致谢 | 第6-8页 |
前言 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第17-27页 |
1 昆虫神经系统 | 第17-20页 |
2 昆虫神经肽定义 | 第20-21页 |
3 昆虫神经肽种类 | 第21-22页 |
4 昆虫神经肽的分布 | 第22-23页 |
5 昆虫神经肽的生理功能 | 第23-26页 |
5.1 神经肽与昆虫蜕皮作用 | 第23页 |
5.2 神经肽与昆虫的取食活动 | 第23-24页 |
5.3 神经肽与水和离子平衡 | 第24-25页 |
5.4 神经肽调控昆虫的羽化作用 | 第25页 |
5.5 神经肽与昆虫性信息素 | 第25-26页 |
6 寄生蜂对寄主的调控作用 | 第26-27页 |
第二章 基本材料与方法 | 第27-44页 |
1 养虫设备 | 第27-28页 |
1.1 全自动人工气候室 | 第27页 |
1.2 智能人工气候箱 | 第27页 |
1.3 养虫笼 | 第27-28页 |
1.4 产卵笼 | 第28页 |
1.5 保蜂盒及寄生盒 | 第28页 |
1.6 吸虫管 | 第28页 |
2 供试材料 | 第28页 |
2.1 供试蔬菜 | 第28页 |
3 供试昆虫的人工饲养 | 第28-30页 |
3.1 虫源 | 第28-29页 |
3.2 小菜蛾的饲养 | 第29页 |
3.3 菜蛾盘绒茧蜂的饲养 | 第29-30页 |
4 实验仪器及软件系统 | 第30-31页 |
4.1 实验仪器 | 第30页 |
4.2 软件系统 | 第30-31页 |
5 常用实验试剂及配制 | 第31-33页 |
5.1 工具酶及试剂盒 | 第31页 |
5.2 其它试剂 | 第31-32页 |
5.3 常用试剂的配制 | 第32-33页 |
6 常规实验方法 | 第33-44页 |
6.1 小菜蛾幼虫脑组织的收集 | 第33页 |
6.2 小菜蛾幼虫脑组织总RNA的提取 | 第33-34页 |
6.3 第一链cDNA的合成 | 第34-35页 |
6.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
6.5 琼脂糖凝胶回收 | 第36页 |
6.6 连接反应 | 第36页 |
6.7 感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
6.8 转化与活化 | 第37页 |
6.9 质粒提取 | 第37-38页 |
6.10 脑转录组中EST序列的筛选 | 第38-40页 |
6.11 EST序列的PCR验证 | 第40-42页 |
6.12 3'、5'末端快速扩增(RACE) | 第42页 |
6.13 荧光定量PCR | 第42-44页 |
第三章 小菜蛾幼虫脑组织神经肽基因克隆与序列分析 | 第44-56页 |
1. 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 供试昆虫 | 第44页 |
1.2 脑组织总RNA的提取 | 第44页 |
1.3 cDNA第一链的合成 | 第44页 |
1.6 序列验证 | 第44-45页 |
1.7 RACE扩增 | 第45页 |
1.8 序列分析 | 第45-47页 |
2. 结果与分析 | 第47-54页 |
2.1 Adipokinetic hormone Ⅰ全长cDNA序列分析 | 第48-49页 |
2.2 Adipokinetic hormone Ⅱ全长cDNA序列分析 | 第49页 |
2.3 Allatostatin A全长cDNA序列分析 | 第49-50页 |
2.4 Allatostatin C全长cDNA序列分析 | 第50页 |
2.5 CCHamide全长cDNA序列分析 | 第50-51页 |
2.6 Bursicon α全长cDNA序列分析 | 第51页 |
2.7 Bursicon β全长cDNA序列分析 | 第51-52页 |
2.8 Crustacean cardioactive peptide全长cDNA序列分析 | 第52页 |
2.9 Ion transport peptiede全长eDNA序列分析 | 第52-53页 |
2.10 Neuroparsin全长cDNA序列分析 | 第53页 |
2.11 Neuropeptide F全长cDNA序列分析 | 第53页 |
2.12 Prothoracicotropic hormone全长cDNA序列分析 | 第53-54页 |
2.13 Allatotropin全长cDNA序列分析 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
第四章 菜蛾盘绒茧蜂寄生/假寄生对小菜蛾幼虫神经肽转录水平的影响 | 第56-79页 |
1 材料与方法 | 第56-57页 |
1.1 供试昆虫来源 | 第56页 |
1.2 菜蛾盘绒茧蜂寄生/假寄生的方法 | 第56页 |
1.3 不同处理脑组织样品的收集 | 第56-57页 |
1.4 小菜蛾幼虫脑部RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第57页 |
1.5 实时荧光定量qRT-PCR检测 | 第57页 |
2 结果与分析 | 第57-79页 |
2.1 实时定量PCR引物的特异性与扩增效率 | 第58-60页 |
2.2 神经肽基因在不同发育阶段的转录规律 | 第60-68页 |
2.3 寄生/假寄生作用对小菜蛾神经肽转录规律的影响 | 第68-77页 |
2.5 寄生与假寄生的转录规律水平比较 | 第77页 |
2.6 讨论 | 第77-79页 |
第五章 总结与讨论 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-88页 |