| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第13-16页 |
| 1.1 青少年特发性脊柱侧凸的流行病学及病因遗传学 | 第13-14页 |
| 1.2 研究背景与研究目的 | 第14-15页 |
| 1.3 本课题研究思路 | 第15-16页 |
| 1.3.1 WES筛查及数据分析定位致病基因 | 第15页 |
| 1.3.2 致病基因靶向测序 | 第15页 |
| 1.3.3 利用荧光定量RT-PCR检测致病基因mRNA的表达水平 | 第15-16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-49页 |
| 2.1 研究对象 | 第16-21页 |
| 2.1.1 全基因组外显子测序研究对象 | 第16-18页 |
| 2.1.2 靶向测序研究对象 | 第18-20页 |
| 2.1.3 正常对照 | 第20页 |
| 2.1.4 ADAMTS9 mRNA表达研究对象 | 第20-21页 |
| 2.2 研究试剂 | 第21-23页 |
| 2.2.1 DNA提取试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.2 PCR试剂 | 第22页 |
| 2.2.3 电泳试剂 | 第22页 |
| 2.2.4 全基因组外显子测序试剂 | 第22页 |
| 2.2.5 PCR产物纯化及测序试剂 | 第22页 |
| 2.2.6 外周血B淋巴细胞建系试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.7 RNA提取试剂 | 第23页 |
| 2.2.8 Real-time RT-PCR试剂 | 第23页 |
| 2.3 研究仪器 | 第23-26页 |
| 2.3.1 DNA提取仪器 | 第23页 |
| 2.3.2 测OD值仪器 | 第23页 |
| 2.3.3 全基因组外显子测序仪器及器材 | 第23-24页 |
| 2.3.4 PCR扩增仪 | 第24页 |
| 2.3.5 电泳仪器 | 第24页 |
| 2.3.6 PCR产物纯化仪器 | 第24-25页 |
| 2.3.7 上机测序及序列分析 | 第25页 |
| 2.3.8 外周血B淋巴细胞建系及培养的仪器 | 第25页 |
| 2.3.9 ADAMTS9 mRNA表达研究使用仪器 | 第25-26页 |
| 2.4 电子数据库及软件 | 第26-27页 |
| 2.5 实验方法 | 第27-48页 |
| 2.5.1 样本资料的收集 | 第27页 |
| 2.5.2 全血标本的采集 | 第27页 |
| 2.5.3 外周血DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.5.4 外周血DNA的溶解 | 第28页 |
| 2.5.5 外周血DNA浓度及含量的测定 | 第28页 |
| 2.5.6 全基因组外显子测序 | 第28-37页 |
| 2.5.7 PCR扩增及测序 | 第37-44页 |
| 2.5.8 利用MEGA6.0绘制氨基酸保守性位图 | 第44页 |
| 2.5.9 ADAMTS9 mRNA表达研究实验方法 | 第44-48页 |
| 2.6 统计学分析 | 第48-49页 |
| 3 实验结果 | 第49-64页 |
| 3.1 全基因组外显子测序 | 第49-58页 |
| 3.1.1 全基因组外显子测序数据产出结果 | 第49-50页 |
| 3.1.2 全基因组外显子测序致病突变筛选结果 | 第50-58页 |
| 3.2 致病基因靶向验证结果 | 第58-61页 |
| 3.3 已报告突变位点验证结果 | 第61页 |
| 3.4 致病基因正常对照验证结果 | 第61-62页 |
| 3.5 验证结果统计分析 | 第62页 |
| 3.6 ADAMTS9 mRNA表达研究结果 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 综述 | 第74-93页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 攻读学位期间的科研成果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 基金项目 | 第95页 |
