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东南景天镉超积累相关基因的克隆与功能研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-17页
主要缩略词表第17-18页
第一章 文献综述第18-28页
   ·土壤镉污染现状及对植物的危害第18-20页
     ·中国的土壤镉污染现状第18页
     ·镉对植物的毒害效应第18-19页
     ·植物修复技术与镉超积累植物第19-20页
   ·植物镉耐受或积累相关基因的分离鉴定方法第20-22页
     ·cDNA-AFLP方法第20-21页
     ·基因芯片技术第21-22页
     ·酵母功能互补第22页
     ·QTL技术第22页
   ·植物耐受或积累镉相关基因的功能研究进展第22-25页
     ·金属离子转运子功能研究进展第23-24页
     ·植物螯合肽合成酶基因功能研究进展第24页
     ·植物金属硫蛋白编码基因研究进展第24-25页
   ·本研究意义及内容第25-28页
     ·研究意义第25-26页
     ·研究内容第26-28页
第二章 利用cDNA-AFLP技术分离超积累生态型东南景天镉响应的基因第28-46页
   ·引言第28-29页
   ·材料和方法第29-33页
     ·植物培养及处理第29页
     ·总RNA提取、mRNA纯化和cDNA合成第29-30页
     ·cDNA-AFLP分析第30-32页
     ·cDNA-AFLP差异片段的回收、克隆及测序第32-33页
     ·Real-time RT-PCR验证cDNA-AFLP结果第33页
   ·结果与分析第33-43页
     ·镉处理下两种生态型东南景天基因表达的cDNA-AFLP分析第33-39页
     ·实时荧光定量PCR验证cDNA-AFLP结果第39-42页
     ·基因功能分析第42-43页
   ·讨论第43-46页
第三章 SaPsbS基因的克隆及其功能分析第46-56页
   ·引言第46-47页
   ·材料与方法第47-48页
     ·植物培养第47页
     ·东南景天的叶绿素荧光参数测定第47页
     ·实时荧光定量PCR分析PsbS基因的表达水平第47页
     ·SaPsbS全长基因的克隆及转基因烟草的构建第47-48页
     ·转基因烟草的叶绿素荧光参数测定及镉耐性分析第48页
     ·数据统计分析第48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·镉对东南景天叶绿素荧光参数和PsbS基因表达的影响第48-49页
     ·超积累生态型东南景天PsbS基因的克隆及序列分析第49-51页
     ·转基因烟草的镉耐性和含量分析第51-53页
   ·讨论第53-56页
第四章 SaLhcb2基因的克隆及其功能分析第56-64页
   ·引言第56-57页
   ·材料与方法第57页
     ·植物培养及锌/镉处理水平第57页
     ·实时荧光定量PCR分析Lhcb2基因的表达水平第57页
     ·SaLhcb2全长基因的克隆及表达载体构建第57页
     ·转基因烟草的镉耐性及含量分析第57页
     ·数据统计分析第57页
   ·结果与分析第57-62页
     ·锌/镉处理对两种生态型东南景天Lhcb2基因表达的影响第57-58页
     ·SaLhcb2全长基因克隆及序列分析第58-60页
     ·超表达SaLhcb2对烟草生长的影响第60-62页
     ·超表达SaLhcb2对烟草镉积累的影响第62页
   ·讨论第62-64页
第五章 SaHMA2和SnHMA2基因的克隆及其功能研究第64-82页
   ·引言第64-65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·SaHMA2和SnHMA2全长基因克隆及序列分析第65页
     ·载体构建方法第65-66页
     ·转运子在洋葱表皮细胞和酵母体内的定位第66页
     ·酵母材料及重金属耐性分析第66-67页
     ·酵母的锌、镉含量测定第67页
     ·植物材料培养及Zn/Cd处理水平第67页
     ·实时荧光定量PCR检测SaHMA2和SnHMA2的表达量第67-68页
     ·转基因烟草的构建及其镉耐性/积累分析第68页
     ·数据统计分析第68页
   ·结果与分析第68-80页
     ·SaHMA2和SnHMA2全长基因的克隆及序列分析第68-71页
     ·SaHMA2和SnHMA2在洋葱表皮细胞的定位分析第71-72页
     ·△zrc1酵母表达SaHMA2或SnHMA2后对锌、镉的耐性分析第72-74页
     ·ycf1酵母表达SaHMA2或SnHMA2后对镉的耐性/积累分析第74-75页
     ·SaHMA2和SnHMA2在酵母体内的定位分析第75-77页
     ·SaHMA2和SnHMA2基因在Zn/Cd处理下的表达水平分析第77-78页
     ·转基因烟草的镉耐性/积累分析第78-80页
   ·讨论第80-82页
第六章 SaMTP1和SnMTP1基因的克隆及其功能研究第82-94页
   ·引言第82-83页
     ·材料与实验方法第83-85页
     ·Zn在超积累生态型东南景天叶片的微区分布情况第83页
     ·SaMTP1和SnMTP1全长基因克隆及序列分析第83-84页
     ·载体构建方法第84页
     ·酵母材料和Zn耐性、含量测定第84页
     ·SaMTP1和SnMTP1在洋葱表皮细胞和酵母体内的定位第84页
     ·植物材料及培养方法第84-85页
     ·SaMTP1和SnMTP1的表达量分析第85页
     ·转基因烟草的构建及其锌耐性、含量分析第85页
     ·数据统计方法第85页
   ·结果与分析第85-92页
     ·超积累生态型东南景天叶片的锌微区分布情况第85-86页
     ·SaMTP1和SnMTP1基因全长的克隆及序列分析第86-87页
     ·△zrc1酵母表达SaMTP1或SnMTP1后对锌的耐性及含量第87-89页
     ·SaMTP1和SnMTP1基因在△zrc1酵母突变体内的定位第89-90页
     ·SaMTP1和SnMTP1的亚细胞定位分析第90-91页
     ·SaMTP1和SnMTP1基因在Zn/Cd处理下的表达分析第91页
     ·转基因烟草的锌含量分析第91-92页
   ·讨论第92-94页
第七章 SaCAX2和SnCAX2基因的克隆及其功能研究第94-104页
   ·引言第94-95页
   ·材料与方法第95-96页
     ·镉在超积累生态型东南景天叶片的微区分布第95页
     ·SaCAX2和SnCAX2基因全长的克隆第95页
     ·载体构建方法第95页
     ·酵母材料和酵母钙、镉耐性测试第95-96页
     ·植物材料培养和处理第96页
     ·两种生态型东南景天的CAX2基因的表达水平分析第96页
     ·转基因烟草的构建及其镉含量分析第96页
     ·数据统计方法第96页
   ·结果与分析第96-101页
     ·镉在超积累生态型东南景天叶片的微区分布第96-97页
     ·SaCAX2和SnCAX2基因全长的克隆及序列分析第97-98页
     ·表达SaCAX2或SnCAX2后酵母突变体对钙、镉的耐性分析第98-100页
     ·SaCAX2和SnCAX2基因在Zn/Cd处理下的表达水平分析第100页
     ·转基因烟草的镉含量分析第100-101页
   ·讨论第101-104页
第八章 主要研究结论、创新点与研究展望第104-106页
   ·研究结论第104-105页
   ·创新点第105页
   ·研究展望第105-106页
参考文献第106-124页
致谢第124-125页
攻读博士学位期间的主要成果第125-126页

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