| I Hrf1 蛋白提高甜玉米抗寒性的机制研究 | 第6-58页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 冷害对植物的影响 | 第11-16页 |
| 1.1.1 冷害的机理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 冷害对冷敏感植物的生理机能的影响 | 第13-15页 |
| 1.1.3 冷害对植物生理指标的影响 | 第15页 |
| 1.1.4 冷敏感植物耐寒性提高的方法 | 第15-16页 |
| 1.2 Hrf 蛋白 | 第16-19页 |
| 1.2.1 Hrf1 蛋白促进植物对非生物胁迫的耐受性 | 第17页 |
| 1.2.2 Hrf1 蛋白促进植物生长发育和诱导植物抗病性 | 第17-19页 |
| 1.3 本课题的研究背景及研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 载体 | 第20-21页 |
| 2.1.4 酶和试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 培养基的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.6 本论文中所使用的引物 | 第23-24页 |
| 第三章 实验方法 | 第24-36页 |
| 3.1 大肠杆菌高效热激感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 3.2 大肠杆菌的热激转化 | 第24-25页 |
| 3.3 质粒的抽提（小量抽提） | 第25页 |
| 3.4 原核表达 | 第25-26页 |
| 3.5 蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 3.6 SDS-PAGE 蛋白凝胶电泳 | 第27-28页 |
| 3.7 Hrf1、HIS 蛋白常温处理甜玉米种子在低温下萌发指数的测定 | 第28页 |
| 3.8 Hrf1 蛋白、水低温处理甜玉米种子取样 | 第28页 |
| 3.9 甜玉米种子总蛋白，醇溶蛋白，非醇溶蛋白的抽提 | 第28-29页 |
| 3.10 Trizol 法抽提 RNA 以及 RNA 的反转录 | 第29-30页 |
| 3.11 定量 PCR | 第30-31页 |
| 3.12 酵母双杂交验证互作载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.13 酵母的转化（小量转化） | 第32页 |
| 3.14 甜玉米种子超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活力测定 | 第32-33页 |
| 3.15 甜玉米种子过氧化物酶（Peroxisome,POD）活性的测定 | 第33-34页 |
| 3.16 甜玉米叶片丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量的测定 | 第34页 |
| 3.17 甜玉米叶片电导率的测定 | 第34-36页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第36-56页 |
| 4.1 实验结果 | 第36-53页 |
| 4.1.1 Hrf1 和 HIS 蛋白的诱导表达与纯化 | 第36-37页 |
| 4.1.2 Hrf1、HIS 蛋白处理对甜玉米种子萌发指数的影响 | 第37-38页 |
| 4.1.3 Hrf1 蛋白处理甜玉米种子低温萌发时贮藏蛋白的变化 | 第38-40页 |
| 4.1.4 不同处理的甜玉米种子低温萌发时总淀粉的变化 | 第40页 |
| 4.1.5 Hrf1 蛋白处理甜玉米种子低温下萌发的 SOD、POD 酶活 | 第40-42页 |
| 4.1.6 Hrf1、HIS 蛋白处理甜玉米三叶期幼苗低温胁迫下电导率的检测 | 第42-43页 |
| 4.1.7 不同处理的甜玉米三叶期幼苗在低温胁迫下叶片中 MDA 含量检测 | 第43-44页 |
| 4.1.8 不同处理的甜玉米三叶期幼苗低温胁迫下 P5CS1 的表达 | 第44-45页 |
| 4.1.9 不同处理的甜玉米三叶期幼苗低温胁迫下干重和鲜重的检测 | 第45-46页 |
| 4.1.10 Hrf1/2/3 与甜玉米中 Harpin binding protein 的酵母双杂交 | 第46-53页 |
| 4.2 讨论 | 第53-56页 |
| 4.2.1 Hrf1 蛋白对甜玉米种子在低温下萌发的影响 | 第53-55页 |
| 4.2.2 Hrf1 蛋白与 Harpin binding protein 互作情况 | 第55-56页 |
| 展望 | 第56-57页 |
| I 小结 | 第57-58页 |
| II 盐藻在 Cd~(2+)胁迫下 DvCRP1/2 基因的表达及融合蛋白与 Cu2+的结合分析 | 第58-80页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| Abstract | 第59-60页 |
| 第一章 文献综述 | 第60-64页 |
| 1.1 植物对重金属的耐受机制 | 第60-64页 |
| 1.1.1 引言 | 第60页 |
| 1.1.2 Cd~(2+)对植物的毒害 | 第60-61页 |
| 1.1.3 Cu2+对植物的毒害 | 第61页 |
| 1.1.4 植物耐受重金属的分子机制 | 第61-63页 |
| 1.1.5 本课题的研究背景及研究意义 | 第63-64页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第64-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第64-66页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第64页 |
| 2.1.2 试剂 | 第64页 |
| 2.1.3 培养基 | 第64-65页 |
| 2.1.4 引物清单表 | 第65-66页 |
| 第三章 实验方法 | 第66-69页 |
| 3.1 盐藻 Cd~(2+)处理浓度的摸索 | 第66页 |
| 3.2 盐藻 Cd~(2+)处理后取样 | 第66页 |
| 3.3 Trizol 法抽提盐藻的 RNA 以及 RNA 的反转录 | 第66页 |
| 3.4 荧光定量 PCR | 第66页 |
| 3.5 蛋白的原核表达 | 第66-67页 |
| 3.6 诱导时加入 Cu~(2+)对 GST-DvCRP1-CD2、GST-DvCRP2 蛋白溶解性影响的检测 | 第67页 |
| 3.7 原核表达蛋白的亲和纯化及谷胱甘肽及非蛋白结合 Cu2+的去除 | 第67-68页 |
| 3.8 蛋白的硝解及挥酸 | 第68页 |
| 3.9 用 ICP-OES（电感耦合等离子体发射光谱）测定原核表达蛋白与 Cu2+的直接结合能力 | 第68-69页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第69-79页 |
| 4.1 实验结果 | 第69-77页 |
| 4.1.1 盐藻 Cd~(2+)胁迫浓度的确定 | 第69-70页 |
| 4.1.2 Cd~(2+)胁迫下盐藻中 DvCRP1、DvCRP2 的表达情况 | 第70页 |
| 4.1.3 融合蛋白 GST-DvCRP1-CD2、GST-DvCRP2 的诱导表达 | 第70-71页 |
| 4.1.4 Cu~(2+)对 GST-DvCRP1-CD2、GST-DvCRP2 蛋白溶解性的影响 | 第71-75页 |
| 4.1.5 GST-DvCRP1-CD2、GST-DvCRP2 蛋白和 GST 蛋白与 Cu~(2+)的直接结合能力检测 | 第75-77页 |
| 4.2 讨论 | 第77-79页 |
| 4.2.1 Cd~(2+)胁迫下盐藻中 DvCRP1 和 DvCRP2 转录水平的变化 | 第77页 |
| 4.2.2 原核表达 GST- DvCRP1-CD2 和 GST- DvCRP2 蛋白与 Cu~(2+)相结合 | 第77-79页 |
| II 小结 | 第79-80页 |
| 全文总结 | 第80-81页 |
| I Hrf1 蛋白对甜玉米抗寒性的影响 | 第80页 |
| II 盐藻在 Cd~(2+)胁迫下 DvCRP1/2 基因的表达及融合蛋白与 Cu~(2+)的结合分析 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
