| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1. 植物的抗旱耐盐研究和基因转化与检测的方法 | 第12-19页 |
| ·牧草盐碱地种植概况、耐盐性及抗旱耐盐研究进展 | 第12-13页 |
| ·国内外牧草盐碱地的种植和盐碱地改良概况 | 第12页 |
| ·植物的耐盐机制 | 第12-13页 |
| ·植物耐盐的相关基因 | 第13-15页 |
| ·渗透调节有关基因 | 第13-14页 |
| ·保护酶基因 | 第14-15页 |
| ·转录因子和传递信号基因 | 第15页 |
| ·细胞程序性死亡有关基因 | 第15页 |
| ·果聚糖的抗旱机制 | 第15-16页 |
| ·果聚糖与渗透调节 | 第15-16页 |
| ·果聚糖与膜 | 第16页 |
| ·逆境下的果聚糖酶 | 第16页 |
| ·植物基因转化与检测的常用方法 | 第16-19页 |
| ·植物基因转化的常用方法 | 第16-18页 |
| ·常用的转基因植物基因检测方法 | 第18-19页 |
| 2. 苜蓿基因工程研究 | 第19-25页 |
| ·转基因苜蓿的应用前景 | 第19-20页 |
| ·紫花苜蓿应用转基因技术进行遗传改良研究现状 | 第20-23页 |
| ·抗病基因品种的选育 | 第20页 |
| ·苜蓿抗虫基因的遗传转化 | 第20-21页 |
| ·苜蓿抗除草剂基因的转化研究 | 第21-22页 |
| ·抗逆品种选育 | 第22页 |
| ·品质改良 | 第22-23页 |
| ·苜蓿遗传转化所面临的挑战和解决的对策 | 第23-25页 |
| ·基因沉默现象 | 第23页 |
| ·进展不平衡 | 第23页 |
| ·基因来源较窄 | 第23-24页 |
| ·性状联合改良研究薄弱 | 第24页 |
| ·潜在生态危害 | 第24-25页 |
| 第二章 农杆菌介导的抗旱基因在紫花苜蓿中的转化及其转化植株的再生 | 第25-47页 |
| 1 实验材料及方法 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·植物激素 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·外植体的选取 | 第25页 |
| ·农杆菌介导的抗旱基因的转化的程序 | 第25-26页 |
| ·除KAN 外造成转化组织褐化的影响因素分析 | 第26-27页 |
| ·KAN 筛选时期和选择压的确定 | 第27页 |
| ·菌液浓度的确定 | 第27页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第27-28页 |
| ·不同侵染时间对转化的影响 | 第28页 |
| 2. 结果与讨论 | 第28-41页 |
| ·除KAN 外造成转化组织褐化的影响因素分析 | 第28-35页 |
| ·在冬夏两季三个发育阶段培养物褐化程度比较 | 第28页 |
| ·非季节性因素分析 | 第28-32页 |
| ·季节性因素分析 | 第32-35页 |
| ·卡那霉素在苜蓿基因转化再生过程中筛选时期及浓度确定 | 第35-38页 |
| ·KAN 对种子萌发的影响 | 第35-36页 |
| ·KAN 对愈伤诱导的影响 | 第36-37页 |
| ·愈伤分化再生阶段KAN 选择压的确定 | 第37页 |
| ·生根阶段KAN 选择压的确定 | 第37-38页 |
| ·菌液浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第39-40页 |
| ·不同侵染时间对转化的影响 | 第40-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-45页 |
| ·影响苜蓿组培中培养物褐化的因素及减少褐化的措施 | 第41-44页 |
| ·影响苜蓿组培中培养物褐化的因素 | 第41-43页 |
| ·减少褐化的措施 | 第43-44页 |
| ·KAN 筛选时期和浓度的确定 | 第44页 |
| ·菌液浓度、预培养时间和侵染时间对转化的影响[] | 第44-45页 |
| 4. 小结 | 第45-47页 |
| 第三章 转化组织PCR 检测及其PCR 扩增条件的优化 | 第47-57页 |
| 1 材料 | 第47-49页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·质粒和农杆菌菌株 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·生化试剂 | 第47-48页 |
| ·农杆菌质粒DNA 提取试剂 | 第48页 |
| ·植物基因组DNA 的提取试剂 | 第48页 |
| ·愈伤组织DNA 提取试剂 | 第48页 |
| ·植株DNA 提取试剂 | 第48页 |
| ·PCR 反应试剂、药品及仪器 | 第48-49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-52页 |
| ·菌种保存与活化 | 第49页 |
| ·菌种保存 | 第49页 |
| ·工程菌的纯化 | 第49页 |
| ·DNA 的提取 | 第49-51页 |
| ·质粒DNA 提取操作步骤 | 第49-50页 |
| ·愈伤组织提取DNA 步骤 | 第50页 |
| ·转化植株叶片的DNA 提取步骤 | 第50-51页 |
| ·DNA 纯度检测 | 第51页 |
| ·引物的筛选 | 第51页 |
| ·退火温度的筛选 | 第51页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第51-52页 |
| ·转化愈伤组织的PCR 检测 | 第52页 |
| 3. 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·引物的筛选 | 第52-53页 |
| ·退火温度的确定 | 第53-54页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第54页 |
| ·转化愈伤组织的PCR 检测 | 第54-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-56页 |
| 5. 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附图 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 导师简介 | 第66-67页 |
