| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 插图和附表清单 | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 瓜类细菌性果斑病 | 第9-12页 |
| 1.1.1 病原菌简介 | 第9-10页 |
| 1.1.2 病害症状与危害 | 第10-11页 |
| 1.1.3 病害的防治 | 第11-12页 |
| 1.2 细菌铜抗性研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 铜的生理作用 | 第12页 |
| 1.2.2 细菌的抗铜机制 | 第12-16页 |
| 1.3 病原细菌致病相关因子的研究 | 第16-17页 |
| 1.4 抗铜基因与致病性的研究 | 第17页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第17页 |
| 2 CueO基因缺失突变的筛选 | 第17-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 仪器与试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 培养基 | 第19-20页 |
| 2.1.3 供试菌株和质粒 | 第20-21页 |
| 2.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.3.1 基因组提取 | 第22页 |
| 2.3.2 目的片段的扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.3 目的片段回收与纯化 | 第23-24页 |
| 2.3.4 目的片段与pMD19-T Vecor的连接与转化 | 第24-25页 |
| 2.3.5 pMD19-T质粒的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.6 同源重组交换菌株的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.7 CueO基因缺失突变菌株的筛选 | 第27-28页 |
| 2.3.8 基因CueO缺失突变体的验证 | 第28-30页 |
| 2.3.9 互补菌株的筛选 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-35页 |
| 2.4.1 目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| 2.4.2 自杀性重组质粒的验证 | 第32页 |
| 2.4.3 突变体的筛选 | 第32-33页 |
| 2.4.4 突变体的验证 | 第33-34页 |
| 2.4.5 互补菌株的验证 | 第34-35页 |
| 2.4.6 小结与讨论 | 第35页 |
| 3 多铜氧化酶基因CueO的功能研究 | 第35-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 仪器与试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验菌株 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 不同浓度硫酸铜KB平板的配制 | 第36页 |
| 3.2.2 Aac5、Aac5 CueO和Aac5 CueO-C硫酸铜敏感性比较 | 第36页 |
| 3.2.3 致病性测定 | 第36-37页 |
| 3.2.4 致敏性测定 | 第37页 |
| 3.2.5 生长曲线测定 | 第37页 |
| 3.2.6 运动性测定 | 第37页 |
| 3.2.7 生物膜测定 | 第37页 |
| 3.2.8 胞外多糖检测 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 致敏性测定 | 第38页 |
| 3.3.2 致病性测定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 铜敏感性检测 | 第39页 |
| 3.3.4 对生长能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.5 对生物膜的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.6 对运动性的影响 | 第41页 |
| 3.3.7 对胞外多糖的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第42页 |
| 4 全文结论与讨论 | 第42-44页 |
| 4.1 结论 | 第42页 |
| 4.2 讨论 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |