| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 癌症及其发病机理和成因 | 第11页 |
| 1.2 癌症的治疗手段 | 第11-12页 |
| 1.3 抗肿瘤药物的发展 | 第12页 |
| 1.4 药物靶点分布 | 第12-13页 |
| 1.5 以酶为靶点的药物(酶抑制剂)的特征 | 第13-14页 |
| 1.6 酶与生命 | 第14-15页 |
| 1.7 酶的分类 | 第15-16页 |
| 1.8 选题意义和设计思路 | 第16-17页 |
| 1.9 论文创新点 | 第17-18页 |
| 第二章 肿瘤DNA拓扑异构酶I靶向抑制剂的合成及其精准治疗 | 第18-55页 |
| 2.1 引言 | 第18-24页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.3.1 化学合成 | 第25-27页 |
| 2.3.2 通过质谱、HPLC分析前药Biotin-ss-CPT还原成CPT | 第27页 |
| 2.3.3 HPLC和荧光分析药物在血浆的稳定性 | 第27-28页 |
| 2.3.4 体外抗肿瘤活性 | 第28页 |
| 2.3.5 MTT法检测药物对细胞增殖影响 | 第28页 |
| 2.3.6 细胞周期分析 | 第28-29页 |
| 2.3.7 药物吸收 | 第29页 |
| 2.3.8 脂水分配系数 | 第29页 |
| 2.3.9 细胞迁移实验 | 第29页 |
| 2.3.10 DAPI&Mitotracker双染法检测线粒体断裂 | 第29页 |
| 2.3.11 粒粒体膜电位(ΔΨm) | 第29-30页 |
| 2.3.12 Caspase活性检测 | 第30页 |
| 2.3.13 细胞内活性氧水平检测 | 第30页 |
| 2.3.14 谷胱甘肽GSH水平检测 | 第30页 |
| 2.3.15 GPXs水平检测 | 第30-31页 |
| 2.3.16 MGC803裸鼠模型的建立 | 第31页 |
| 2.3.17 H&E染色 | 第31页 |
| 2.3.18 在体内的组织分布特性 | 第31页 |
| 2.3.19 血液生化指标检测 | 第31-32页 |
| 2.3.20 统计学分析 | 第32页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第32-52页 |
| 2.4.1 具有生物响应的靶向性抗肿瘤前药的设计合成 | 第32-33页 |
| 2.4.2 质谱、荧光和液相检测GSH激活前药释放喜树碱 | 第33-36页 |
| 2.4.3 药物的在生理条件下的稳定性 | 第36-37页 |
| 2.4.4 Biotin-ss-CPT提高CPT对肿瘤细胞的选择性 | 第37-39页 |
| 2.4.5 前药对脂水分配系数的影响 | 第39-40页 |
| 2.4.6 前药改变细胞对药物的吸收 | 第40-41页 |
| 2.4.7 药物对细胞迁移的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.8 Biotin-ss-CPT通过激活caspase诱导细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 2.4.9 Biotin-ss-CPT引起线粒体断裂 | 第43-44页 |
| 2.4.10 Biotin-ss-CPT引起线粒体膜电位下降 | 第44-45页 |
| 2.4.11 活性氧(ROS)的检测 | 第45-46页 |
| 2.4.12 Biotin-ss-CPT对GSH/GPX氧化还原系统的破坏 | 第46-47页 |
| 2.4.13 Biotin-ss-CPT的体内抗肿瘤效果 | 第47-49页 |
| 2.4.14 生物素化桥接作用对毒副作用的改善 | 第49-51页 |
| 2.4.15 药物分布 | 第51-52页 |
| 2.4.16 肿瘤内GSH水平和GPXs活性 | 第52页 |
| 2.5 本章小结 | 第52-55页 |
| 第三章 二氢叶酸还原酶抑制剂的合成及联合放疗对肿瘤的治疗 | 第55-87页 |
| 3.1 引言 | 第55-64页 |
| 3.2 实验主要仪器及试剂 | 第64-65页 |
| 3.3 实验方法 | 第65-70页 |
| 3.3.1 2,4-二氨基蝶啶衍生物的合成 | 第65页 |
| 3.3.2 化合物的表征 | 第65-66页 |
| 3.3.3 细胞的培养 | 第66页 |
| 3.3.4 MTT法检测蝶蝊药联合放疗对细胞的抗增殖活性 | 第66页 |
| 3.3.5 细胞周期分析 | 第66-67页 |
| 3.3.6 脂水分配系数 | 第67页 |
| 3.3.7 细胞迁移实验 | 第67页 |
| 3.3.8 DAPI&Mitotracker双染法检测线粒体断裂 | 第67-68页 |
| 3.3.9 线粒体膜电位(ΔΨm) | 第68页 |
| 3.3.10 Caspase活性检测 | 第68页 |
| 3.3.11 二氢叶酸还原酶DHFR抑制试验 | 第68页 |
| 3.3.12 蛋白质印迹法Westernblotting检测二氢叶酸还原酶的表达 | 第68-69页 |
| 3.3.13 细胞内活性氧水平检测 | 第69页 |
| 3.3.14 药物的亚细胞定位 | 第69页 |
| 3.3.15 MGC803裸鼠模型的建立 | 第69-70页 |
| 3.3.16 H&E染色切片 | 第70页 |
| 3.3.17 药物在体内的组织分布 | 第70页 |
| 3.3.18 血液生化指标检测 | 第70页 |
| 3.3.19 统计学分析 | 第70页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第70-84页 |
| 3.4.1 2,4-二氨基蝶啶衍生物的合成 | 第70-71页 |
| 3.4.2 2,4-二氨基蝶啶衍生物对二氢叶酸还原酶的抑制活性 | 第71-72页 |
| 3.4.3 细胞内DHFR活性的检测 | 第72-73页 |
| 3.4.4 2,4-二氨基蝶啶衍生物联合X射线抑制Hela肿瘤细胞的增殖 | 第73-75页 |
| 3.4.5 脂水分配系数lgP | 第75页 |
| 3.4.6 药物2a联合放疗对细胞周期影响 | 第75-77页 |
| 3.4.7 药物联合放疗对线粒体的损伤 | 第77-78页 |
| 3.4.8 药物联合放疗对活性氧ROS的产生 | 第78-80页 |
| 3.4.9 药物2a的亚细胞定位 | 第80页 |
| 3.4.10 药物2a联合X射线对细胞迁移的影响 | 第80-81页 |
| 3.4.11 药物2a联合放疗实现体内抗肿瘤作用 | 第81-82页 |
| 3.4.12 药物2a的系统毒性 | 第82-84页 |
| 3.5 本章小结 | 第84-87页 |
| 第四章 硫氧还蛋白还原酶抑制剂的合成及其联合放疗诱导A375细胞凋亡 | 第87-104页 |
| 4.1 引言 | 第87-92页 |
| 4.2 主要试剂 | 第92-93页 |
| 4.3 实验部分 | 第93-95页 |
| 4.3.1 化学合成 | 第93页 |
| 4.3.2 MTT法检测3a和3b联合放疗对细胞的抗增殖活性 | 第93-94页 |
| 4.3.3 细胞周期分析 | 第94页 |
| 4.3.4 线粒体膜电位(ΔΨm) | 第94页 |
| 4.3.5 Caspase活性检测 | 第94页 |
| 4.3.6 铂配合物对硫氧还蛋白还原酶活性抑制 | 第94页 |
| 4.3.7 细胞内硫氧还蛋白还原酶活性检测 | 第94-95页 |
| 4.3.8 蛋白质印迹法Western blotting检测硫氧还蛋白还原酶的表达 | 第95页 |
| 4.3.9 AnnexinV-FITC-PI双染 | 第95页 |
| 4.3.10 细胞内活性氧水平检测 | 第95页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第95-103页 |
| 4.4.1 化合物的表征 | 第95-96页 |
| 4.4.2 化合物对TrxR活性的抑制 | 第96页 |
| 4.4.3 化合物对细胞硫氧还蛋白还原酶活性的抑制 | 第96-97页 |
| 4.4.4 化合物联合X射线抑制A375肿瘤细胞的增殖 | 第97-98页 |
| 4.4.5 化合物联合X射线对细胞周期影响 | 第98-99页 |
| 4.4.6 化合物联合X射线对caspase的激活 | 第99-100页 |
| 4.4.7 AnnexinV-FITC/PI双染检测化合物联合放疗引起的细胞凋亡 | 第100-101页 |
| 4.4.8 化合物对线粒体膜电位的影响 | 第101-102页 |
| 4.4.9 化合物联合放疗对活性氧(ROS)的产生 | 第102-103页 |
| 4.5 本章小结 | 第103-104页 |
| 第五章 结论和展望 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-112页 |
| 附图 | 第112-137页 |
| 在学期间发表的论文 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138页 |
