| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 副黏病毒及其成员 | 第14页 |
| 1.2 副黏病毒介导的膜融合 | 第14-15页 |
| 1.3 新城疫病毒概述 | 第15-16页 |
| 1.4 NDV结构蛋白及其功能 | 第16-23页 |
| 1.4.1 NP蛋白 | 第16页 |
| 1.4.2 P蛋白 | 第16-17页 |
| 1.4.3 M蛋白 | 第17页 |
| 1.4.4 F蛋白 | 第17-19页 |
| 1.4.5 HN蛋白 | 第19-22页 |
| 1.4.6 L蛋白 | 第22-23页 |
| 1.5 新城疫疫苗的研究进展 | 第23-26页 |
| 1.5.1 活疫苗 | 第23-24页 |
| 1.5.2 灭活疫苗 | 第24页 |
| 1.5.3 NDV载体疫苗 | 第24-25页 |
| 1.5.4 表达细胞因子的新城疫疫苗 | 第25-26页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 基因VII型NDVF蛋白突变体的构建及其功能分析 | 第27-38页 |
| 2.1 材料和方法 | 第27-30页 |
| 2.1.1 质粒、菌株和细胞 | 第27页 |
| 2.1.2 病毒和鸡胚 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 NDVF蛋白突变体重组质粒的构建 | 第28页 |
| 2.1.5 NDV全长基因组及其突变体cDNA的克隆和构建 | 第28-29页 |
| 2.1.6 细胞融合试验 | 第29页 |
| 2.1.7 细胞表面表达分析试验 | 第29页 |
| 2.1.8 F蛋白及其突变体的western-blot试验 | 第29页 |
| 2.1.9 突变病毒拯救 | 第29-30页 |
| 2.1.10 突变病毒毒力分析 | 第30页 |
| 2.1.11 突变病毒的融合试验 | 第30页 |
| 2.1.12 突变病毒的复制动力学试验 | 第30页 |
| 2.1.13 突变病毒的感染性与组织嗜性分析 | 第30页 |
| 2.2 结果 | 第30-36页 |
| 2.2.1 F蛋白及其突变体的细胞融合试验 | 第30-32页 |
| 2.2.2 细胞表面表达分析试验 | 第32-33页 |
| 2.2.3 F蛋白及其突变体的western-blot分析 | 第33页 |
| 2.2.4 获救病毒的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.5 获救病毒毒力分析 | 第34页 |
| 2.2.6 突变病毒的融合试验 | 第34-35页 |
| 2.2.7 获救病毒复制动力学试验 | 第35-36页 |
| 2.2.8 获救病毒的感染性与组织嗜性分析 | 第36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 基因VII型新城疫病毒L蛋白突变株构建及免疫评价 | 第38-49页 |
| 3.1 材料和方法 | 第38-42页 |
| 3.1.1 质粒、菌株和细胞 | 第38页 |
| 3.1.2 病毒和动物 | 第38页 |
| 3.1.3 主要试剂和仪器 | 第38页 |
| 3.1.4 NDVL蛋白氨基酸突变位点的选择 | 第38-40页 |
| 3.1.5 突变病毒拯救 | 第40页 |
| 3.1.6 突变病毒毒力分析 | 第40页 |
| 3.1.7 突变病毒的复制动力学试验 | 第40-41页 |
| 3.1.8 突变病毒的遗传稳定性试验 | 第41页 |
| 3.1.9 突变病毒免疫及其攻毒保护试验 | 第41页 |
| 3.1.10 NDV突变株rNDV-F+E1954Q的构建及病毒拯救 | 第41页 |
| 3.1.11 NDV突变株rNDV-F+E1954Q的病毒毒力分析 | 第41页 |
| 3.1.12 NDV突变株rNDV-F+E1954Q的血凝效价和病毒滴度试验 | 第41页 |
| 3.1.13 NDV突变株rNDV-F+E1954Q的遗传稳定性试验 | 第41页 |
| 3.1.14 NDV突变株免疫商品化鸡及其攻毒保护试验 | 第41-42页 |
| 3.2 试验结果 | 第42-48页 |
| 3.2.1 突变病毒的复制动力学曲线 | 第42-43页 |
| 3.2.2 突变病毒毒力分析 | 第43页 |
| 3.2.3 突变病毒遗传稳定性分析 | 第43-44页 |
| 3.2.4 获救弱毒株免疫保护试验 | 第44页 |
| 3.2.5 rNDV-F+E1954Q病毒的拯救 | 第44-45页 |
| 3.2.6 rNDV-F+E1954Q病毒的传代及毒力分析 | 第45页 |
| 3.2.7 rNDV-F+E1954Q在DF-1细胞上生长曲线 | 第45-46页 |
| 3.2.8 rNDV-F+E1954Q免疫及攻毒试验 | 第46-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 基因VII型新城疫病毒标记株的构建及其免疫评价 | 第49-61页 |
| 4.1 材料和方法 | 第49-52页 |
| 4.1.1 细胞、毒株和质粒 | 第49页 |
| 4.1.2 试剂和动物 | 第49页 |
| 4.1.3 重组质粒的构建 | 第49-51页 |
| 4.1.4 重组病毒的拯救 | 第51页 |
| 4.1.5 获救病毒的遗传稳定性分析 | 第51页 |
| 4.1.6 获救病毒复制动力学试验 | 第51页 |
| 4.1.7 间接免疫荧光试验 | 第51-52页 |
| 4.1.8 动物回归实验 | 第52页 |
| 4.1.9 rNDV-NP△+F免疫保护试验 | 第52页 |
| 4.1.10 抗体消长规律检测 | 第52页 |
| 4.2 试验结果 | 第52-59页 |
| 4.2.1 获救病毒的测序结果 | 第52-53页 |
| 4.2.2 rNDV-NP△+F株遗传稳定性分析 | 第53-54页 |
| 4.2.3 rNDV-NP△+F株在鸡胚中的生长特性及病毒毒力结果 | 第54页 |
| 4.2.4 rNDV-NP△+F株的病毒复制动力学曲线试验 | 第54-55页 |
| 4.2.5 间接免疫荧光试验结果 | 第55页 |
| 4.2.6 动物回归试验结果 | 第55页 |
| 4.2.7 rNDV-NP△+F标记株免疫后抗体效价 | 第55-56页 |
| 4.2.8 rNDV-NP△+F标记株免疫攻毒后排毒情况分析 | 第56-58页 |
| 4.2.9 rNDV-NP△+F标记株免疫后抗体持续期检测 | 第58-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 全文结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 附录 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
