摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第1章 绪论 | 第8-20页 |
·核受体概述 | 第8-12页 |
·HNF4α的结构和功能 | 第12-13页 |
·PLA2和PLA2GXIIB 的研究进展 | 第13-17页 |
·MTP 的研究进展 | 第17-20页 |
第2章 HNF4α通过 PLAGXIIB 调节小鼠肝脏甘油三酯代谢 | 第20-32页 |
·前言 | 第20-21页 |
·材料与方法 | 第21-25页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·实验器材 | 第21-22页 |
·实验动物的繁育 | 第22页 |
·PLA2GXIIB 基因敲除小鼠的基因型鉴定 | 第22页 |
·质粒构建 | 第22页 |
·转染和萤光素酶检测 | 第22-23页 |
·总RNA 提取及荧光定量PCR | 第23页 |
·Western Blot 检测蛋白表达 | 第23页 |
·染色体组免疫共沉淀(ChIP) | 第23-24页 |
·重组腺病毒拯救及感染小鼠 | 第24页 |
·PLA2GXIIB 基因敲除小鼠肝脏VLDL-TG 输出率测定 | 第24-25页 |
·结果 | 第25-31页 |
·HNF4α对PLA2GXIIB 的转录调控 | 第25-26页 |
·HNF4α配体调节PLA2GXIIB 的表达 | 第26-27页 |
·携带HNF4α和PLA2GXIIB 腺病毒的构建及其功能鉴定 | 第27-29页 |
·Ad5-HNF4α提高野生型小鼠血清中甘油三酯的水平 | 第29-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
第3章 饥饿状态下 HNF4α对 MTP 的表达调控 | 第32-40页 |
·前言 | 第32页 |
·材料与方法 | 第32-34页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·质粒构建 | 第33页 |
·转染和萤光素酶检测 | 第33页 |
·总RNA 提取及荧光定量PCR | 第33页 |
·Western Blot 检测蛋白表达 | 第33页 |
·C578L/6J 小鼠和细胞处理 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-38页 |
·饥饿状态下肝细胞内MTP 表达量上升 | 第34-35页 |
·HNF4α转录调控MTP 的表达 | 第35页 |
·HNF4α激动剂上调MTP 基因的表达 | 第35-36页 |
·HNF4αsiRNA 下调MTP 基因的表达 | 第36-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
附录 1 Western Blot 操作流程 | 第46-48页 |
附录 2 总 RNA 提取及荧光定量 PCR | 第48-50页 |
附录 3 染色体免疫共沉淀(ChIP) | 第50-52页 |
附录 4 重组腺病毒构建及鉴定 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第58页 |