| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1. 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 环境内分泌干扰物 | 第13-15页 |
| 1.1.1 环境内分泌干扰物介绍 | 第13页 |
| 1.1.2 环境内分泌干扰物分类 | 第13页 |
| 1.1.3 环境内分泌干扰物暴露途径 | 第13-14页 |
| 1.1.4 环境内分泌干扰物的主要特点 | 第14-15页 |
| 1.2 PAEs的理化性质及其应用 | 第15-16页 |
| 1.3 PAEs的暴露评价 | 第16-17页 |
| 1.4 PAEs的代谢状况 | 第17-20页 |
| 1.5 PAEs的毒性作用 | 第20-21页 |
| 1.5.1 遗传毒性 | 第20页 |
| 1.5.2 生殖发育毒性 | 第20-21页 |
| 1.6 PAEs的检测方法 | 第21-24页 |
| 1.6.1 色谱法 | 第21-22页 |
| 1.6.2 免疫分析法 | 第22-23页 |
| 1.6.3 生物素-亲和素放大酶联免疫分析 | 第23-24页 |
| 1.7 选题意义 | 第24-25页 |
| 2. 实验材料、仪器、试剂、方法 | 第25-40页 |
| 2.1 实验材料、试剂、仪器 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第25-28页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-40页 |
| 2.2.1 半抗原的合成和结构鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.2 人工抗原的合成及鉴定 | 第29-32页 |
| (一) MMAP人工抗原的合成—重氮法 | 第29-30页 |
| (二) MMCP人工抗原的合成一活性酷法 | 第30页 |
| (三) 人工抗原的纯化处理 | 第30-31页 |
| (四) 人工抗原蛋白含量的测定一Folin-粉法 | 第31页 |
| (五) 人工抗原结构的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 小鼠的免疫 | 第32页 |
| 2.2.4 抗血清效价的测定 | 第32-34页 |
| 2.2.5 抗血清灵敏度的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.6 单克隆抗体的制备 | 第35-37页 |
| 2.2.7 杂交瘤细胞的检测 | 第37-38页 |
| 2.2.8 杂交瘤细胞的克隆化 | 第38页 |
| 2.2.9 杂交瘤细胞的扩大培养 | 第38页 |
| 2.2.10 杂交瘤细胞的染色体分析 | 第38-39页 |
| 2.2.11 杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性检测 | 第39页 |
| 2.2.12 单克隆抗体性质鉴定 | 第39页 |
| 2.2.13 单克隆抗体试剂盒的研制 | 第39-40页 |
| 3. 实验结果 | 第40-50页 |
| 3.1 半抗原4-氨基邻苯二甲酸单甲酯的结构鉴定 | 第40页 |
| 3.1.1 H~1NMR鉴定 | 第40页 |
| 3.1.2 质谱仪鉴定 | 第40页 |
| 3.2 人工抗原的鉴定 | 第40-42页 |
| 3.2.1 紫外光谱扫描结果 | 第41页 |
| 3.2.2 SDS-PAGE鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 方阵滴定结果 | 第42-43页 |
| 3.4 抗血清效价测定结果 | 第43-44页 |
| 3.5 抗血清灵敏度的测定结果 | 第44-45页 |
| 3.6 细胞融合 | 第45页 |
| 3.7 杂交瘤细胞的筛选与克隆化 | 第45-46页 |
| 3.8 杂交瘤细胞的染色体分析 | 第46页 |
| 3.9. 杂交瘤细胞分泌的抗体稳定性检测 | 第46-47页 |
| 3.10 单克隆抗体性质鉴定 | 第47页 |
| 3.11 MMP单克隆抗体试剂盒制备 | 第47-50页 |
| 3.11.1 间接竞争ELISA法检测MMP | 第47页 |
| 3.11.2 使用MMP试剂检测盒对样品检测的原理及步骤 | 第47-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 人工抗原的制备及免疫原的选择 | 第50页 |
| 4.2 免疫方案 | 第50-51页 |
| 4.3 骨髓瘤细胞的制备 | 第51页 |
| 4.4 杂交瘤细胞的培养 | 第51-52页 |
| 4.5 杂交瘤细胞的筛选 | 第52页 |
| 4.6 细胞的冻存与复苏 | 第52-53页 |
| 4.7 间接竞争ELISA注意事项 | 第53-54页 |
| 5. 结论与展望 | 第54-55页 |
| 5.1 结论 | 第54页 |
| 5.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录一 邻苯二甲酸单甲酯 | 第62-63页 |
| 附录二 攻读学位期间论文发表情况 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |