摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第7-9页 |
主要英文缩写表 | 第9-10页 |
1.引言 | 第10-22页 |
1.1 植物组织培养概述 | 第10-16页 |
1.1.1 棉花组织培养 | 第11页 |
1.1.2 棉花体细胞培养影响因素及存在问题 | 第11-16页 |
1.2 棉花转基因方法 | 第16-19页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
1.2.2 花粉管通道法 | 第17-18页 |
1.2.3 基因枪法 | 第18-19页 |
1.3 脱落酸的研究进展 | 第19-21页 |
1.4 研究的目的意义 | 第21-22页 |
2.材料与方法 | 第22-34页 |
2.1 材料 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 质粒与菌种 | 第22页 |
2.1.3 试剂和耗材 | 第22-23页 |
2.1.4 常用溶液的配方 | 第23-24页 |
2.1.5 组培相关植物激素 | 第24页 |
2.1.6 相关抗生素溶液 | 第24页 |
2.1.7 其它溶液 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-34页 |
2.2.1 农杆菌介导法(胚性愈伤组织为受体) | 第25页 |
2.2.2 再生苗的嫁接 | 第25页 |
2.2.3 质粒的提取 | 第25-26页 |
2.2.4 花粉管通道法 | 第26页 |
2.2.5 大田的抗生素筛选 | 第26页 |
2.2.6 棉花基因组 DNA 的提取 | 第26-27页 |
2.2.7 PCR 检测 | 第27-28页 |
2.2.8 Southern blot | 第28-32页 |
2.2.9 棉花总 RNA 的提取 | 第32页 |
2.2.10 反转录体系 | 第32-33页 |
2.2.11 RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-42页 |
3.1 AtABA_2 转基因棉花的获得及初步鉴定 | 第34-36页 |
3.1.1 根癌农杆菌介导法转基因棉花的获得及初步鉴定 | 第34-35页 |
3.1.2 花粉管通道法转基因棉花的获得及初步鉴定 | 第35-36页 |
3.2 转基因棉花的分子杂交检测 | 第36-38页 |
3.2.1 探针有效浓度的检测 | 第36-37页 |
3.2.2 转基因棉花 PCR-Southern ABA_2基因的检测 | 第37页 |
3.2.3 转基因棉花 Southern blot 目的基因的检测 | 第37-38页 |
3.3 转基因棉花 RT-PCR 检测 AtABA_2 基因的表达情况 | 第38-39页 |
3.4 转基因棉花突变体相关生理指标的分析 | 第39-42页 |
3.4.1 转 AtABA_2基因棉花干旱表型分析 | 第39页 |
3.4.2 转 AtABA_2基因棉花离体叶片失水率比较 | 第39-40页 |
3.4.3 转 AtABA_2基因棉花气孔形态与分布比较 | 第40-41页 |
3.4.4 转 AtABA_2基因棉花根的比较和分析 | 第41-42页 |
4.讨论 | 第42-46页 |
4.1 转基因方法的比较和选择 | 第42-43页 |
4.2 转 AtABA_2基因棉花的初步鉴定 | 第43页 |
4.3 转 AtABA_2基因棉花 Sourthern blot 鉴定 | 第43-44页 |
4.4 转 AtABA_2基因棉花基因的表达分析 | 第44页 |
4.5 转 AtABA_2基因棉花的相关表型分析 | 第44-46页 |
5.结论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-60页 |
致谢 | 第60-61页 |