| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词一览表 | 第13-16页 |
| 第1章 引言 | 第16-30页 |
| 1.1 肿瘤发生及其防治现状 | 第16-22页 |
| 1.1.1 肿瘤发生过程简述 | 第16-18页 |
| 1.1.2 肿瘤的防治现状 | 第18-20页 |
| 1.1.3 肝癌、胃癌的研究现状 | 第20-22页 |
| 1.2 黏着斑激酶与肿瘤关系的概述 | 第22-26页 |
| 1.2.1 黏着斑激酶简介 | 第22-23页 |
| 1.2.2 黏着斑激酶与肿瘤 | 第23-26页 |
| 1.3 RNAi干扰及TALEN敲除 | 第26-30页 |
| 1.3.1 RNA干扰的作用机制及生物学意义 | 第26-27页 |
| 1.3.2 TALEN技术及其原理 | 第27-30页 |
| 第2章 课题立论依据、技术路线、研究意义 | 第30-32页 |
| 第3章 靶向FAK的siRNA质粒转染 | 第32-42页 |
| 3.1 材料、试剂与仪器 | 第32-35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 3.1.4 试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 重组质粒小量制备 | 第35-37页 |
| 3.2.2 质粒样品的浓度与纯度测定 | 第37页 |
| 3.2.3 质粒样品的1%琼脂糖凝胶电泳检测 | 第37页 |
| 3.2.4 细胞培养 | 第37-39页 |
| 3.2.5 细胞转染 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-40页 |
| 3.3.1 质粒样品检测 | 第39-40页 |
| 3.3.2 细胞转染效率评估 | 第40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 FAK表达对细胞亚显微结构重塑的研究 | 第42-50页 |
| 4.1 材料、试剂与仪器 | 第42-43页 |
| 4.1.1 实验材料(同第3章) | 第42页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
| 4.1.4 试剂的配制 | 第42-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43页 |
| 4.2.1 细胞培养及质粒小量制备(同第3章) | 第43页 |
| 4.2.2 扫描电子显微镜样品制备、观察 | 第43页 |
| 4.3 结果 | 第43-47页 |
| 4.3.1 SGC-7901细胞形态及表面微结构观察 | 第43-44页 |
| 4.3.2 SMMC-7721细胞形态及表面微结构观察 | 第44-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第5章 FAK表达对细胞骨架系统重塑的研究 | 第50-70页 |
| 5.1 材料、试剂与仪器 | 第50-51页 |
| 5.1.1 实验材料(同第3章) | 第50页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第50页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 5.1.4 试剂的配制 | 第51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 5.2.1 细胞培养及质粒小量制备(同第3章) | 第51页 |
| 5.2.2 细胞内F-actin的荧光分布检测 | 第51-52页 |
| 5.2.3 细胞内β-tubulin的荧光分布检测 | 第52-53页 |
| 5.2.4 细胞内Lamin B1的分布检测 | 第53-54页 |
| 5.2.5 细胞骨架整体形态结构检测 | 第54-55页 |
| 5.3 结果 | 第55-68页 |
| 5.3.1 细胞内F-actin的荧光分布检测 | 第55-58页 |
| 5.3.2 细胞内β-tubulin的荧光分布检测 | 第58-61页 |
| 5.3.3 细胞内Lamin B1的分布检测 | 第61-67页 |
| 5.3.4 细胞骨形态结构检测 | 第67-68页 |
| 5.4 讨论 | 第68-70页 |
| 第6章 FAK对细胞凋亡的影响检测研究 | 第70-76页 |
| 6.1 材料、试剂与仪器 | 第70-71页 |
| 6.1.1 实验材料(同第3章) | 第70页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第70页 |
| 6.1.3 主要仪器设备(同第3章) | 第70页 |
| 6.1.4 试剂的配制 | 第70-71页 |
| 6.2 实验方法 | 第71页 |
| 6.2.1 细胞培养及质粒小量制备(同第3章) | 第71页 |
| 6.2.2 细胞凋亡形态检测 | 第71页 |
| 6.2.3 细胞膜通透性影响检测 | 第71页 |
| 6.3 结果 | 第71-74页 |
| 6.3.1 细胞内线粒体和细胞核的荧光分布检测 | 第71-73页 |
| 6.3.2 细胞膜通透性的改变 | 第73-74页 |
| 6.4 讨论 | 第74-76页 |
| 第7章 试构建FAK基因敲除的SGC-7901细胞 | 第76-92页 |
| 7.1 材料、试剂与仪器 | 第76-77页 |
| 7.1.1 实验材料(同第3章) | 第76页 |
| 7.1.2 实验试剂 | 第76页 |
| 7.1.3 主要仪器设备 | 第76页 |
| 7.1.4 试剂的配制 | 第76-77页 |
| 7.2 实验方法 | 第77-83页 |
| 7.2.1 FAK的打靶位点及识别位点设计 | 第77页 |
| 7.2.2 构建TALEN质粒 | 第77-81页 |
| 7.2.3 细胞转染及嘌呤霉素筛选 | 第81页 |
| 7.2.4 细胞克隆化培养 | 第81-82页 |
| 7.2.5 细胞阳性克隆初步筛选鉴定 | 第82-83页 |
| 7.3 结果 | 第83-90页 |
| 7.3.1 FAK的打靶位点及识别位点设计 | 第83-84页 |
| 7.3.2 构建TALEN质粒 | 第84-86页 |
| 7.3.3 细胞转染及嘌呤霉素筛选 | 第86页 |
| 7.3.4 细胞克隆化培养 | 第86页 |
| 7.3.5 细胞阳性克隆初步筛选鉴定 | 第86-90页 |
| 7.4 讨论 | 第90-92页 |
| 总结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第110-111页 |
