| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 综述 壳聚糖衍生物在基因给药方面的应用 | 第10-24页 |
| 1 基因给药概述 | 第10-11页 |
| 2 壳聚糖的基本性质 | 第11-13页 |
| 3 壳聚糖的修饰改性 | 第13-20页 |
| 4 不同形态的壳聚糖载体 | 第20-21页 |
| 5 壳聚糖及其衍生物在基因给药方面的应用 | 第21-22页 |
| 6 总结 | 第22-24页 |
| 第一部分 TMC-Cys/pDNA自组装纳米粒用于提高体内外转染效率的研究 | 第24-62页 |
| 第一章 引言 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-36页 |
| 材料,试剂与仪器 | 第26-29页 |
| 实验方法 | 第29-36页 |
| 1 TMC-Cys合成 | 第29-30页 |
| 2 TMC-Cys的细胞毒性 | 第30页 |
| 3 质粒DNA的抽提纯化 | 第30-31页 |
| 4 TMC-Cys-DNA纳米粒制备及性质 | 第31-32页 |
| 5 纳米复合物的粘附特性 | 第32页 |
| 6 纳米复合物的体外释放 | 第32-33页 |
| 7 纳米复合物的细胞摄取 | 第33页 |
| 8 纳米复合物的胞内分布 | 第33-34页 |
| 9 纳米复合物的体外转染 | 第34-35页 |
| 10 纳米复合物的体内转染 | 第35-36页 |
| 第三章 结果 | 第36-53页 |
| 1 TMC-Cys的合成及性质 | 第36页 |
| 2 TMC-Cys的毒性 | 第36-37页 |
| 3 PEG纯化的质粒pEGFP-C1 | 第37-38页 |
| 4 TMC-Cys NC的制备与性质 | 第38-42页 |
| ·TMC-Cys NC粒径与zeta电势 | 第38-40页 |
| ·TMC-Cys NC形态 | 第40页 |
| ·TMC-Cys NC的EB排阻 | 第40-41页 |
| ·TMC-Cys NC抵抗DNase Ⅰ降解 | 第41-42页 |
| 5 纳米复合物的粘附特性 | 第42-43页 |
| 6 TMC-Cys NC的体外释放 | 第43页 |
| 7 TMC-Cys NC的细胞摄取以及机理研究 | 第43-46页 |
| 8 TMC-Cys NC的胞内分布 | 第46-48页 |
| 9 TMC-Cys NC的体外转染 | 第48-51页 |
| 10 TMC-Cys NC的体内转染 | 第51-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-62页 |
| 1 TMC-Cys的性质 | 第53页 |
| 2 TMC-Cys NC的粒径和zeta电势 | 第53-54页 |
| 3 TMC-Cys NC的作用力以及核酶抑制 | 第54页 |
| 4 TMC-Cys NC的粘附性 | 第54-55页 |
| 5 TMC-Cys NC的摄取以及机理研究 | 第55-57页 |
| 6 TMC-Cys NC的释放特性 | 第57-58页 |
| 7 TMC-Cys NC的胞内分布 | 第58-59页 |
| 8 TMC-Cys的体内外转染 | 第59-60页 |
| 9 小结 | 第60-62页 |
| 第二部分 载TMC-Cys/pSUPER-smad2纳米粒的3D胶原支架用于皮肤增生性瘢痕的治疗研究 | 第62-97页 |
| 第一章 引言 | 第62-64页 |
| 第二章 材料与方法 | 第64-74页 |
| 材料、试剂与仪器 | 第64-65页 |
| 实验方法 | 第65-74页 |
| 1 pSUPER-smad2质粒构建 | 第65-68页 |
| 2 纳米粒制备 | 第68-69页 |
| 3 载有纳米粒的胶原支架构建 | 第69页 |
| 4 纳米粒、胶原支架以及载有纳米粒胶原支架的形态观察 | 第69页 |
| 5 胶原支架的纳米粒包封率 | 第69页 |
| 6 DNA的体外释放 | 第69-70页 |
| 7 细胞培养 | 第70页 |
| 8 胶原支架中的细胞增殖 | 第70-71页 |
| 9 胶原支架的3D转染(三维转染法) | 第71页 |
| 10 RNA抽提和RT-PCR检测 | 第71-73页 |
| 11 皮肤成纤维细胞的蛋白检测 | 第73-74页 |
| 第三章 结果 | 第74-85页 |
| 1 pSUPER-smad2质粒构建 | 第74-76页 |
| 2 TMC-Cys/pSUPER-smad2纳米粒性质 | 第76-77页 |
| 3 纳米粒的形态 | 第77-78页 |
| 4 支架的形态 | 第78-79页 |
| 5 胶原支架的TMC-Cys/pSUPER-smad2 NC包封率 | 第79页 |
| 6 胶原支架的体外释放 | 第79-80页 |
| 7 支架中的细胞增殖 | 第80-81页 |
| 8 3D转染的RNA水平检测 | 第81-83页 |
| 9 3D转染的蛋白水平检测 | 第83-85页 |
| 第四章 讨论 | 第85-97页 |
| 1 pSUPER-smad2 RNAi质粒系统的构建 | 第85-87页 |
| 2 TMC-Cys/pSUPER-smad2纳米粒的理化性质 | 第87页 |
| 3 胶原支架的理化性质 | 第87-89页 |
| 4 纳米复合物在胶原支架内的载药量和释放 | 第89-90页 |
| 5 皮肤成纤维细胞在胶原支架中的增殖 | 第90页 |
| 6 胶原支架中皮肤成纤维细胞的RNA干扰情况 | 第90-95页 |
| 7 小结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-128页 |
| 博士期间发表论文及申请专利 | 第128-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
