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拟南芥隐花素CRY1在亚细胞结构的功能分析及激活标签突变体库的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
插图索引第12-14页
附表索引第14-15页
第1章 绪论第15-31页
   ·拟南芥的研究进展第15-16页
     ·拟南芥的生物学特点第15页
     ·拟南芥的遗传组成与DNA 结构特性第15页
     ·拟南芥的研究历史第15-16页
   ·植物隐花素的研究进展第16-25页
     ·植物隐花素(Cryptochrome)的分子结构第16-17页
     ·隐花素CRY 是一种类似于光复活酶的黄素蛋白第17-18页
     ·隐花素存在于整个植物领域第18页
     ·隐花素突变体及基因第18-20页
     ·隐花素诱导的信号转导途径第20-23页
     ·隐花素与植物的光形态建成第23-25页
   ·糖皮质激素受体及其在植物基因功能研究中的应用第25-28页
     ·GR 基因结构第25-26页
     ·GR 蛋白结构第26页
     ·GR 活化入核的过程第26-27页
     ·在植物基因功能研究中的应用第27-28页
   ·激活标签法及突变体第28-29页
   ·本论文工作设想第29-31页
第2章 拟南芥隐花素CRY1 在亚细胞结构的功能分析第31-59页
   ·隐花素CRY1 的亚细胞定位及受光诱导转移的过程第32-43页
     ·实验材料与方法第32页
     ·实验方法第32-35页
     ·结果与分析第35-43页
   ·CRY1-GR/ cry1-304 突变体的构建及隐花素 CRY1 亚细胞结构中生理功能的研究第43-59页
     ·实验材料与方法第44-45页
     ·实验方法第45-47页
     ·结果与分析第47-56页
     ·讨论第56-58页
     ·小结第58-59页
第3章 拟南芥激活标签突变体库的构建及筛选第59-76页
   ·材料和方法第59-67页
     ·植物材料、菌株第59-60页
     ·主要仪器第60-61页
     ·主要试剂第61页
     ·拟南芥的种植和转化第61页
     ·突变体的筛选第61-62页
     ·植物总DNA 提取第62页
     ·拟南芥总蛋白(TCA-丙酮沉淀法)的提取和拟南芥黄酮的提取及HLCP 定量分析第62-63页
     ·T-DNA 突变体插入位点的基因组侧翼序列获得(质粒拯救、IPCR 扩增)第63-64页
     ·T-DNA 突变体插入位点侯选基因半定量RT-PCR 分析第64-65页
     ·半定量RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR )第65-67页
   ·结果与讨论第67-73页
     ·实验材料鉴定第67-68页
     ·突变体的筛选第68-70页
     ·晚花Scc101-D 突变体T-DNA 基因组插入位点的鉴定第70-72页
     ·Scc101-D 突变体T-DNA 插入位点候选基因鉴定第72-73页
   ·讨论第73-75页
   ·小结第75-76页
第4章 Scc101-D 晚花突变体相关基因功能分析第76-101页
   ·材料与方法第76-84页
     ·植物材料第76页
     ·酶和试剂第76-77页
     ·pEGAD-At5g 28237 表达载体的构建及拟南芥过表达株系的筛选第77-78页
     ·利用 RT-PCR 获取目的基因第78-79页
     ·目的基因的克隆第79-83页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化――浸花法第83页
     ·pEGAD-At5g 28237 过表达纯合植株的获得第83-84页
     ·拟南芥At5g 28237 基因T-DNA 插入突变体的分子鉴定及纯合子的获得第84页
     ·拟南芥幼苗生长素含量的测定第84页
   ·结果与分析第84-97页
     ·pEGAD-At5g 28237 表达载体的构建及拟南芥过表达株系的获得第84-86页
     ·拟南芥At5g 28237 基因T-DNA 插入突变体的分子鉴定及纯合株系的获得第86-88页
     ·拟南芥At5g 28237 基因突变体下胚轴的长度分析第88页
     ·At5g 28237 基因突变体的开花时间表型第88-90页
     ·At5g 28237 表达蛋白的亚细胞定位分析第90页
     ·At5g 28237 基因表达模式第90-91页
     ·At5g 28237 突变体生长素水平分析第91-92页
     ·At5g 28237 基因过表达对色氨酸及蛋白合成的影响第92-94页
     ·At5g 28237 蛋白构象的预测第94-95页
     ·色氨酸合成酶家族蛋白序列的聚类分析第95-97页
   ·讨论第97-99页
   ·小结第99-101页
结论第101-103页
参考文献第103-110页
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第110-112页
致谢第112页

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