| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写词表 | 第15-16页 |
| 第1章 综述 | 第16-25页 |
| 1.1 肺癌介绍 | 第16-17页 |
| 1.2 P53 | 第17-19页 |
| 1.2.1 P53介绍 | 第17页 |
| 1.2.2 P53稳定性 | 第17-18页 |
| 1.2.3 P53与肿瘤 | 第18-19页 |
| 1.3 SIRT3 | 第19-23页 |
| 1.3.1 SIRT3概述 | 第19页 |
| 1.3.2 SIRT3与肿瘤 | 第19-20页 |
| 1.3.3 SIRT3作为致癌基因 | 第20-21页 |
| 1.3.4 SIRT3作为抑癌基因 | 第21-22页 |
| 1.3.5 SIRT3与p53 | 第22-23页 |
| 1.4 突变型p53 | 第23-25页 |
| 1.4.1 突变型p53与肿瘤 | 第23页 |
| 1.4.2 突变型p53的翻译后修饰 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 细胞 | 第25页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第25页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.3.2 细胞形态学分析 | 第28页 |
| 2.3.3 MTT法检测细胞存活率 | 第28页 |
| 2.3.4 Western-Blot检测蛋白水平的表达 | 第28-30页 |
| 2.3.5 PCR检测mRNA表达水平 | 第30-32页 |
| 2.3.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第32页 |
| 2.3.7 流式细胞术检测细胞线粒体膜电势 | 第32页 |
| 2.3.8 加入蛋白酶体MG132检测突变型p53蛋白表达 | 第32页 |
| 2.3.9 CHX检测蛋白质半衰期 | 第32-33页 |
| 2.3.10 免疫共沉淀实验检测蛋白之间互相作用 | 第33页 |
| 2.3.11 减毒沙门氏菌携带SIRT3质粒对小细胞肺癌影响的体内研究 | 第33-37页 |
| 第3章 实验结果 | 第37-51页 |
| 3.1 SIRT3抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞的体外研究 | 第37-46页 |
| 3.1.1 光镜下观察转染SIRT3质粒后细胞形态 | 第37页 |
| 3.1.2 MTT检测SIRT3对NCI-H446细胞生存率的影响 | 第37-38页 |
| 3.1.3 蛋白和基因水平验证SIRT3成功转染进入NCI-H446细胞 | 第38页 |
| 3.1.4 流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第38-39页 |
| 3.1.5 流式细胞术检测细胞线粒体膜电势 | 第39-40页 |
| 3.1.6 从蛋白水平检测SIRT3过表达对凋亡基因的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.7 mRNA水平上检测凋亡相关基因 | 第41-42页 |
| 3.1.8 MTT检测坏死抑制剂Nec-1是否逆转细胞生存率 | 第42页 |
| 3.1.9 过表达SIRT3的NCI-H446细胞的坏死相关基因蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 3.1.10 Western-Blot检测突变型p53蛋白表达 | 第43-44页 |
| 3.1.11 WesternBlot检测自噬相关蛋白的表达 | 第44页 |
| 3.1.12 Western-Blot检测加入蛋白酶体抑制剂后突变型p53表达 | 第44-45页 |
| 3.1.13 CHX检测突变型p53的半衰期 | 第45-46页 |
| 3.1.14 免疫共沉淀检测突变型p53的泛素化 | 第46页 |
| 3.2 SIRT3抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞的体内研究 | 第46-51页 |
| 3.2.1 SIRT3过表达对小细胞肺癌移植瘤的抑制作用 | 第46-47页 |
| 3.2.2 SIRT3过表达对肿瘤组织的形态学的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.3 SIRT3过表达肿瘤组织中SIRT3、突变型p53的免疫组化的检测 | 第48页 |
| 3.2.4 肿瘤组织中SIRT3、和突变型p53的蛋白表达 | 第48-49页 |
| 3.2.5 SIRT3过表达后肿瘤组织中凋亡相关蛋白表达变化 | 第49-50页 |
| 3.2.6 SIRT3过表达后肿瘤组织中凋亡相关基因表达变化 | 第50-51页 |
| 第4章 讨论 | 第51-56页 |
| 第5章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
