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酵母细胞自絮凝提高抑制物胁迫耐受性初探

摘要第2-3页
Abstract第3-4页
引言第8-9页
1 绪论第9-22页
    1.1 纤维素乙醇生产概述第9-15页
        1.1.1 纤维素乙醇发展现状第9-11页
        1.1.2 纤维素乙醇生产过程第11-15页
    1.2 抑制物胁迫对纤维素乙醇发酵的影响第15-19页
        1.2.1 有机酸对酵母生长和乙醇发酵的影响第16-17页
        1.2.2 呋喃类对酵母生长和乙醇发酵的影响第17-18页
        1.2.3 醛类对酵母生长和乙醇发酵的影响第18-19页
        1.2.4 多种抑制物协同胁迫对酵母生长和乙醇发酵的影响第19页
    1.3 絮凝酵母及其抑制物耐受性研究第19-20页
        1.3.1 自絮凝酵母絮凝机制第19页
        1.3.2 影响酵母絮凝的因素第19-20页
        1.3.3 絮凝酵母与环境胁迫耐受性的关系第20页
    1.4 本研究工作目的意义和内容第20-22页
2 絮凝酵母SPSC01糠醛香草酸转录组差异基因与抑制物耐受性研究第22-46页
    2.1 引言第22页
    2.2 实验材料与仪器第22-24页
        2.2.1 菌株第22页
        2.2.2 培养基及抗生素第22-23页
        2.2.3 主要仪器设备及相关试剂第23-24页
    2.3 实验方法第24-30页
        2.3.1 过表达菌株构建第24-28页
        2.3.2 RNA提取和实时定量检测过表达基因表达水平第28-29页
        2.3.3 重组菌株抑制物点板耐受性分析第29页
        2.3.4 重组菌株抑制物胁迫发酵实验第29-30页
    2.4 结果与讨论第30-45页
        2.4.1 过表达2-脱氧-6-磷酸葡萄糖磷酸酶基因DOG1的构建及抑制物耐受性研究第30-35页
        2.4.2 过表达甘露糖蛋白基因TIR1的菌株构建及抑制物耐受性研究第35-40页
        2.4.3 过表达磷脂合成蛋白基因YOL032W的菌株构建及抑制物耐受性研究第40-45页
        2.4.4 4126-DOG1、4126-TIR1与S288C-YOL032W抑制物胁迫耐受性比较第45页
    2.5 本章小结第45-46页
3 不同启动子及转速调控酵母絮凝与抑制物耐受性研究第46-56页
    3.1 引言第46页
    3.2 实验材料与仪器第46-47页
        3.2.1 菌株第46页
        3.2.2 培养基及抗生素第46页
        3.2.3 主要仪器设备及相关试剂第46-47页
    3.3 实验方法第47-49页
        3.3.1 不同启动子调控FLO1絮凝菌株构建第47-48页
        3.3.2 不同絮凝菌株正常乙醇发酵条件下絮凝粒度对比第48页
        3.3.3 不同絮凝菌株抑制物耐性平板检测第48-49页
        3.3.4 不同絮凝菌株单一抑制物胁迫下乙醇发酵实验第49页
        3.3.5 不同絮凝菌株AFP混合胁迫下乙醇发酵实验第49页
        3.3.6 不同絮凝菌株不同转速发酵下实际水解液乙醇发酵实验第49页
        3.3.7 乙醇发酵样品参数检测第49页
    3.4 结果与讨论第49-55页
        3.4.1 不同启动子调控FLO1基因控制酵母细胞絮凝的验证第49-51页
        3.4.2 正常乙醇发酵条件下菌株的絮凝粒度比较第51页
        3.4.3 不同絮凝菌株抑制物平板生长情况第51-52页
        3.4.4 单一抑制物对不同絮凝菌株乙醇发酵的影响第52-53页
        3.4.5 AFP混合抑制物对不同絮凝菌株乙醇发酵的影响第53-54页
        3.4.6 实际水解液乙醇发酵过程中转速对不同絮凝菌株的影响第54-55页
    3.5 本章小结第55-56页
4 絮凝酵母AFP转录组差异基因与抑制物耐受性研究第56-68页
    4.1 引言第56页
    4.2 实验方法第56-57页
        4.2.1 菌株第56页
        4.2.2 培养基及抗生素第56页
        4.2.3 主要仪器设备及相关试剂第56-57页
    4.3 实验方法第57-58页
        4.3.1 差异基因GNP1和NDE1过表达菌株构建第57页
        4.3.2 单一抑制物与New-AFP混合抑制物胁迫下重组菌株的乙醇发酵性能第57-58页
        4.3.3 乙醇发酵样品参数检测及分析第58页
    4.4 结果与讨论第58-67页
        4.4.1 过表达谷氨酰胺通透酶基因GNP1的构建及抑制物耐受性研究第58-62页
        4.4.2 过表达线粒体外膜NADH脱氢酶基因NDE1的构建及抑制物耐受性研究第62-66页
        4.4.3 SPSC01-GNP1和SPSC01-NDE1在抑制物胁迫下乙醇发酵性能比较第66-67页
    4.5 本章小结第67-68页
结论第68-69页
展望第69-70页
参考文献第70-80页
附录 本论文涉及的基因序列第80-84页
    (1)DOG1ORF序列第80页
    (2)TIR1ORF序列第80-81页
    (3)YOL032WORF序列第81页
    (4)GNP1ORF序列第81-82页
    (5)NDE1ORF序列第82-84页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第84-85页
致谢第85-87页

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