| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略语/符号说明 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-22页 |
| 第一部分 体外重组一型菌毛分泌系统usher结构域 | 第22-31页 |
| 1.1 材料与设备 | 第22-24页 |
| 1.1.1 质粒/DNA | 第22-23页 |
| 1.1.2 菌株 | 第23页 |
| 1.1.3 试剂 | 第23页 |
| 1.1.4 耗材 | 第23页 |
| 1.1.5 常用溶液 | 第23-24页 |
| 1.1.6 仪器 | 第24页 |
| 1.2 方法与步骤 | 第24-27页 |
| 1.2.1 蛋白质表达载体的构建 | 第25页 |
| 1.2.2 一型菌毛分泌系统usher结构域的表达与纯化 | 第25-26页 |
| 1.2.3 菌毛亚基体外重构(相互作用实验) | 第26-27页 |
| 1.3 结果 | 第27-29页 |
| 1.3.1 菌毛亚基Usher结构域的表达与纯化 | 第27-28页 |
| 1.3.2 菌毛亚基体外相互作用实验 | 第28-29页 |
| 1.4 讨论 | 第29-30页 |
| 1.5 小结 | 第30-31页 |
| 第二部分 体外重组一型菌毛分泌系统五元复合物与结晶样品前处理 | 第31-46页 |
| 2.1 材料与设备 | 第31-33页 |
| 2.1.1 质粒/DNA | 第31页 |
| 2.1.2 菌株 | 第31页 |
| 2.1.3 试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.4 耗材 | 第32页 |
| 2.1.5 常用溶液 | 第32页 |
| 2.1.6 仪器 | 第32-33页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第33-36页 |
| 2.2.1 菌毛分泌系统表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.2 FimD-CGHF的表达与纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.3 蛋白质trypsin酶解实验 | 第35-36页 |
| 2.2.4 结晶纯蛋白质样品的制备 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-45页 |
| 2.3.1 一型菌毛分泌系统五元复合物的体外重组表达纯化 | 第36-38页 |
| 2.3.2 胰蛋白酶消化反应产物 | 第38-39页 |
| 2.3.3 结晶样品前处理:凝胶过滤层析 | 第39-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45页 |
| 2.5 小结 | 第45-46页 |
| 第三部分 一型菌毛分泌系统的晶体结构解析 | 第46-86页 |
| 3.1 材料与设备 | 第46-48页 |
| 3.1.1 多肽 | 第46页 |
| 3.1.2 质粒 | 第46-47页 |
| 3.1.3 菌株 | 第47-48页 |
| 3.1.4 试剂 | 第48页 |
| 3.1.5 耗材 | 第48页 |
| 3.1.6 常用溶液 | 第48页 |
| 3.1.7 仪器与设备 | 第48页 |
| 3.2 方法与步骤 | 第48-57页 |
| 3.2.1 结晶条件的初步筛选 | 第48-49页 |
| 3.2.2 菌毛亚基复合体结晶条件的优化,去污剂优化,addtive筛选和衍射质量的筛选 | 第49-53页 |
| 3.2.3 晶体数据收集和数据处理 | 第53-55页 |
| 3.2.4 晶体结构解析与修正 | 第55-56页 |
| 3.2.5 菌毛亚基及复合物的结构分析展示 | 第56页 |
| 3.2.6 一型菌毛分泌系统的单点突变与复合物的组装 | 第56-57页 |
| 3.2.7 Fim源多肽类潜在抗菌药物的设计与蛋白质复合物的体外作用 | 第57页 |
| 3.2.8 一型菌毛敲出株的菌体表面的扫描电镜观察 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-81页 |
| 3.3.1 晶体的初步筛选 | 第57-60页 |
| 3.3.2 晶体优化 | 第60-66页 |
| 3.3.3 数据处理与晶体学相关信息 | 第66页 |
| 3.3.4 结构解析与修正参数 | 第66-67页 |
| 3.3.5 菌毛亚基usher结构域与一型菌毛分泌系统五元复合物的晶体结构展示 | 第67-76页 |
| 3.3.6 单点突变对菌毛亚基组装的影响 | 第76-77页 |
| 3.3.7 Fim源多肽对五元菌毛复合物的作用效果 | 第77-79页 |
| 3.3.8 大肠杆菌及fim敲出株表面形貌的扫描电镜观察 | 第79页 |
| 3.3.9 与粘附素结合状态的分子模拟 | 第79-81页 |
| 3.4 讨论 | 第81-85页 |
| 3.5 小结 | 第85-86页 |
| 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第91-92页 |
| 综述 | 第92-101页 |
| 综述参考文献 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
