摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 常见奶牛简介 | 第10页 |
1.2 奶牛乳腺结构特点 | 第10-11页 |
1.3 乳腺发育的分子调控研究 | 第11页 |
1.3.1 乳腺组织的细胞组成 | 第11页 |
1.3.2 催乳素及相关激素在乳腺发育过程中作用 | 第11页 |
1.4 乳腺干细胞特点 | 第11-12页 |
1.5 乳腺干细胞信号网络 | 第12-13页 |
1.5.1 乳腺干细胞微环境 | 第12-13页 |
1.5.2 乳腺干细胞相关信号通路 | 第13页 |
1.6 乳腺干细胞特异识别分子 | 第13-14页 |
1.7 乳腺干细胞细胞纯化技术 | 第14-15页 |
1.7.1 流式细胞法 | 第14-15页 |
1.7.2 免疫磁珠法 | 第15页 |
1.7.3 机械刮除法 | 第15页 |
1.8 乳腺干细胞干性维持研究 | 第15-16页 |
1.9 本研究的目的、意义 | 第16-17页 |
2 乳腺干细胞的纯化与鉴定 | 第17-29页 |
2.1 材料与试剂 | 第17-18页 |
2.1.1 材料 | 第17页 |
2.1.2 仪器及耗材 | 第17页 |
2.1.3 试剂 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-23页 |
2.2.1 乳腺干细胞的复苏 | 第18页 |
2.2.2 乳腺干细胞的纯化与传代培养 | 第18页 |
2.2.3 乳腺干细胞标记基因RT-PCR鉴定 | 第18-21页 |
2.2.4 乳腺干细胞分化潜能性检验 | 第21-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-27页 |
2.3.1 乳腺干细胞纯化结果 | 第23页 |
2.3.2 乳腺干细胞诱导分化鉴定 | 第23-27页 |
2.4 讨论 | 第27-28页 |
2.5 小结 | 第28-29页 |
3 催乳素对乳腺干细胞增殖的影响 | 第29-33页 |
3.1 材料与试剂 | 第29页 |
3.1.1 材料 | 第29页 |
3.1.2 仪器及实验耗材 | 第29页 |
3.1.3 试剂 | 第29页 |
3.2 方法 | 第29页 |
3.2.1 PRL对乳腺干细胞最适增殖浓度的探究 | 第29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-32页 |
3.3.1 催乳素刺激乳腺干细胞活性增殖曲线 | 第29-31页 |
3.3.2 催乳素刺激后乳腺来源干细胞形态观察 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32页 |
3.5 小结 | 第32-33页 |
4 催乳素刺激对乳腺干细胞标记、分化基因的影响 | 第33-41页 |
4.1 材料 | 第33页 |
4.1.1 材料 | 第33页 |
4.1.2 仪器及实验耗材 | 第33页 |
4.1.3 试剂 | 第33页 |
4.2 方法 | 第33-35页 |
4.2.1 经PRL处理的乳腺干细胞体外培养 | 第33页 |
4.2.2 RealtimePCR引物设计与合成 | 第33-34页 |
4.2.3 RealtimePCR检测基因在不同组中的表达 | 第34-35页 |
4.3 结果与讨论 | 第35-36页 |
4.3.1 细胞总RNA的提取 | 第35页 |
4.3.2 相关基因的溶解曲线 | 第35-36页 |
4.4 PRL刺激乳腺干细胞后相关基因与空白对照组表达量的关系 | 第36-39页 |
4.5 讨论 | 第39-40页 |
4.6 小结 | 第40-41页 |
5 全文总结 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
作者简介 | 第45页 |