检测猪瘟病毒实时荧光定量PCR方法的研究
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 国内外猪瘟疫情 | 第9-11页 |
| 1.1.1 国外疫情 | 第9-10页 |
| 1.1.2 国内猪瘟疫情 | 第10-11页 |
| 1.2 猪瘟病毒诊断方法研究进展 | 第11-15页 |
| 1.2.1 血清学诊断方法 | 第11-13页 |
| 1.2.2 动物接种实验方法 | 第13-14页 |
| 1.2.3 分子生物学方法 | 第14-15页 |
| 1.3 本实验研究目的和意义 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 菌株 | 第15-16页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第16页 |
| 2.1.3 引物与探针 | 第16页 |
| 2.2 方法 | 第16-22页 |
| 2.2.1 标准阳性质粒模板的制备 | 第16-20页 |
| 2.2.2 实时荧光定量PCR参数优化 | 第20-21页 |
| 2.2.3 特异性实验 | 第21页 |
| 2.2.4 实时劳光定量PCR敏感性评价 | 第21页 |
| 2.2.5 实时焚光定量PCR标准曲线的制备 | 第21页 |
| 2.2.6 重复性试验 | 第21页 |
| 2.2.7 实时焚光定量PCR方法临床样品检测 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-30页 |
| 3.1 实时荧光定量PCR反应体系与参数的建立 | 第22页 |
| 3.2 标准阳性质粒模板的制备 | 第22-23页 |
| 3.2.1 常规PCR扩增结果 | 第22页 |
| 3.2.2 重组质粒鉴定结果 | 第22-23页 |
| 3.2.3 目的基因片段测序结果 | 第23页 |
| 3.2.4 质粒拷贝数计算结果 | 第23页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR试验参数的优化结果 | 第23-27页 |
| 3.3.1 引物浓度优化结果 | 第23-24页 |
| 3.3.2 探针浓度优化结果 | 第24-25页 |
| 3.3.3 退火温度优化结果 | 第25-27页 |
| 3.4 特异性试验结果 | 第27页 |
| 3.5 敏感性试验结果 | 第27-28页 |
| 3.6 重复性实验结果 | 第28-29页 |
| 3.7 实时焚光定量PCR标准曲线的制备结果 | 第29-30页 |
| 3.8 临床样品检测结果 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-39页 |
| 作者简介 | 第39页 |
