| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 縮略语 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 研究现状、成果 | 第11-12页 |
| 研究目的、方法 | 第12-14页 |
| 对象和方法 | 第14-25页 |
| 1 菌株与细胞株 | 第14页 |
| 2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 4 主要溶液成分及配制方法 | 第16-18页 |
| 4.1 LB培养基和LB培养板的成分及配置 | 第16页 |
| 4.2 PBS的配制 | 第16页 |
| 4.3 SDS-PAGE凝胶配制 | 第16-17页 |
| 4.4 电泳液的配制 | 第17页 |
| 4.5 转膜液的配制 | 第17页 |
| 4.6 TBST及封闭液的配制 | 第17-18页 |
| 5 主要方法 | 第18-25页 |
| 5.1 涂板挑单克隆及摇菌 | 第18页 |
| 5.2 质粒提取 | 第18页 |
| 5.3 NIH/3T3稳定细胞株的建立 | 第18-22页 |
| 5.3.1 设计合成shRNA干扰靶点并构建shRNA的质粒表达载体 | 第19-20页 |
| 5.3.2 293T细胞、NIH/3T3细胞的复苏、传代、冻存和常规培养 | 第20页 |
| 5.3.3 嘌呤霉素药筛预实验 | 第20-21页 |
| 5.3.4 慢病毒包装和靶细胞的感染 | 第21-22页 |
| 5.4 有效干扰靶点的筛选 | 第22-25页 |
| 5.4.1 Realtime-PCR | 第22-23页 |
| 5.4.2 Western Blot | 第23-25页 |
| 结果 | 第25-30页 |
| 1 质粒鉴定结果 | 第25页 |
| 2 mTOR在小鼠成纤维细胞NIH3T3中的表达 | 第25-26页 |
| 3 慢病毒介导的shRNA靶向mTOR基因NIH3T3稳定细胞株的建立 | 第26-27页 |
| 4 有效干扰靶点的筛选 | 第27-30页 |
| 讨论 | 第30-35页 |
| 1 mTOR结构和传导路径 | 第30-31页 |
| 2 RNAi技术的特点 | 第31-32页 |
| 3 利用慢病毒介导的优点 | 第32页 |
| 4 mTOR信号通路和ARMD | 第32-34页 |
| 5 抑制mTOR基因在ARMD中的作用价值 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第40-41页 |
| 综述 | 第41-64页 |
| 综述参考文献 | 第54-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
