| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 仪器与试剂 | 第10-12页 |
| 1.材料和试剂 | 第10页 |
| 2.仪器 | 第10-12页 |
| 实验方法 | 第12-17页 |
| 1 人眼脉络膜黑色素瘤标本中VEGF和PDGF的表达 | 第12页 |
| 2 缺氧条件下OCM-1细胞的生物学特性 | 第12-13页 |
| 2.1 COCl2处理后OCM-1细胞形态的观察 | 第12页 |
| 2.2 XTT检测缺氧条件下细胞的生长 | 第12页 |
| 2.3 细胞划痕实验检测缺氧条件下OCM-1细胞的迁移率 | 第12-13页 |
| 2.4 transwell实验检测缺氧条件下OCM-1细胞的侵袭率 | 第13页 |
| 3 缺氧条件下OCM-1细胞中VEGF、PDGF及AKT/MMP信号转导通路表达的检测 | 第13-14页 |
| 3.1 通过WesternBlot检测 | 第13页 |
| 3.2 通过RT-PCR检测 | 第13-14页 |
| 4 敲除VEGF、PDGF对OCM-1细胞增殖及侵袭能力的影响 | 第14-16页 |
| 4.1 筛选稳定转染的OCM-1细胞株 | 第14-15页 |
| 4.2 XTT实验测定稳定转染细胞株的增殖能力 | 第15页 |
| 4.3 细胞划痕实验测定稳定转染细胞株的迁移率 | 第15页 |
| 4.4 transwell实验测定稳定转染细胞株的侵袭性 | 第15页 |
| 4.5 流式细胞仪测定稳定转染细胞株的凋亡率 | 第15-16页 |
| 4.6 检测转染细胞株中VEGF、PDGF及Akt/MMP信号转导通路的蛋白表达 | 第16页 |
| 5 统计学方法 | 第16-17页 |
| 实验结果 | 第17-39页 |
| 1 VEGF和PDGF在人眼脉络膜黑色素瘤中呈阳性表达 | 第17-18页 |
| 2 缺氧条件下OCM-1细胞的生物学特性 | 第18-23页 |
| 2.1 缺氧条件下OCM-1细胞的形态学观察(图2.1) | 第18页 |
| 2.2 XTT检测缺氧条件下OCM-1细胞的增殖率 | 第18-19页 |
| 2.3 细胞划痕实验检测缺氧条件下OCM-1细胞的迁移率 | 第19-21页 |
| 2.4 transwell实验检测缺氧条件下OCM-1细胞的侵袭率 | 第21-23页 |
| 3 缺氧条件下OCM-1细胞中VEGF、PDGF及AKT/MMP信号转导通路表达测定 | 第23-28页 |
| 3.1 WesternBlot检测缺氧条件下VEGF、PDGF及Akt/MMP信号转导通路的蛋白表达 | 第23-26页 |
| 3.2 RT-PCR检测缺氧条件下细胞中VEGF、PDGF及Akt/MMP信号转导通路的表达 | 第26-28页 |
| 4 敲除VEGF、PDGF基因对OCM-1细胞增殖及侵袭能力的影响 | 第28-39页 |
| 4.1 筛选稳定敲除VEGF、PDGF基因的OCM-1细胞株 | 第28-30页 |
| 4.2 XTT实验测定敲除VEGF、PDGF基因细胞株的增殖率 | 第30-31页 |
| 4.3 敲除VEGF、PDGF基因抑制OCM-1细胞迁移能力 | 第31-32页 |
| 4.4 敲除VEGF、PDGF基因降低细胞株的侵袭能力 | 第32-33页 |
| 4.5 流式细胞仪测定敲除VEGF、PDGF基因细胞株的凋亡能力 | 第33-35页 |
| 4.6 检测基因敲除细胞株中VEGF、PDGF及Akt/MMP信号转导通路的蛋白表达 | 第35-39页 |
| 讨论 | 第39-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 综述 | 第46-54页 |
| 综述参考文献 | 第51-54页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
