| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 研究的目的与意义 | 第11-12页 |
| 1.2 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.2.1 春化作用研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2.2 DNA甲基化 | 第13-14页 |
| 1.2.3 春化作用与甲基化的关系 | 第14-15页 |
| 1.2.4 MSAP技术 | 第15-16页 |
| 1.2.5 Real-Time qPCR | 第16-18页 |
| 1.3 主要研究内容 | 第18页 |
| 1.4 本试验技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 分子生物学及生化试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 试验软件 | 第19-20页 |
| 2.2 植物材料的处理和取样 | 第20页 |
| 2.3 试验方法 | 第20-29页 |
| 2.3.1 大白菜的冬性调查 | 第20页 |
| 2.3.2 MSAP法检测大白菜基因组DNA甲基化 | 第20-24页 |
| 2.3.3 甲基化差异性片段的克隆测序与序列分析 | 第24-26页 |
| 2.3.4 大白菜甲基化基因的Real-time RT-qPCR分析 | 第26-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-42页 |
| 3.1 不同处理大白菜冬性差异分析 | 第29-30页 |
| 3.2 MSAP检测大白菜基因组DNA甲基化 | 第30-35页 |
| 3.2.1 大白菜基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.2 大白菜基因组甲基化类型 | 第31页 |
| 3.2.3 大白菜基因组DNA甲基化多态性分析 | 第31-34页 |
| 3.2.4 不同处理的大白菜基因组DNA甲基化比率分析 | 第34页 |
| 3.2.5 大白菜基因组DNA甲基化变化模式 | 第34-35页 |
| 3.3 甲基化差异片段的克隆测序与序列分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 甲基化差异条带的回收 | 第35-36页 |
| 3.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第36页 |
| 3.3.3 测序及序列分析 | 第36-38页 |
| 3.4 大白菜甲基化差异性基因的Real-time RT-qPCR表达分析 | 第38-42页 |
| 3.4.1 大白菜总RNA的提取 | 第38页 |
| 3.4.2 溶解曲线分析 | 第38-39页 |
| 3.4.3 甲基化差异基因在不同春化代数中的表达分析 | 第39-40页 |
| 3.4.4 甲基化差异基因在不同春化时间中的表达分析 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| 4.1 不同处理大白菜冬性差异分析 | 第42页 |
| 4.2 MSAP检测基因组DNA甲基化 | 第42-43页 |
| 4.3 大白菜甲基化特异性相关基因的克隆分析 | 第43-44页 |
| 4.4 甲基化差异基因的RT-qPCR表达分析 | 第44-45页 |
| 4.5 本试验的创新点 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 附录A | 第53-54页 |
| 附录B | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第55页 |
