| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 技术路线 | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第12-17页 |
| 第一章 冬虫夏草转录组分析 | 第17-26页 |
| 1 仪器与材料 | 第17-18页 |
| 1.1 仪器 | 第17-18页 |
| 1.2 试剂 | 第18页 |
| 1.3 样品 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-20页 |
| 2.1 人工冬虫夏子实体、菌丝体、小金蝠蛾幼虫RNA提取 | 第18-19页 |
| 2.1.1 冬虫夏草子实体、菌丝体RNA的提取 | 第18页 |
| 2.1.2 小金蝠蛾幼虫RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2 冬虫夏草子实体、菌丝体及小金蝠蛾幼虫转录组测序及分析 | 第19-20页 |
| 2.2.1 转录组测序 | 第19页 |
| 2.2.2 短读序组装 | 第19页 |
| 2.2.3 测序质量评估 | 第19页 |
| 2.2.4 Unigene功能注释、GO分类分析 | 第19-20页 |
| 3 结果与讨论 | 第20-24页 |
| 3.1 转录组测序 | 第20页 |
| 3.2 短读序组装 | 第20-21页 |
| 3.3 差异表达和功能富集分析 | 第21-23页 |
| 3.4 子实体发育涉及基因 | 第23-24页 |
| 3.5 肌动蛋白和微管蛋白相关基因 | 第24页 |
| 4 小结 | 第24-26页 |
| 第二章 冬虫夏草不同发育阶段蛋白组分析 | 第26-38页 |
| 1 仪器与材料 | 第26-28页 |
| 1.1 仪器 | 第26页 |
| 1.2 药材 | 第26-27页 |
| 1.3 试剂 | 第27页 |
| 1.4 主要试剂配置 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.1 冬虫夏草、菌丝体及虫体蛋白质的提取 | 第28页 |
| 2.1.1 蛋白质的提取 | 第28页 |
| 2.1.2 蛋白质的保存 | 第28页 |
| 2.2 蛋白质含量测定 | 第28-29页 |
| 2.2.1 标准曲线制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 样品含量测定 | 第29页 |
| 2.3 蛋白质纯化 | 第29页 |
| 2.4 双向电泳凝胶 | 第29页 |
| 2.5 染色 | 第29页 |
| 2.6 凝胶扫描及图像分析 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-35页 |
| 3.1 蛋白质含量分析 | 第30页 |
| 3.2 蛋白质斑点数量分析 | 第30页 |
| 3.3 冬虫夏草及伪品差异斑点验证 | 第30-32页 |
| 3.4 差异蛋白分析 | 第32-35页 |
| 3.4.1 人工冬虫夏草、小金蝠蛾幼虫差异蛋白分析 | 第32-33页 |
| 3.4.2 人工冬虫夏草子座、人工冬虫夏草菌虫复合体、人工冬虫夏草差异蛋白分析 | 第33-35页 |
| 4.小结 | 第35-36页 |
| 4.1 2-DE图像分析 | 第35页 |
| 4.2 前期冬虫夏草与混伪品差异斑点验证 | 第35-36页 |
| 5 讨论 | 第36-38页 |
| 5.1 小金蝠蛾幼虫—人工冬虫夏草差异蛋白分析 | 第36页 |
| 5.2 人工冬虫夏草子座—人工冬虫夏草差异蛋白分析 | 第36页 |
| 5.3 基于蛋白质组分析冬虫夏草的生长发育 | 第36页 |
| 5.4 差异性蛋白质筛选 | 第36-38页 |
| 第三章 冬虫夏草发育阶段差异蛋白的鉴定与分析 | 第38-49页 |
| 1 仪器与材料 | 第38-39页 |
| 1.1 仪器 | 第38-39页 |
| 1.2 样品 | 第39页 |
| 1.3 试剂 | 第39页 |
| 1.4 主要试剂配置 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-40页 |
| 2.1 蛋白胶内酶解 | 第39-40页 |
| 2.1.1 胶內蛋白斑点回收 | 第39页 |
| 2.1.2 胶内蛋白质谱前处理 | 第39-40页 |
| 2.1.2.1 脱色 | 第39页 |
| 2.1.2.2 烷基化 | 第39页 |
| 2.1.2.3 脱水消化 | 第39-40页 |
| 2.1.2.4 萃取 | 第40页 |
| 2.2 质谱分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40页 |
| 4 小结 | 第40-47页 |
| 4.1 差异蛋白数据库分析 | 第40-44页 |
| 4.2 差异蛋白的生物功能分析 | 第44-47页 |
| 4.2.1 生物功能概述 | 第44-45页 |
| 4.2.2 GO注释分析 | 第45-47页 |
| 4.2.3 KEGG通路富集分析 | 第47页 |
| 5 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 野生冬虫夏草、人工冬虫夏草蛋白质组分析 | 第49-65页 |
| 1 仪器与材料 | 第49-51页 |
| 1.1 仪器 | 第49页 |
| 1.2 试剂 | 第49-50页 |
| 1.3 主要试剂配置 | 第50-51页 |
| 1.4 药材 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| 2.1 蛋白质提取 | 第51页 |
| 2.1.1 蛋白质的提取 | 第51页 |
| 2.1.2 蛋白质的保存 | 第51页 |
| 2.2 蛋白质含量测定 | 第51-52页 |
| 2.2.1 标准曲线制备 | 第51-52页 |
| 2.2.2 样品含量测定 | 第52页 |
| 2.3 蛋白质纯化 | 第52页 |
| 2.4 双向电泳凝胶 | 第52页 |
| 2.5 染色 | 第52页 |
| 2.6 凝胶扫描及图像分析 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-62页 |
| 3.1 蛋白质含量分析 | 第53页 |
| 3.2 蛋白质斑点数量分析 | 第53页 |
| 3.3 冬虫夏草共有斑点验证 | 第53-55页 |
| 3.4 冬虫夏草及伪品差异斑点验证 | 第55-57页 |
| 3.5 差异蛋白斑点软件分析 | 第57-62页 |
| 3.5.1 人工冬虫夏草与野生冬虫夏草差异蛋白分析 | 第57-59页 |
| 3.5.2 人工冬虫夏草菌虫复合体与野生冬虫夏草菌虫复合体差异蛋白分析 | 第59-60页 |
| 3.5.3 人工冬虫夏草子座与野生冬虫夏草子座差异蛋白分析 | 第60-62页 |
| 4 小结 | 第62页 |
| 5 讨论 | 第62-65页 |
| 5.1 蛋白质含量及斑点数分析 | 第62页 |
| 5.2 冬虫夏草共有蛋白质验证 | 第62页 |
| 5.3 前期冬虫夏草与混伪品差异斑点验证 | 第62-63页 |
| 5.4 2-DE图像分析 | 第63-65页 |
| 5.4.1 人工冬虫夏草与野生冬虫夏草差异蛋白分析 | 第63页 |
| 5.4.2 人工冬虫夏草菌虫复合体与野生冬虫夏草菌虫复合体差异蛋白分析 | 第63页 |
| 5.4.3 人工冬虫夏草子座与野生冬虫夏草子座差异蛋白分析 | 第63-65页 |
| 全文结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 文献综述 中药蛋白质组学研究 | 第72-83页 |
| 1 中药的蛋白质组学的研究对象 | 第72页 |
| 2 常用的蛋白质组学技术 | 第72-73页 |
| 2.1 蛋白质分离技术 | 第72-73页 |
| 2.2 质谱技术 | 第73页 |
| 2.3 蛋白质相互作用技术 | 第73页 |
| 2.4 蛋白质芯片 | 第73页 |
| 3 蛋白质组学在中药研究中的应用 | 第73-77页 |
| 3.1 基于蛋白质组学的中药鉴定研究 | 第74页 |
| 3.2 基于蛋白质组学的中药质量评价研究 | 第74-75页 |
| 3.3 基于蛋白质组学的中药药理研究 | 第75页 |
| 3.4 蛋白组学在中药代谢调控中的应用 | 第75-76页 |
| 3.5 利用蛋白质组学寻找中药作用相关靶点蛋白 | 第76页 |
| 3.5.1 中药单体化合物作用相关靶点蛋白的寻找 | 第76页 |
| 3.5.2 中药复方提取物作用相关靶点蛋白的寻找 | 第76页 |
| 3.6 中药直接结合靶点蛋白的预测和验证 | 第76-77页 |
| 3.7 中药相关靶点蛋白相互作用信号网络的绘制和验证 | 第77页 |
| 4 小结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第84-85页 |
