| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-53页 |
| 1.1 水稻细胞质雄性不育研究历史与进展 | 第11-18页 |
| 1.1.1 细胞质雄性不育 | 第11-13页 |
| 1.1.2 水稻细胞质雄性不育 | 第13-16页 |
| 1.1.3 野败型细胞质雄性不育机制 | 第16-18页 |
| 1.2 m~6A研究历史和进展 | 第18-51页 |
| 1.2.1 RNAm~6A修饰 | 第19-21页 |
| 1.2.2 m~6A检测技术 | 第21-26页 |
| 1.2.3 参与m~6A的调控因子 | 第26-27页 |
| 1.2.4 m~6A参与的功能 | 第27-39页 |
| 1.2.5 m~6A行使功能的分子机制 | 第39-43页 |
| 1.2.6 m~6A去甲基化酶的结构与功能 | 第43-46页 |
| 1.2.7 m~6A识别因子的结构与功能 | 第46-48页 |
| 1.2.8 m~6A甲基转移酶 | 第48-51页 |
| 1.3 本文的研究目的与意义 | 第51-53页 |
| 1.3.1 细胞质雄性不育蛋白WA352的研究目的与意义 | 第51-52页 |
| 1.3.2 甲基转移酶METTL3-METTL14复合体的研究目的和意义 | 第52-53页 |
| 第二章 材料与方法 | 第53-75页 |
| 2.1 实验室仪器 | 第53-54页 |
| 2.2 实验室试剂和耗材 | 第54-55页 |
| 2.3 常用溶液 | 第55-60页 |
| 2.3.1 常用抗生素配方 | 第55页 |
| 2.3.2 蛋白纯化缓冲液 | 第55-56页 |
| 2.3.3 蛋白胶配方 | 第56-57页 |
| 2.3.4 蛋白胶染脱液 | 第57页 |
| 2.3.5 LB培养基 | 第57页 |
| 2.3.6 2×SDS-PAGE上样缓冲液 | 第57-58页 |
| 2.3.7 5×EMSA缓冲液 | 第58页 |
| 2.3.8 6×DNA上样缓冲液 | 第58-59页 |
| 2.3.9 10×甲基转移酶实验缓冲液 | 第59页 |
| 2.3.10 10×SDS-PAGE电泳缓冲液 | 第59页 |
| 3.3.11 50×TAE琼脂糖凝胶缓冲液 | 第59-60页 |
| 2.4 质粒载体、菌株和细胞系 | 第60-61页 |
| 2.4.1 实验室常用的质粒载体 | 第60页 |
| 2.4.2 实验室常用的菌株与细胞系 | 第60-61页 |
| 2.5 实验方法 | 第61-75页 |
| 2.5.1 构建克隆载体 | 第61-65页 |
| 2.5.2 原核蛋白表达纯化 | 第65-67页 |
| 2.5.3 昆虫细胞蛋白表达纯化 | 第67-69页 |
| 2.5.4 蛋白限制性酶解 | 第69-70页 |
| 2.5.5 晶体初筛和优化 | 第70-72页 |
| 2.5.6 数据的收集与处理 | 第72页 |
| 2.5.7 分析超速离心 | 第72-73页 |
| 2.5.8 等温量热滴定 | 第73页 |
| 2.5.9 凝胶迁移率变化实验 | 第73-74页 |
| 2.5.10 甲基转移酶活性测定 | 第74-75页 |
| 第三章 水稻WA352的结构与功能 | 第75-89页 |
| 3.1 WA352数据的收集与结构的解析 | 第75-76页 |
| 3.2 WA352的晶体结构 | 第76-87页 |
| 3.2.1 WA352整体的结构 | 第76-77页 |
| 3.2.2 WA352的CTD为一个全新的结构域 | 第77-79页 |
| 3.2.3 WA352结构性质分析 | 第79-87页 |
| 3.3 本章小结 | 第87-89页 |
| 第四章 甲基转移酶复合体METTL3-METTL14的结构与功能 | 第89-131页 |
| 4.1 METTL3-METTL14复合体的表达与纯化 | 第89-97页 |
| 4.1.1 目的蛋白表达克隆构建 | 第89-91页 |
| 4.1.2 METTL3及METTL14在大肠杆菌中的表达尝试 | 第91-92页 |
| 4.1.3 METTL3及METTL14在昆虫细胞中的表达尝试 | 第92-93页 |
| 4.1.4 METTL3和METTL14复合体的组装 | 第93-97页 |
| 4.2 METTL3-METTL14蛋白复合体的结晶 | 第97-101页 |
| 4.2.1 限制性酶解实验 | 第97-99页 |
| 4.2.2 METTL3-METTL14结晶条件初筛 | 第99-100页 |
| 4.2.3 METTL3-METTL14蛋白晶体的优化 | 第100-101页 |
| 4.3 数据收集与结构的解析 | 第101-106页 |
| 4.3.1 数据收集与相位的解析 | 第101-103页 |
| 4.3.2 SAH和SAM复合体的结构解析 | 第103-106页 |
| 4.4 结构与功能分析 | 第106-129页 |
| 4.4.1 METTL3-METTL14的晶体结构 | 第106-111页 |
| 4.4.2 METTL3和METTL14的相互作用 | 第111-114页 |
| 4.4.3 底物结合位点 | 第114-121页 |
| 4.4.4 RNA结合位点 | 第121-124页 |
| 4.4.5 METTL14的功能 | 第124-127页 |
| 4.4.6 N6RNA甲基化模型的修正 | 第127-129页 |
| 4.5 本章小结 | 第129-131页 |
| 第五章 讨论 | 第131-137页 |
| 5.1 水稻WA352蛋白的讨论与展望 | 第131页 |
| 5.2 METTL3-METTL14的讨论与展望 | 第131-137页 |
| 5.2.1 ZnF的功能 | 第131-133页 |
| 5.2.2 RNA的序列特异性 | 第133-135页 |
| 5.2.3 甲基转移酶复合体 | 第135页 |
| 5.2.4 m~6A与癌细胞的关系 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-156页 |
| 附录Ⅰ | 第156-158页 |
| 附录Ⅱ | 第158-161页 |
| 附件：作者简介 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162-167页 |
