缩略词表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第12-32页 |
1.1 蛋白质糖基化修饰概述 | 第12-14页 |
1.2 免疫球蛋白A1与IgA肾病的研究进展 | 第14-16页 |
1.3 基于质谱的糖基化蛋白质研究策略 | 第16-20页 |
1.3.1 糖蛋白/糖基化肽段的富集方法 | 第17-19页 |
1.3.2 糖基化肽段的质谱分析方法 | 第19-20页 |
1.4 血浆O-糖蛋白质组研究进展 | 第20-22页 |
1.5 立题依据与研究思路 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-32页 |
第二章 IgA肾病患者血浆IgA1异常糖基化研究 | 第32-53页 |
2.1 前言 | 第32-33页 |
2.2 材料方法 | 第33-36页 |
2.2.1 主要材料 | 第33页 |
2.2.2 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的纯化 | 第33-34页 |
2.2.3 N-糖链的解离以及完整O-糖肽的酶切 | 第34页 |
2.2.4 糖链和糖肽富集 | 第34页 |
2.2.5 唾液酸的去除 | 第34-35页 |
2.2.6 MALDI-TOF-MS分析 | 第35页 |
2.2.7 LC-MS/MS分析 | 第35页 |
2.2.8 数据分析 | 第35-36页 |
2.3 结果与讨论 | 第36-48页 |
2.3.1 IgA肾病以及健康人血浆单体和多聚体IgA1的分离纯化 | 第36页 |
2.3.2 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的糖基化分析流程 | 第36-37页 |
2.3.3 血浆IgA1的N-糖链质谱分析方法的建立 | 第37-38页 |
2.3.4 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的N-糖链分析结果 | 第38-41页 |
2.3.5 人血浆IgA1的完整O-糖基化肽段分析方法建立 | 第41-44页 |
2.3.6 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的完整O-糖基化肽段分析结果 | 第44-48页 |
2.4 本章小结 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
第三章 人血浆O-GalNAc糖蛋白质组学研究方法及其在IgA肾病中的应用.. | 第53-76页 |
3.1 前言 | 第53-55页 |
3.2 材料与方法 | 第55-57页 |
3.2.1 主要材料 | 第55页 |
3.2.2 高丰度蛋白的去除 | 第55页 |
3.2.3 木菠萝素亲和色谱和尺寸排阻色谱 | 第55页 |
3.2.4 N-糖基化的去除 | 第55-56页 |
3.2.5 还原、烷基化以及酶切 | 第56页 |
3.2.6 HILIC富集完整O-糖基化肽段 | 第56页 |
3.2.7 双甲基标记 | 第56页 |
3.2.8 MALDI-TOF质谱分析 | 第56页 |
3.2.9 LC-MS/MS质谱分析 | 第56-57页 |
3.2.10 数据库搜索及生物信息学处理 | 第57页 |
3.3 结果与讨论 | 第57-70页 |
3.3.1 健康人血浆O-糖蛋白质组分析流程 | 第57-59页 |
3.3.2 多酶酶切策略用于O-糖蛋白质组研究 | 第59-60页 |
3.3.3 多维分离策略用于O-糖蛋白质组研究 | 第60-62页 |
3.3.4 健康人血浆位点特异性O-糖蛋白质组绘图 | 第62-63页 |
3.3.5 O-糖基化的微观不均一性和宏观不均一性 | 第63-67页 |
3.3.6 人血浆O-GalNAc定量蛋白质组学及其在IgA肾病中的应用 | 第67-70页 |
3.4 本章小结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
第四章 广谱性糖基化肽段富集材料MASC的开发与应用 | 第76-107页 |
4.1 前言 | 第76-77页 |
4.2 材料与方法 | 第77-80页 |
4.2.1 主要材料 | 第77页 |
4.2.2 富集材料的制备 | 第77-78页 |
4.2.3 标准蛋白蛋白酶切 | 第78页 |
4.2.4 复杂样本总蛋白提取与酶切 | 第78页 |
4.2.5 糖基化肽段的富集 | 第78-79页 |
4.2.6 N-糖基化的去除 | 第79页 |
4.2.7 糖肽富集回收率评估 | 第79页 |
4.2.8 质谱分析 | 第79页 |
4.2.9 数据库搜索及生物信息学处理 | 第79-80页 |
4.3 结果与讨论 | 第80-87页 |
4.3.1 MASC的表征 | 第80-83页 |
4.3.2 MASC富集标准蛋白的糖肽 | 第83-85页 |
4.3.3 MASC富集人血浆中的N-糖肽 | 第85-86页 |
4.3.4 N-糖肽谱图揭示人类尿液组成的性别差异 | 第86-87页 |
4.3.5 MASC富集人血浆中的O-糖肽 | 第87页 |
4.4 本章小结 | 第87-90页 |
参考文献 | 第90-107页 |
全文总结 | 第107-109页 |
附录 | 第109-128页 |
在学期间取得的学术成果 | 第128-130页 |
简历 | 第130-131页 |
致谢 | 第131页 |