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HNF4a对PLA2GXIIB和MTP的转录调控

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第1章 绪论第8-20页
   ·核受体概述第8-12页
   ·HNF4α的结构和功能第12-13页
   ·PLA2和PLA2GXIIB 的研究进展第13-17页
   ·MTP 的研究进展第17-20页
第2章 HNF4α通过 PLAGXIIB 调节小鼠肝脏甘油三酯代谢第20-32页
   ·前言第20-21页
   ·材料与方法第21-25页
     ·实验试剂第21页
     ·实验器材第21-22页
     ·实验动物的繁育第22页
     ·PLA2GXIIB 基因敲除小鼠的基因型鉴定第22页
     ·质粒构建第22页
     ·转染和萤光素酶检测第22-23页
     ·总RNA 提取及荧光定量PCR第23页
     ·Western Blot 检测蛋白表达第23页
     ·染色体组免疫共沉淀(ChIP)第23-24页
     ·重组腺病毒拯救及感染小鼠第24页
     ·PLA2GXIIB 基因敲除小鼠肝脏VLDL-TG 输出率测定第24-25页
   ·结果第25-31页
     ·HNF4α对PLA2GXIIB 的转录调控第25-26页
     ·HNF4α配体调节PLA2GXIIB 的表达第26-27页
     ·携带HNF4α和PLA2GXIIB 腺病毒的构建及其功能鉴定第27-29页
     ·Ad5-HNF4α提高野生型小鼠血清中甘油三酯的水平第29-31页
   ·讨论第31-32页
第3章 饥饿状态下 HNF4α对 MTP 的表达调控第32-40页
   ·前言第32页
   ·材料与方法第32-34页
     ·实验材料第32-33页
     ·质粒构建第33页
     ·转染和萤光素酶检测第33页
     ·总RNA 提取及荧光定量PCR第33页
     ·Western Blot 检测蛋白表达第33页
     ·C578L/6J 小鼠和细胞处理第33-34页
   ·结果第34-38页
     ·饥饿状态下肝细胞内MTP 表达量上升第34-35页
     ·HNF4α转录调控MTP 的表达第35页
     ·HNF4α激动剂上调MTP 基因的表达第35-36页
     ·HNF4αsiRNA 下调MTP 基因的表达第36-38页
   ·讨论第38-40页
参考文献第40-46页
附录 1 Western Blot 操作流程第46-48页
附录 2 总 RNA 提取及荧光定量 PCR第48-50页
附录 3 染色体免疫共沉淀(ChIP)第50-52页
附录 4 重组腺病毒构建及鉴定第52-57页
致谢第57-58页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第58页

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