摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-27页 |
1.1 酸性土壤中铝对植物生长的影响概述 | 第10-11页 |
1.1.1 pH影响铝的不同价态 | 第10-11页 |
1.1.2 Al~(3+)对植物生长的影响 | 第11页 |
1.2 植物的耐铝性及耐性策略的研究进展 | 第11-21页 |
1.2.1 铝的外部排斥机制 | 第11-13页 |
1.2.1.1 依靠根部有机酸分泌的铝外排作用 | 第11-12页 |
1.2.1.2 依靠有机酸之外的酚类复合物释放的铝外排作用 | 第12-13页 |
1.2.2 铝内部耐受机制 | 第13-15页 |
1.2.2.1 细胞壁的修饰作用 | 第14-15页 |
1.2.2.2 铝积累体和它们的耐铝机制 | 第15页 |
1.2.3 膜转运体在耐铝性中的重要作用 | 第15-21页 |
1.2.3.1 ALMT苹果酸转运体 | 第16-17页 |
1.2.3.2 MATE柠檬酸转运体 | 第17-18页 |
1.2.3.3 铝转运体:NRAMPs | 第18-20页 |
1.2.3.4 ABC转运体 | 第20-21页 |
1.2.3.5 水通道蛋白 | 第21页 |
1.3 植物对铝信号分子的抗性应答 | 第21-23页 |
1.4 铝激活与铝耐性相关蛋白的功能 | 第23页 |
1.5 水稻耐铝分子应答机制研究进展 | 第23-24页 |
1.6 高粱耐铝毒的相关研究 | 第24-25页 |
1.7 本课题研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-51页 |
2.1 本实验用到的材料 | 第27-35页 |
2.1.1 植物材料培养和处理方法 | 第27-28页 |
2.1.2 菌株及质粒载体 | 第28页 |
2.1.3 菌种的活化、培养和保存 | 第28-29页 |
2.1.4 抗生素 | 第29页 |
2.1.5 培养基 | 第29-34页 |
2.1.6 各种酶试剂及试剂盒 | 第34页 |
2.1.7 实验中用到的试剂及缓冲液 | 第34-35页 |
2.1.8 实验中用到的主要仪器 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-51页 |
2.2.1 SbNrat1全长ORF的分子克隆 | 第35-40页 |
2.2.1.1 植物材料总RNA的提取 | 第36-37页 |
2.2.1.2 RNA反转录成cDNA | 第37-38页 |
2.2.1.3 从cDNA中扩增目的基因 | 第38-39页 |
2.2.1.4 质粒载体、目的片段的酶切、连接和转化 | 第39-40页 |
2.2.2 SbNrat1基因表达模式分析 | 第40-51页 |
2.2.2.1 半定量PCR | 第40页 |
2.2.2.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第40-42页 |
2.2.2.3 亚细胞定位 | 第42-46页 |
2.2.2.4 SbNrat1在酵母细胞中的金属耐属性分析 | 第46-49页 |
2.2.2.5 异源互补鉴定SbNrat1的功能 | 第49-51页 |
第三章 结果与分析 | 第51-64页 |
3.1 SbNrat1的克隆和生物信息学分析 | 第51-52页 |
3.2 SbNrat1表达模式分析 | 第52-56页 |
3.2.1 半定量PCR | 第52-53页 |
3.2.2 不同浓度铝处理以及不同铝处理时间SbNrat1表达量的分析 | 第53页 |
3.2.3 SbNrat1在根部不同区域的表达量分析 | 第53-54页 |
3.2.4 SbNrat1的表达量与铝耐受性之间的关系 | 第54-56页 |
3.3 SbNrat1的亚细胞定位 | 第56-58页 |
3.4 SbNrat1在酵母中转运活性分析 | 第58-62页 |
3.5 SbNrat在水稻中的异源表达 | 第62-64页 |
第四章 讨论 | 第64-68页 |
4.1 SbNrat1和OsNrat1功能比较 | 第65-66页 |
4.2 SbNrat1没有改变Nrat1金属离子选择性 | 第66-67页 |
4.3 SbNrat1在高粱耐铝毒中可能的角色 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第74页 |