA 反转录成cDNA | 第31页 |
| ·DNA 凝胶回收操作步骤 | 第31页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第31-32页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第32页 |
| ·质粒DNA 小量提取操作步骤 | 第32页 |
| ·T4 连接方法 | 第32页 |
| ·制备农杆菌感受态细胞 | 第32-33页 |
| ·农杆菌转化 | 第33页 |
| ·接种菌液的制备 | 第33页 |
| ·烟草16C 基因沉默表型的观察 | 第33页 |
| ·Western blot 检测 | 第33-36页 |
| 第三章 LAMP 快速检测BYDV-GAV，GPV，PAV | 第36-42页 |
| ·RT-LAMP 检测方法的建立 | 第36-37页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·大麦黄矮病毒的RT-LAMP 体系建立 | 第36-37页 |
| ·RT-LAMP 的特异性试验 | 第37页 |
| ·大麦黄矮病毒RT-PCR 检测方法的建立 | 第37页 |
| ·RT-LAMP 的检测灵敏度试验 | 第37页 |
| ·RT-LAMP 检测田间样品 | 第37页 |
| ·RT-LAMP 结果与分析 | 第37-41页 |
| ·RT-LAMP 引物 | 第37-38页 |
| ·大麦黄矮病毒(PAV,GAV,GPV )RT-LAMP 检测结果 | 第38-39页 |
| ·LAMP 敏感性试验 | 第39页 |
| ·LAMP 特异性试验 | 第39-40页 |
| ·用RT-LAMP 检测体系检测田间样品 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第四章 BYDV-GAV，GPV 沉默抑制子的初步鉴定 | 第42-52页 |
| ·载体的构建 | 第42-47页 |
| ·大麦黄矮病毒GPV-pGD 载体的构建 | 第42-43页 |
| ·pBinPLUS 双元质粒载体的构建 | 第43-47页 |
| ·沉默表型观察 | 第47-50页 |
| ·接种植株的Western blot 检测 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·抑制因子干扰基因沉默的可能机制 | 第50页 |
| ·抑制基因沉默过程的影响因素 | 第50-52页 |
| 第五章 全文结论 | 第52-53页 |
| ·RT-LAMP 快速检测BYDV-GAV，GPV，PAV | 第52页 |
| ·对BYDV-GAV，GPV 编码的基因沉默抑制子的初步鉴定 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
