| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略词表 | 第15-16页 |
| 技术路线图 | 第16-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一章 替莫唑胺上调PAX6抑制胶质瘤细胞增殖 | 第19-39页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 细胞株来源及分组 | 第20页 |
| 1.1.2 主要仪器、器材 | 第20-21页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 1.2.1 人脑胶质瘤细胞的培养 | 第21-22页 |
| 1.2.2 细胞的冰冻保存、复苏和计数 | 第22页 |
| 1.2.3 Lipo-2000转染 | 第22-23页 |
| 1.2.4 蛋白印记(Western Blot)检测蛋白的表达 | 第23-25页 |
| 1.2.5 Real-time PCR检测miR-223在脑胶质瘤组织中的表达 | 第25-27页 |
| 1.2.6 MTT法测生长曲线的测定 | 第27页 |
| 1.2.7 BrdU-ELISA法检测细胞增殖 | 第27页 |
| l.3 统计学分析 | 第27页 |
| 1.4 结果 | 第27-35页 |
| 1.4.1 替莫唑胺上调U251细胞PAX6的表达 | 第27-29页 |
| 1.4.2 PAX6-shRNA转染U251细胞后PAX6mRNA与蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 1.4.3 PAX6 ORF clone转染U251细胞后PAX6mRNA与蛋白的表达 | 第30-32页 |
| 1.4.4 PAX6-ORF clone抑制U251细胞的增殖 | 第32-33页 |
| 1.4.5 替莫唑胺上调PAX6抑制U251细胞的增殖 | 第33-35页 |
| 讨论 | 第35-39页 |
| 第二章 对替莫唑胺化疗敏感靶向调节PAX6的MIRNAS筛选 | 第39-49页 |
| 前言 | 第39页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 细胞株来源及分组 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要仪器、器材 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41页 |
| 2.2.1 生物信息学预测靶向PAX6的miRNAs | 第41页 |
| 2.2.2 QPCR检测miRNA表达 | 第41页 |
| 2.3 统计学分析 | 第41页 |
| 2.4 结果 | 第41-45页 |
| 2.4.1 靶向PAX6的miRNAs的预测结果 | 第41-43页 |
| 2.4.2 验证miR-223、miR-590-3p、miR-190、miR-190b、miR-7在TMZ处理U251细胞后的表达情况 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-49页 |
| 第三章 替莫唑胺下调MIR-223抑制脑胶质瘤细胞增殖 | 第49-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-51页 |
| 3.1.1 细胞株来源及分组 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要仪器、器材 | 第50页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51页 |
| 3.3 统计学分析 | 第51页 |
| 3.4 结果 | 第51-55页 |
| 3.4.1 miR-223与miRNA-223 sponge转染U251细胞后的表达验证 | 第51-52页 |
| 3.4.3 沉默miR-223抑制U251细胞增殖 | 第52-53页 |
| 3.4.4 TMZ下调miR-223抑制U251细胞增殖 | 第53-55页 |
| 3.5 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 替莫唑胺通过MIR-223/PAX6抑制胶质瘤细胞增殖及对PI3K/AKT通路的影响 | 第57-77页 |
| 前言 | 第57-58页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 细胞株来源及分组 | 第58页 |
| 4.1.2 主要仪器、器材 | 第58页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-64页 |
| 4.2.1 双荧光素酶报告基因方法 | 第59-64页 |
| 4.2.2 余实验方法见第一章节 | 第64页 |
| 4.3 统计学分析 | 第64页 |
| 4.4 结果 | 第64-74页 |
| 4.4.1 miR-223靶向抑制PAX6的表达 | 第64-66页 |
| 4.4.2 沉默miR-223上调PAX6抑制U251细胞增殖 | 第66-67页 |
| 4.4.3 TMZ下调miR-223调控PI3K/Akt通路 | 第67-71页 |
| 4.4.4 miR-223下调PAX6调控PI3K/Akt通路 | 第71-74页 |
| 4.5 讨论 | 第74-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 综述 | 第89-109页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
