摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
引言 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-22页 |
1.1 纤维素乙醇生产概述 | 第9-15页 |
1.1.1 纤维素乙醇发展现状 | 第9-11页 |
1.1.2 纤维素乙醇生产过程 | 第11-15页 |
1.2 抑制物胁迫对纤维素乙醇发酵的影响 | 第15-19页 |
1.2.1 有机酸对酵母生长和乙醇发酵的影响 | 第16-17页 |
1.2.2 呋喃类对酵母生长和乙醇发酵的影响 | 第17-18页 |
1.2.3 醛类对酵母生长和乙醇发酵的影响 | 第18-19页 |
1.2.4 多种抑制物协同胁迫对酵母生长和乙醇发酵的影响 | 第19页 |
1.3 絮凝酵母及其抑制物耐受性研究 | 第19-20页 |
1.3.1 自絮凝酵母絮凝机制 | 第19页 |
1.3.2 影响酵母絮凝的因素 | 第19-20页 |
1.3.3 絮凝酵母与环境胁迫耐受性的关系 | 第20页 |
1.4 本研究工作目的意义和内容 | 第20-22页 |
2 絮凝酵母SPSC01糠醛香草酸转录组差异基因与抑制物耐受性研究 | 第22-46页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
2.2.1 菌株 | 第22页 |
2.2.2 培养基及抗生素 | 第22-23页 |
2.2.3 主要仪器设备及相关试剂 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-30页 |
2.3.1 过表达菌株构建 | 第24-28页 |
2.3.2 RNA提取和实时定量检测过表达基因表达水平 | 第28-29页 |
2.3.3 重组菌株抑制物点板耐受性分析 | 第29页 |
2.3.4 重组菌株抑制物胁迫发酵实验 | 第29-30页 |
2.4 结果与讨论 | 第30-45页 |
2.4.1 过表达2-脱氧-6-磷酸葡萄糖磷酸酶基因DOG1的构建及抑制物耐受性研究 | 第30-35页 |
2.4.2 过表达甘露糖蛋白基因TIR1的菌株构建及抑制物耐受性研究 | 第35-40页 |
2.4.3 过表达磷脂合成蛋白基因YOL032W的菌株构建及抑制物耐受性研究 | 第40-45页 |
2.4.4 4126-DOG1、4126-TIR1与S288C-YOL032W抑制物胁迫耐受性比较 | 第45页 |
2.5 本章小结 | 第45-46页 |
3 不同启动子及转速调控酵母絮凝与抑制物耐受性研究 | 第46-56页 |
3.1 引言 | 第46页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
3.2.1 菌株 | 第46页 |
3.2.2 培养基及抗生素 | 第46页 |
3.2.3 主要仪器设备及相关试剂 | 第46-47页 |
3.3 实验方法 | 第47-49页 |
3.3.1 不同启动子调控FLO1絮凝菌株构建 | 第47-48页 |
3.3.2 不同絮凝菌株正常乙醇发酵条件下絮凝粒度对比 | 第48页 |
3.3.3 不同絮凝菌株抑制物耐性平板检测 | 第48-49页 |
3.3.4 不同絮凝菌株单一抑制物胁迫下乙醇发酵实验 | 第49页 |
3.3.5 不同絮凝菌株AFP混合胁迫下乙醇发酵实验 | 第49页 |
3.3.6 不同絮凝菌株不同转速发酵下实际水解液乙醇发酵实验 | 第49页 |
3.3.7 乙醇发酵样品参数检测 | 第49页 |
3.4 结果与讨论 | 第49-55页 |
3.4.1 不同启动子调控FLO1基因控制酵母细胞絮凝的验证 | 第49-51页 |
3.4.2 正常乙醇发酵条件下菌株的絮凝粒度比较 | 第51页 |
3.4.3 不同絮凝菌株抑制物平板生长情况 | 第51-52页 |
3.4.4 单一抑制物对不同絮凝菌株乙醇发酵的影响 | 第52-53页 |
3.4.5 AFP混合抑制物对不同絮凝菌株乙醇发酵的影响 | 第53-54页 |
3.4.6 实际水解液乙醇发酵过程中转速对不同絮凝菌株的影响 | 第54-55页 |
3.5 本章小结 | 第55-56页 |
4 絮凝酵母AFP转录组差异基因与抑制物耐受性研究 | 第56-68页 |
4.1 引言 | 第56页 |
4.2 实验方法 | 第56-57页 |
4.2.1 菌株 | 第56页 |
4.2.2 培养基及抗生素 | 第56页 |
4.2.3 主要仪器设备及相关试剂 | 第56-57页 |
4.3 实验方法 | 第57-58页 |
4.3.1 差异基因GNP1和NDE1过表达菌株构建 | 第57页 |
4.3.2 单一抑制物与New-AFP混合抑制物胁迫下重组菌株的乙醇发酵性能 | 第57-58页 |
4.3.3 乙醇发酵样品参数检测及分析 | 第58页 |
4.4 结果与讨论 | 第58-67页 |
4.4.1 过表达谷氨酰胺通透酶基因GNP1的构建及抑制物耐受性研究 | 第58-62页 |
4.4.2 过表达线粒体外膜NADH脱氢酶基因NDE1的构建及抑制物耐受性研究 | 第62-66页 |
4.4.3 SPSC01-GNP1和SPSC01-NDE1在抑制物胁迫下乙醇发酵性能比较 | 第66-67页 |
4.5 本章小结 | 第67-68页 |
结论 | 第68-69页 |
展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
附录 本论文涉及的基因序列 | 第80-84页 |
(1)DOG1ORF序列 | 第80页 |
(2)TIR1ORF序列 | 第80-81页 |
(3)YOL032WORF序列 | 第81页 |
(4)GNP1ORF序列 | 第81-82页 |
(5)NDE1ORF序列 | 第82-84页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-87页 |