中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-16页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-16页 |
一、p53基因缺失促进多发性骨髓瘤细胞侵袭性的增强 | 第16-35页 |
1.1 实验对象及其实验方法 | 第16-20页 |
1.1.1 细胞系及临床标本 | 第16页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第16-17页 |
1.1.3 主要实验仪器 | 第17-18页 |
1.1.4 主要试剂的配制 | 第18-20页 |
1.2 实验方法 | 第20-29页 |
1.2.1 细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第20-21页 |
1.2.2 骨髓间充质干细胞(MSC)的分离及培养 | 第21-22页 |
1.2.3 细胞转染 | 第22-23页 |
1.2.4 RNA的提取 | 第23-24页 |
1.2.5 反转录(RT)和实时定量PCR(RealtimePCR) | 第24-25页 |
1.2.6 蛋白提取 | 第25-26页 |
1.2.7 WesternBlot实验 | 第26-28页 |
1.2.8 Transwell方法检测细胞侵袭力的变化 | 第28-29页 |
1.2.9 细胞黏附实验 | 第29页 |
1.2.10 统计学分析 | 第29页 |
1.3 结果 | 第29-34页 |
1.3.1 人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)形态 | 第29-30页 |
1.3.2 QT-PCR及Western技术验证p53siRNA及Nutlin-3处理后骨髓瘤细胞系(NCI-H929、U266)中p53基因在mRNA及蛋白水平的表达情况 | 第30-31页 |
1.3.3 p53调节NCI-H929细胞侵袭性 | 第31-32页 |
1.3.4 p53通过降低E-cadherin蛋白表达和升高EMT调节蛋白表达进而调节MM细胞黏附骨髓基质细胞的能力 | 第32-34页 |
1.4 小结 | 第34-35页 |
二、p53基因缺失增强骨髓瘤细胞侵袭性的机制研究 | 第35-46页 |
2.1 实验材料、试剂、仪器及实验方法 | 第35页 |
2.2 统计学分析 | 第35-36页 |
2.3 结果 | 第36-40页 |
2.3.1在NCI-H99细胞中敲降p53基因后激活CXCR5而非CXCR4 | 第36页 |
2.3.2 敲除p53增加了CXCL13依赖的NCI-H929细胞的侵袭性 | 第36-37页 |
2.3.3 p53调节miR19a在NCI-H929细胞中的表达 | 第37-38页 |
2.3.4 miR19a调节CXCR5的表达 | 第38-39页 |
2.3.5 沉默miR19a削弱p53调节CXCR5表达能力及NCI-H929细胞侵袭能力 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-44页 |
2.5 小结 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第54-55页 |
综述 p53与血液系统恶性肿瘤发生发展的关系 | 第55-69页 |
综述参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
个人简历 | 第71页 |