摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 绵羊尾型分类 | 第12-13页 |
1.1.1 脂尾型品种 | 第12页 |
1.1.2 瘦尾型品种 | 第12-13页 |
1.1.3 肥臀型品种 | 第13页 |
1.2 脂尾型绵羊的起源和发展 | 第13页 |
1.3 脂肪的发育和代谢 | 第13-15页 |
1.3.1 白色与棕色脂肪组织 | 第14页 |
1.3.2 脂肪的沉积 | 第14页 |
1.3.3 脂肪细胞研究进展 | 第14-15页 |
1.4 脂肪沉积相关转录因子与酶基因 | 第15-18页 |
1.4.1 脂蛋白酯酶 LPL | 第16-17页 |
1.4.2 CCAAT/增强子结合蛋白 C/EBP | 第17-18页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 滩羊 C/EBPα基因的克隆与生物信息学分析 | 第19-30页 |
2.1 试验材料与方法 | 第19-22页 |
2.1.1 主要仪器 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 样品采集 | 第19-20页 |
2.1.4 引物 | 第20页 |
2.1.5 RNA 提取(Trizol 法) | 第20页 |
2.1.6 反转录(合成 cDNA) | 第20-21页 |
2.1.7 聚合酶链式反应(PCR) | 第21页 |
2.1.8 PCR 扩增产物的回收和连接载体 | 第21页 |
2.1.9 连接产物的转化 | 第21-22页 |
2.1.10 重组质粒的提取和测序 | 第22页 |
2.1.11 测序结果比对与分析 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-28页 |
2.2.1 脂肪组织 RNA 提取的完整性 | 第22-23页 |
2.2.2 C/EBPα基因的克隆与测序 | 第23页 |
2.2.3 C/EBPα基因生物信息学分析 | 第23-28页 |
2.3 讨论 | 第28页 |
2.4 小结 | 第28-30页 |
第三章 不同尾型绵羊品种的 LPL 与 C/EBPα基因在其尾部脂肪组织中的表达 | 第30-38页 |
3.1 试验材料与方法 | 第30-33页 |
3.1.1 主要仪器 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
3.1.3 样品采集 | 第30-31页 |
3.1.4 RNA 提取与反转录 | 第31页 |
3.1.5 实时荧光定量 PCR | 第31页 |
3.1.6 蛋白的提取 | 第31-32页 |
3.1.7 Western blot 分析 | 第32-33页 |
3.1.8 数据统计和分析 | 第33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-36页 |
3.2.1 LPL 和 C/EBPα在 5 个绵羊品种尾部脂肪组织中的 mRNA 表达 | 第33-34页 |
3.2.2 LPL 和 C/EBPα在 5 个品种绵羊尾部脂肪组织中的蛋白表达 | 第34-36页 |
3.4 讨论 | 第36-37页 |
3.5 小结 | 第37-38页 |
第四章 不同月龄滩羊 LPL 与 C/EBPα基因在尾部脂肪中的 mRNA 表达规律研究 | 第38-43页 |
4.1 试验材料与方法 | 第38-39页 |
4.1.1 主要仪器 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
4.1.3 样品采集 | 第38页 |
4.1.4 RNA 提取与反转录 | 第38页 |
4.1.5 实时荧光定量 PCR | 第38页 |
4.1.6 数据统计与分析 | 第38-39页 |
4.2 结果与分析 | 第39-41页 |
4.2.1 LPL 和 C/EBPα在不同月龄滩羊尾部脂肪组织中的表达 | 第39-40页 |
4.2.2 LPL 和 C/EBPα在滩羊、陕北细毛羊不同部位中的表达 | 第40-41页 |
4.3 讨论 | 第41-42页 |
4.4 小结 | 第42-43页 |
第五章 绵羊尾部脂肪细胞的分化增殖规律及 LPL 与 C/EBPα基因的 mRNA 表达研究 | 第43-51页 |
5.1 试验材料与方法 | 第43-45页 |
5.1.1 主要仪器 | 第43页 |
5.1.2 主要试剂 | 第43页 |
5.1.3 样品采集 | 第43页 |
5.1.4 主要器械 | 第43-44页 |
5.1.5 消化法原代培养绵羊前体脂肪细胞 | 第44页 |
5.1.6 绵羊前体脂肪细胞的传代培养 | 第44页 |
5.1.7 绵羊前体脂肪细胞的诱导分化 | 第44页 |
5.1.8 绵羊前体脂肪细胞分化过程中的时序测定 | 第44-45页 |
5.1.9 细胞计数 | 第45页 |
5.1.10 绵羊前体脂肪细胞生长曲线的绘制 | 第45页 |
5.1.11 油红 O 染色 | 第45页 |
5.2 结果与分析 | 第45-49页 |
5.2.1 绵羊前体脂肪细胞的形态学观察 | 第45-46页 |
5.2.2 绵羊前体脂肪细胞的生长曲线 | 第46-47页 |
5.2.3 绵羊前体脂肪细胞的诱导分化 | 第47-48页 |
5.2.4 前体脂肪细胞分化过程中 LPL 与 C/EBPα基因的时序表达 | 第48-49页 |
5.3 讨论 | 第49-50页 |
5.4 小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51页 |
创新点 | 第51页 |
下一步研究的内容 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |