| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第16-30页 |
| 1.1 影响植物叶片衰老的因素 | 第16-18页 |
| 1.1.1 叶片衰老的外部因素 | 第16页 |
| 1.1.2 叶片衰老的内部因素 | 第16-18页 |
| 1.2 植物衰老的生理生化变化 | 第18-19页 |
| 1.3 植物衰老的分子机理 | 第19-26页 |
| 1.3.1 叶片衰老的多水平调控 | 第19-21页 |
| 1.3.2 植物衰老相关基因 | 第21-26页 |
| 1.4 EIN3/EILs转录因子家族研究进展 | 第26-28页 |
| 1.4.1 EIN3/EILs参与乙烯信号转导 | 第26-27页 |
| 1.4.2 EIN3/EILs与植物的抗逆性有关 | 第27-28页 |
| 1.4.3 EIN3/EILs调节乙烯与其它激素的交叉对话 | 第28页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 2 白桦早衰突变体的特征 | 第30-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 供试菌种 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 株高和地径的调查 | 第30页 |
| 2.2.2 光合速率和叶绿素荧光参数的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.3 叶片表面超微结构的观察 | 第31页 |
| 2.2.4 石蜡切片的制备与观察 | 第31-32页 |
| 2.2.5 叶片超微结构的观察 | 第32页 |
| 2.2.6 组织化学染色 | 第32-33页 |
| 2.2.7 POD、SOD及MDA的测定 | 第33-35页 |
| 2.2.8 抗病性观察 | 第35-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-49页 |
| 2.3.1 lmd、G21、WT株系生长性状比较 | 第36-38页 |
| 2.3.2 lmd、G21、WT株系光合特性和叶绿素荧光参数比较 | 第38-39页 |
| 2.3.3 lwd、G21、WT株系叶片表面超微结构观察 | 第39-41页 |
| 2.3.4 lmd、G21、WT株系叶片组织解剖结构的观察 | 第41-42页 |
| 2.3.5 lmd、G21、WT株系叶片超微结构观察 | 第42-44页 |
| 2.3.6 组织化学染色 | 第44-46页 |
| 2.3.7 POD、SOD、MDA测定 | 第46-47页 |
| 2.3.8 lmd、G21、WT株系抗病性分析 | 第47-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 3 白桦早衰形成相关基因表达的分析 | 第51-67页 |
| 3.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 RNA的提取与反转录 | 第51-52页 |
| 3.2.2 RNA文库的构建及测序 | 第52页 |
| 3.2.3 转录组文库质量评估 | 第52页 |
| 3.2.4 基因表达量及差异基因分析 | 第52-53页 |
| 3.2.5 qRT-PCT方法验证表达谱测序结果 | 第53-54页 |
| 3.2.6 内源激素含量的测定 | 第54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-66页 |
| 3.3.1 RNA的获得 | 第54-55页 |
| 3.3.2 测序数据统计与评估 | 第55-56页 |
| 3.3.3 转录组测序文库质量评估 | 第56-58页 |
| 3.3.4 差异表达基因数目统计 | 第58-59页 |
| 3.3.5 lmd、G21和WT 3个株系功能叶片差异基因分析 | 第59-61页 |
| 3.3.6 基因共表达分析 | 第61-62页 |
| 3.3.7 qRT-PCR验证 | 第62-63页 |
| 3.3.8 lmd突变株早衰分子机制分析 | 第63-66页 |
| 3.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 4 T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第67-78页 |
| 4.1 实验材料 | 第67页 |
| 4.2 实验方法 | 第67-72页 |
| 4.2.1 白桦总DNA的提取 | 第67页 |
| 4.2.2 Southern杂交 | 第67-69页 |
| 4.2.3 早衰突变体lmd基因组重测序 | 第69页 |
| 4.2.4 TAIL-PCR | 第69-72页 |
| 4.2.5 插入位点的验证 | 第72页 |
| 4.3 实验结果 | 第72-76页 |
| 4.3.1 白桦总DNA的获得 | 第72页 |
| 4.3.2 T-DNA插入位点数的确定 | 第72-73页 |
| 4.3.3 lmd突变株基因组重测序分析 | 第73-75页 |
| 4.3.4 T-DNA插入位点的侧翼序列的获得 | 第75页 |
| 4.3.5 插入位点的验证 | 第75-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76-78页 |
| 5 白桦BpEIN3基因功能初步研究 | 第78-97页 |
| 5.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第78页 |
| 5.1.2 载体与菌株 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-86页 |
| 5.2.1 BpEIN3启动子的生物信息学分析 | 第78页 |
| 5.2.2 BpEIN3启动子的克隆及表达载体构建 | 第78-80页 |
| 5.2.3 BpEIN3基因克隆及过表达载体构建 | 第80-83页 |
| 5.2.4 BpEIN3基因抑制表达载体构建 | 第83-84页 |
| 5.2.5 工程菌的制备及遗传转化 | 第84-85页 |
| 5.2.6 转基因植株的PCR检测及基因定量分析 | 第85页 |
| 5.2.7 BpEIN3启动子的活性分析 | 第85页 |
| 5.2.8 转基因植株的表型观察 | 第85-86页 |
| 5.3 结果与分析 | 第86-96页 |
| 5.3.1 BpEIN3启动子序列顺式作用元件分析 | 第86-87页 |
| 5.3.2 BpEIN3启动子的克隆及表达载体构建 | 第87-88页 |
| 5.3.3 BpEIN3基因的克隆及表达载体构建 | 第88-90页 |
| 5.3.4 BpEIN3基因抑制表达载体构建 | 第90-92页 |
| 5.3.5 转基因植株的PCR及qRT-PCR检测 | 第92-93页 |
| 5.3.6 BpEIN3启动子的活性分析 | 第93-94页 |
| 5.3.7 转基因植株的表型观察 | 第94-96页 |
| 5.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 6 讨论与结论 | 第97-103页 |
| 6.1 讨论 | 第97-101页 |
| 6.1.1 植物叶片衰老与细胞程序性死亡 | 第97-98页 |
| 6.1.2 植物叶片早衰与抗病性的关系 | 第98-99页 |
| 6.1.3 植物叶片衰老与基因表达 | 第99-100页 |
| 6.1.4 植物EIN3基因在衰老和类病斑形成中的调控机制 | 第100-101页 |
| 6.2 结论 | 第101-102页 |
| 6.3 展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 附件 | 第116-117页 |
