| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| 1 昆虫病原真菌抗逆生物学及真菌超氧化物岐化酶研究现状 | 第12-32页 |
| ·影响生防真菌制剂药效的胁迫因子及解除策略 | 第12-21页 |
| ·生防真菌对高温胁迫的响应 | 第12-13页 |
| ·生防真菌对阳光紫外辐射胁迫的响应 | 第13-14页 |
| ·生防真菌对水活度胁迫的响应 | 第14-15页 |
| ·生防真菌对化学农药胁迫的响应 | 第15页 |
| ·生防真菌对氧化胁迫的响应 | 第15-20页 |
| ·生防真菌对其它生物因素胁迫的响应 | 第20-21页 |
| ·SOD及其在真菌抗氧化胁迫中的作用 | 第21-30页 |
| ·SOD的结构类型与分布 | 第21-24页 |
| ·真菌SOD的表达及调控 | 第24-26页 |
| ·真菌SOD的生物学功能 | 第26-30页 |
| ·展望 | 第30-32页 |
| 2 球孢白僵菌Cu/Zn-SOD的基因克隆、表达、定点突变及其免分子伴侣活性的激活 | 第32-43页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·菌株和载体 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·DNA提取 | 第33-34页 |
| ·RNA提取及反转录 | 第34页 |
| ·BbSod1基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第36页 |
| ·重组蛋白诱导表达及金属离子对其活性的影响 | 第36页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第37页 |
| ·SOD酶活及蛋白浓度测定 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·BbSod1基因及其蛋白结构分析 | 第38-40页 |
| ·重组蛋白的表达及粗酶活性 | 第40页 |
| ·重组蛋白的纯化及其活性 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 3 球孢白僵菌胞质Mn-SOD基因克隆、鉴定及其对虫生真菌毒力及抗逆性的影响 | 第43-56页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌株及载体 | 第44页 |
| ·试剂:同2.1.2 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·BbSod2基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·序列分析 | 第45页 |
| ·BbSod2表达载体构建及转化 | 第45页 |
| ·BbSod2的原核表达及纯化 | 第45页 |
| ·BbSod2纯酶性质分析 | 第45-46页 |
| ·BbSod2超表达转化子鉴定 | 第46-47页 |
| ·BbSod2超表达菌株的表型分析 | 第47-48页 |
| ·数据处理及分析 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-54页 |
| ·BbSod2基因及其编码蛋白的结构分析 | 第48-51页 |
| ·BbSod2原核表达、纯化及酶特性分析 | 第51-52页 |
| ·BbSod2在球孢白僵菌Bb2879中的超表达 | 第52页 |
| ·野生株和转化株T4的抗逆性和杀虫力分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 4 球孢白僵菌线粒体Mn-SOD的基因克隆与亚细胞定位分析 | 第56-63页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·菌株及载体 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| ·BbSod3基因克隆 | 第57-58页 |
| ·序列分析 | 第58页 |
| ·融合表达BbSod3信号肽与eGFP的双元载体构建、转化及阳性转化子筛选 | 第58页 |
| ·线粒体染色 | 第58-59页 |
| ·激光共聚焦观察 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-61页 |
| ·BbSod3基因及蛋白结构分析 | 第59-61页 |
| ·BbSod3的亚细胞定位 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 5 球孢白僵菌胞质与线粒体Mn-SOD基因的生物学功能研究 | 第63-75页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·菌株和质粒 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-68页 |
| ·Bb2860酶型分析 | 第63-64页 |
| ·BbSod2和BbSod3多克隆抗体制备 | 第64-65页 |
| ·Western杂交 | 第65页 |
| ·干扰载体构建 | 第65-67页 |
| ·真菌转化及转化子鉴定 | 第67-68页 |
| ·表型评价 | 第68页 |
| ·结果 | 第68-71页 |
| ·酶型判断 | 第68-69页 |
| ·转化子鉴定 | 第69-70页 |
| ·抗逆性评价 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-75页 |
| 6 结语 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-97页 |
| Summary | 第97-100页 |
| 附录:攻读博士学位期间的主要成果 | 第100页 |
