| 摘要 | 第10-15页 |
| Abstract | 第15-20页 |
| 第一部分 神经节苷脂 GM3 抑制小鼠肝癌淋巴结转移能力的分子机制研究 | 第21-41页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 材料和方法 | 第22-27页 |
| 1. 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1 实验细胞 | 第22页 |
| 1.2 实验试剂 | 第22页 |
| 1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2. 方法 | 第23-27页 |
| 2.1 小鼠肝癌 Hca－F/P 细胞神经节苷脂成分的比较分析 | 第23-24页 |
| 2.2 小鼠肝癌细胞株 Hca－F/P 中神经节苷脂含量的调节 | 第24页 |
| 2.3 细胞体外迁移实验 | 第24-25页 |
| 2.4 Western blotting | 第25-27页 |
| 结果 | 第27-34页 |
| 1 小鼠肝癌细胞株 Hca－F/P 中的神经节苷脂的表达 | 第27-28页 |
| 2 抑制 Hca－F/P 细胞神经节苷脂的合成对细胞运动迁移能力的影响 | 第28-29页 |
| 3 上调神经节苷脂含量对 Hca－F/P 细胞运动迁移能力的影响 | 第29-30页 |
| 4 神经节苷脂对表皮生长因子受体 EGFR 介导的 PI3K/Akt信号转导通路活性的影响 | 第30-31页 |
| 5 阻断 PI3K/Akt 信号转导通路对小鼠肝癌细胞株 Hca－F/P运动迁移能力的影响 | 第31-34页 |
| 讨论 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 第二部分 神经节苷脂与 CD82 协同调控人结肠癌细胞运动迁移能力的分子机制研究 | 第41-61页 |
| 前言 | 第41-42页 |
| 材料和方法 | 第42-48页 |
| 1. 实验材料 | 第42-43页 |
| 1.1 实验细胞 | 第42页 |
| 1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
| 2. 方法 | 第43-48页 |
| 2.1 人结肠癌细胞株 SW620 中神经节苷脂的成分及 GM3 的含量分析 | 第43页 |
| 2.2 外加 GM3 后 SW620 细胞内神经节苷脂 GM3 的变化情况 | 第43-44页 |
| 2.3 pcDNA4/V5-CD82 质粒的构建与细胞转染 | 第44-46页 |
| 2.4 RT-PCR 及 western blot 检测 CD82 表达 | 第46-47页 |
| 2.5 细胞体外迁移实验 | 第47页 |
| 2.6 Western blotting | 第47-48页 |
| 结果 | 第48-54页 |
| 1. 调节 SW620 中的神经节苷脂组分和 CD82 的含量 | 第48-50页 |
| 2. 神经节苷脂和 CD82 对 SW620 运动迁移能力的影响 | 第50-51页 |
| 3. 神经节苷脂和 CD82 对 SW620 内 EGFR 磷酸化及其下游信号通路激活的影响 | 第51-52页 |
| 4. 阻断 MAPK 和 PI3K/Akt 信号转导通路对 SW620 细胞运动迁移能力的影响 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 第三部分 CD82 不同 N-糖基化修饰调控人结肠癌细胞转移的机制研究 | 第61-76页 |
| 前言 | 第61-62页 |
| 材料和方法 | 第62-66页 |
| 1. 实验材料 | 第62页 |
| 1.1 实验细胞 | 第62页 |
| 1.2 实验试剂 | 第62页 |
| 1.3 实验仪器 | 第62页 |
| 2. 方法 | 第62-66页 |
| 2.1 CD82N-糖基化位点定点突变质粒的构建 | 第62-64页 |
| 2.2 CD82N-糖基化突变体的转染及在稳定转染突变体的SW620 的筛选及鉴定 | 第64-65页 |
| 2.3 CD82N-糖基化突变体对 SW620 细胞运动迁移能力的影响及其在细胞膜上的分布情况 | 第65-66页 |
| 2.4 部分 CD82N-糖基化突变体在稳转 SW620 中对 CD82在脂筏中分布的影响 | 第66页 |
| 结果 | 第66-70页 |
| 1. CD82 N-糖基化位点突变表达载体的构建 | 第66-67页 |
| 2. N-糖基化位点突变的重组 CD82 表达情况及细胞运动迁移能力的变化 | 第67-68页 |
| 3. N-糖基化位点突变的 CD82 在 SW620 细胞中的定位 | 第68-69页 |
| 4. N-糖基化位点三点突变后 CD82 在脂筏中分布的改变 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 综述 | 第76-94页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
