摘要 | 第2-5页 |
abstract | 第5-7页 |
引言 | 第11-13页 |
材料和方法 | 第13-28页 |
1 MO3.13少突胶质细胞、原代大鼠OPCs培养 | 第13-16页 |
1.1 细胞来源 | 第13页 |
1.2 实验试剂 | 第13页 |
1.3 实验仪器 | 第13页 |
1.4 常用液体配制 | 第13-14页 |
1.5 MO3.13少突胶质细胞培养步骤 | 第14-15页 |
1.6 原代大鼠OPCs培养与筛选 | 第15-16页 |
2 免疫组织化学方法鉴定原代培养大鼠OPCs纯度 | 第16-17页 |
2.1 实验试剂 | 第16页 |
2.2 实验仪器 | 第16页 |
2.3 常用液体的配制 | 第16页 |
2.4 操作步骤 | 第16-17页 |
3 MTT检测6-OHDA对MO3.13OPCs活性的影响 | 第17-18页 |
3.1 实验试剂 | 第17页 |
3.2 常用仪器 | 第17页 |
3.3 MTT的方法原理与操作步骤 | 第17-18页 |
4 PMA诱导未分化的MO3.13少突胶质分化成分化的MO3.13少突胶质细胞 | 第18页 |
4.1 实验试剂 | 第18页 |
4.2 实验操作步骤 | 第18页 |
5 钙黄绿素负载检测培养未分化的MO3.13少突胶质细胞、分化的MO3.13少突胶质细胞铁转入功能 | 第18-20页 |
5.1 实验试剂 | 第18页 |
5.2 实验仪器 | 第18页 |
5.3 液体配制 | 第18-19页 |
5.4 未分化的MO3.13少突胶质细胞接种与药物处理 | 第19页 |
5.5 分化的MO3.13少突胶质细胞接种与药物处理 | 第19页 |
5.6 铁转入实验 | 第19-20页 |
6 荧光实时定量PCR检测未分化的MO3.13少突胶质细胞、分化的MO3.13少突胶质细胞FPN1、TfR1、IL-6、TNF-αmRNA表达 | 第20-22页 |
6.1 实验试剂 | 第20页 |
6.2 实验仪器 | 第20页 |
6.3 细胞接种与药物处理 | 第20页 |
6.4 RNA的提取及逆转录反应 | 第20-21页 |
6.5 荧光实时定量(realtime)PCR | 第21-22页 |
7 Westernblot检测MO3.13少突胶质细胞和原代大鼠OPCsIRP1、TfR1、FPN1蛋白表达 | 第22-26页 |
7.1 实验试剂 | 第22-23页 |
7.2 实验仪器 | 第23页 |
7.3 所用药物的配制 | 第23页 |
7.4 常用液体配制 | 第23-24页 |
7.5 细胞接种与药物处理 | 第24-25页 |
7.6 总蛋白的提取和定量 | 第25页 |
7.7 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳及转膜 | 第25-26页 |
8 动物准备 | 第26-27页 |
8.1 实验试剂 | 第26页 |
8.2 实验仪器 | 第26页 |
8.3 常用液体配制 | 第26页 |
8.4 PD大鼠模型制备 | 第26-27页 |
9 统计学处理 | 第27-28页 |
结果 | 第28-39页 |
1 MTT检测不同浓度6-OHDA处理未分化的MO3.13少突胶质细胞的细胞活力 | 第28页 |
2 10μM、100μM6-OHDA处理未分化的MO3.13少突胶质细胞IRP1、FPN1和TfR1的蛋白表达水平 | 第28-29页 |
3 10μM、100μM6-OHDA处理未分化的MO3.13少突胶质细胞FPN1和TfR1的mRNA表达水平 | 第29-30页 |
4 10μM、100μM6-OHDA对未分化的MO3.13少突胶质细胞铁转入功能的影响 | 第30-31页 |
5 10μM、100μM6-OHDA处理未分化的MO3.13少突胶质细胞IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平 | 第31-32页 |
6 PMA诱导为分化的MO3.13少突胶质细胞分化成熟 | 第32-33页 |
7 10、100μMμM6-OHDA处理分化的MO3.13少突胶质细胞IRP1、FPN1和TfR1的蛋白表达水平 | 第33页 |
8 10μM、100μM6-OHDA处理分化的MO3.13少突胶质细胞FPN1和TfR1的mRNA表达水平 | 第33-34页 |
9 10μM、100μM6-OHDA对分化的MO3.13少突胶质细胞铁转入功能的影响 | 第34-35页 |
10 10μM、100μM6-OHDA处理分化的MO3.13少突胶质细胞IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平 | 第35-36页 |
11 6-OHDA处理OPCs促进细胞的增殖 | 第36-37页 |
12 提取纯化后的原代大鼠OPCs已达到实验所需要的水平 | 第37页 |
13 6-OHDA处理原代大鼠OPCsIRP1、FPN1和TfR1的蛋白表达水平 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
综述 | 第45-62页 |
综述参考文献 | 第54-62页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第62-63页 |
缩略词表 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |