摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 引言 | 第10-11页 |
1.2 肿瘤标志物 | 第11-13页 |
1.2.1 肿瘤标志物简介 | 第11页 |
1.2.2 肿瘤标志物研究进展 | 第11-13页 |
1.3 DNA功能化AuNPs及其应用 | 第13-22页 |
1.3.1 DNA和AuNPs简介 | 第13-14页 |
1.3.2 DNA功能化AuNPs方法 | 第14-17页 |
1.3.3 DNA功能化AuNPs生物医学诊断应用 | 第17-22页 |
1.4 本论文主要研究内容 | 第22-24页 |
第二章 双嵌段DNA-AuNPs探针检测多元miRNA | 第24-37页 |
2.1 前言 | 第24-26页 |
2.2 实验部分 | 第26-29页 |
2.2.1 实验仪器与药品 | 第26-27页 |
2.2.2 AuNPs的制备 | 第27-28页 |
2.2.3 DNA-AuNPs探针的制备 | 第28页 |
2.2.4 AuNPs上DNA组装量的测定 | 第28页 |
2.2.5 miRNA体外检测 | 第28-29页 |
2.2.6 靶标特异性检测 | 第29页 |
2.2.7 血清样本检测 | 第29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
2.3.1 AuNPs及DNA-AuNPs探针表征 | 第29-30页 |
2.3.2 DNA-AuNPs探针与靶标miRNA杂交 | 第30-31页 |
2.3.3 polyA长度优化 | 第31-32页 |
2.3.4 AuNPs浓度及反应温度优化 | 第32-33页 |
2.3.5 靶标浓度响应及检测限测定 | 第33-34页 |
2.3.6 纳米探针特异性实验 | 第34-35页 |
2.3.7 血清样本检测 | 第35页 |
2.4 本章小结 | 第35-37页 |
第三章 双嵌段DNA-AuNPs探针应用于细胞内mRNA检测 | 第37-53页 |
3.1 前言 | 第37-39页 |
3.2 实验部分 | 第39-43页 |
3.2.1 实验试剂和仪器 | 第39-40页 |
3.2.2 AuNPs的制备以及polyA介导FSNA探针的组装 | 第40-41页 |
3.2.3 FSNA探针的识别链及信号链定量 | 第41页 |
3.2.4 溶液体系检测c-Myc-T | 第41页 |
3.2.5 特异性实验 | 第41-42页 |
3.2.6 核酸酶稳定性实验 | 第42页 |
3.2.7 细胞培养 | 第42页 |
3.2.8 MTT细胞毒性实验 | 第42页 |
3.2.9 荧光共聚焦成像 | 第42-43页 |
3.2.10 流式细胞实验 | 第43页 |
3.3 结果与讨论 | 第43-52页 |
3.3.1 FSNA探针的制备和表征 | 第43-44页 |
3.3.2 FSNA探针体外环境与靶标杂交 | 第44-45页 |
3.3.3 FSNA探针组装密度和探针浓度优化 | 第45-46页 |
3.3.4 靶标浓度响应及检测限测定 | 第46-47页 |
3.3.5 FSNA探针的特异性实验 | 第47-48页 |
3.3.6 FSNA探针的核酸酶稳定性及细胞毒性实验 | 第48-49页 |
3.3.7 FSNA探针细胞成像研究 | 第49-50页 |
3.3.8 FSNA探针识别细胞内c-Myc mRNA表达水平差异 | 第50-51页 |
3.3.9 细胞内动力学分析 | 第51-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 双嵌段DNA-AuNPs/MoS_2复合探针检测ctDNA | 第53-61页 |
4.1 前言 | 第53-55页 |
4.2 实验部分 | 第55-57页 |
4.2.1 实验试剂和仪器 | 第55页 |
4.2.2 MoS_2纳米片的制备 | 第55-56页 |
4.2.3 AuNPs的制备 | 第56页 |
4.2.4 polyA介导DNA-AuNPs探针的组装 | 第56页 |
4.2.5 比色检测PIK3CA ctDNA | 第56-57页 |
4.3 结果与讨论 | 第57-60页 |
4.3.1 MoS_2、DNA-AuNPs/MoS_2复合探针的表征 | 第57页 |
4.3.2 可行性实验 | 第57-58页 |
4.3.3 MoS_2孵育时间和浓度优化 | 第58-59页 |
4.3.4 靶标浓度响应及检测限测定 | 第59页 |
4.3.5 靶标特异性实验 | 第59-60页 |
4.4 本章小结 | 第60-61页 |
第五章 总结与展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录1 攻读硕士学位期间撰写的论文 | 第69-70页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |