| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 本文主要英汉缩略词表 | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-10页 |
| 第2章 材料与方法 | 第10-19页 |
| 2.1 主要试剂和材料 | 第10-11页 |
| 2.2 主要设备 | 第11-12页 |
| 2.3 部分试剂配制 | 第12-13页 |
| 2.3.1 PCR 电泳液 TBE | 第12页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶（2%）配制 | 第12页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE 电泳液 | 第12页 |
| 2.3.4 转膜液 | 第12-13页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE 凝胶配制 | 第13页 |
| 2.3.6 PBST | 第13页 |
| 2.3.7 封闭液 | 第13页 |
| 2.4 细胞学实验 | 第13-15页 |
| 2.4.1 细胞复苏 | 第13-14页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第14页 |
| 2.4.3 细胞传代 | 第14页 |
| 2.4.4 细胞冻存 | 第14页 |
| 2.4.5 质粒提取 | 第14页 |
| 2.4.6 细胞转染(六孔板) | 第14-15页 |
| 2.4.7 细胞分组及处理 | 第15页 |
| 2.5 RT-PCR 法检测 p21 基因的表达 | 第15-16页 |
| 2.5.1 提取总 RNA | 第15页 |
| 2.5.2 总 RNA 定量 | 第15-16页 |
| 2.5.3 引物见下表 | 第16页 |
| 2.5.4 cDNA 合成 | 第16页 |
| 2.5.5 PCR 扩增 | 第16页 |
| 2.5.6 p21 mRNA 表达半定量分析 | 第16页 |
| 2.6 Western blotting 方法检测 p21 蛋白的表达 | 第16-17页 |
| 2.6.1 胞浆、胞核蛋白的提取 | 第16-17页 |
| 2.6.2 Western blotting 方法操作步骤 | 第17页 |
| 2.7 Annexin V/PI 检测细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 2.7.1 荧光显微镜观察细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 2.7.2 流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第18页 |
| 2.8 统计方法 | 第18-19页 |
| 第3章 结果 | 第19-25页 |
| 3.1 荧光显微镜观察细胞转染结果 | 第19页 |
| 3.2 RT-PCR 测三组细胞 p21 基因表达 | 第19-20页 |
| 3.3 Western Blot 测定三组细胞 P21 蛋白表达 | 第20-22页 |
| 3.4 荧光显微镜观察三组细胞凋亡 | 第22-23页 |
| 3.5 流式细胞仪分析三组细胞凋亡 | 第23-25页 |
| 第4章 讨论 | 第25-31页 |
| 4.1 细胞转染 | 第25-26页 |
| 4.2 P21 蛋白亚细胞定位与细胞凋亡 | 第26-27页 |
| 4.3 p21 作用途径 | 第27-28页 |
| 4.4 p21 与呼吸系统疾病的关系 | 第28-29页 |
| 4.5 不足和展望 | 第29-31页 |
| 4.5.1 不足 | 第29页 |
| 4.5.2 展望 | 第29-31页 |
| 第5章 结论 | 第31-32页 |
| 致谢 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 附图 | 第38-39页 |
| 综述 | 第39-45页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
