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糖蛋白质组学新方法及其在IgA肾病中的应用研究

缩略词表第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
第一章 前言第12-32页
    1.1 蛋白质糖基化修饰概述第12-14页
    1.2 免疫球蛋白A1与IgA肾病的研究进展第14-16页
    1.3 基于质谱的糖基化蛋白质研究策略第16-20页
        1.3.1 糖蛋白/糖基化肽段的富集方法第17-19页
        1.3.2 糖基化肽段的质谱分析方法第19-20页
    1.4 血浆O-糖蛋白质组研究进展第20-22页
    1.5 立题依据与研究思路第22-23页
    参考文献第23-32页
第二章 IgA肾病患者血浆IgA1异常糖基化研究第32-53页
    2.1 前言第32-33页
    2.2 材料方法第33-36页
        2.2.1 主要材料第33页
        2.2.2 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的纯化第33-34页
        2.2.3 N-糖链的解离以及完整O-糖肽的酶切第34页
        2.2.4 糖链和糖肽富集第34页
        2.2.5 唾液酸的去除第34-35页
        2.2.6 MALDI-TOF-MS分析第35页
        2.2.7 LC-MS/MS分析第35页
        2.2.8 数据分析第35-36页
    2.3 结果与讨论第36-48页
        2.3.1 IgA肾病以及健康人血浆单体和多聚体IgA1的分离纯化第36页
        2.3.2 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的糖基化分析流程第36-37页
        2.3.3 血浆IgA1的N-糖链质谱分析方法的建立第37-38页
        2.3.4 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的N-糖链分析结果第38-41页
        2.3.5 人血浆IgA1的完整O-糖基化肽段分析方法建立第41-44页
        2.3.6 IgA肾病以及健康人血浆IgA1的完整O-糖基化肽段分析结果第44-48页
    2.4 本章小结第48-50页
    参考文献第50-53页
第三章 人血浆O-GalNAc糖蛋白质组学研究方法及其在IgA肾病中的应用..第53-76页
    3.1 前言第53-55页
    3.2 材料与方法第55-57页
        3.2.1 主要材料第55页
        3.2.2 高丰度蛋白的去除第55页
        3.2.3 木菠萝素亲和色谱和尺寸排阻色谱第55页
        3.2.4 N-糖基化的去除第55-56页
        3.2.5 还原、烷基化以及酶切第56页
        3.2.6 HILIC富集完整O-糖基化肽段第56页
        3.2.7 双甲基标记第56页
        3.2.8 MALDI-TOF质谱分析第56页
        3.2.9 LC-MS/MS质谱分析第56-57页
        3.2.10 数据库搜索及生物信息学处理第57页
    3.3 结果与讨论第57-70页
        3.3.1 健康人血浆O-糖蛋白质组分析流程第57-59页
        3.3.2 多酶酶切策略用于O-糖蛋白质组研究第59-60页
        3.3.3 多维分离策略用于O-糖蛋白质组研究第60-62页
        3.3.4 健康人血浆位点特异性O-糖蛋白质组绘图第62-63页
        3.3.5 O-糖基化的微观不均一性和宏观不均一性第63-67页
        3.3.6 人血浆O-GalNAc定量蛋白质组学及其在IgA肾病中的应用第67-70页
    3.4 本章小结第70-71页
    参考文献第71-76页
第四章 广谱性糖基化肽段富集材料MASC的开发与应用第76-107页
    4.1 前言第76-77页
    4.2 材料与方法第77-80页
        4.2.1 主要材料第77页
        4.2.2 富集材料的制备第77-78页
        4.2.3 标准蛋白蛋白酶切第78页
        4.2.4 复杂样本总蛋白提取与酶切第78页
        4.2.5 糖基化肽段的富集第78-79页
        4.2.6 N-糖基化的去除第79页
        4.2.7 糖肽富集回收率评估第79页
        4.2.8 质谱分析第79页
        4.2.9 数据库搜索及生物信息学处理第79-80页
    4.3 结果与讨论第80-87页
        4.3.1 MASC的表征第80-83页
        4.3.2 MASC富集标准蛋白的糖肽第83-85页
        4.3.3 MASC富集人血浆中的N-糖肽第85-86页
        4.3.4 N-糖肽谱图揭示人类尿液组成的性别差异第86-87页
        4.3.5 MASC富集人血浆中的O-糖肽第87页
    4.4 本章小结第87-90页
    参考文献第90-107页
全文总结第107-109页
附录第109-128页
在学期间取得的学术成果第128-130页
简历第130-131页
致谢第131页

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