摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-26页 |
·光敏蛋白研究意义 | 第10页 |
·光敏蛋白研究概况 | 第10-16页 |
·LOV家族 | 第11-13页 |
·phytochrome | 第13-14页 |
·光敏蛋白应用 | 第14-16页 |
·vivid研究概况 | 第16-19页 |
·vivid来源 | 第16页 |
·vivid研究进展 | 第16-17页 |
·vivid蛋白性质研究 | 第17-19页 |
·技术背景 | 第19-24页 |
·飞秒激光 | 第19页 |
·分子筛层析 | 第19-21页 |
·内含肽 | 第21-24页 |
·研究内容 | 第24页 |
·论文创新点 | 第24-26页 |
第2章 vivid基因克隆、表达与纯化 | 第26-40页 |
·实验思路 | 第26-27页 |
·实验材料和试剂 | 第27-29页 |
·实验材料 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·主要溶液配制 | 第27-29页 |
·实验方法 | 第29-36页 |
·Neurospora crassa基因组DNA提取 | 第29页 |
·vivid基因克隆 | 第29-34页 |
·vivid蛋白小量表达条件摸索 | 第34-35页 |
·vivid蛋白纯化 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-39页 |
·vivid原核表达载体构建 | 第36-38页 |
·小量表达条件摸索 | 第38-39页 |
·vivid蛋白纯化 | 第39页 |
·本章小结 | 第39-40页 |
第3章 vivid蛋白光敏性研究 | 第40-52页 |
·实验思路 | 第40页 |
·实验材料和试剂 | 第40-41页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-43页 |
·突变体基因克隆及蛋白纯化 | 第41页 |
·光恢复测定 | 第41-42页 |
·用飞秒激光器进行光激活研究 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43-51页 |
·蛋白表达和纯化 | 第43-44页 |
·光恢复测定 | 第44-50页 |
·光激活测定 | 第50-51页 |
·本章小结 | 第51-52页 |
第4章 vivid蛋白二聚化及四聚化研究 | 第52-62页 |
·实验思路 | 第52页 |
·实验材料和试剂 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-55页 |
·pET28a-vivid36-1inker-vivid36基因克隆及蛋白纯化 | 第53-54页 |
·Superdex 75 10/300 GL标准曲线绘制 | 第54-55页 |
·vivid36二聚化分析 | 第55页 |
·vivid36-linker-vivid36四聚化分析 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-61页 |
·标准曲线绘制 | 第55-56页 |
·vivid蛋白二聚化分析 | 第56-59页 |
·vivid-linker-vivid蛋白四聚化分析 | 第59-61页 |
·本章小结 | 第61-62页 |
第5章 vivid在intein中应用 | 第62-78页 |
·实验思路 | 第62-64页 |
·实验材料和试剂 | 第64-65页 |
·实验材料 | 第64页 |
·主要溶液配制 | 第64-65页 |
·实验方法 | 第65-69页 |
·质粒构建 | 第65-67页 |
·蛋白小量表达条件摸索 | 第67页 |
·模型1蛋白纯化 | 第67-68页 |
·模型1 intein反应操作及鉴定方法 | 第68-69页 |
·结果与讨论 | 第69-75页 |
·质粒构建 | 第69-72页 |
·蛋白小量表达条件摸索 | 第72-73页 |
·模型1蛋白FAD含量测定及扫谱鉴定 | 第73-75页 |
·本章小结 | 第75-78页 |
第6章 总结 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
致谢 | 第86页 |