中文摘要 | 第12-23页 |
Abstract | 第23-30页 |
前言 | 第31-39页 |
第一部分 2-溴棕榈酸对小鼠胚胎神经干细胞增殖、分化的影响 | 第39-63页 |
材料与方法 | 第39-53页 |
实验材料 | 第39-45页 |
实验方法 | 第45-53页 |
结果 | 第53-55页 |
1. 2-溴棕榈酸对小鼠胚胎NSCs增殖的影响 | 第53-54页 |
2. 2-溴棕榈酸对分化状态下小鼠胚胎NSCs分化及增殖相关因子表达的影响 | 第54页 |
3. 2-溴棕榈酸对分化状态下小鼠胚胎NSCs分化相关标记物蛋白MAP2、GFAP和NG2表达量的影响 | 第54页 |
4. 2-溴棕榈酸对分化状态下小鼠胚胎NSCs分化命运决定因子及干性维持相关因子表达的影响 | 第54-55页 |
讨论 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
附图 | 第58-63页 |
第二部分 2-溴棕榈酸影响小鼠胚胎神经干细胞分化命运转换的机制研究 | 第63-76页 |
材料与方法 | 第63-68页 |
实验材料 | 第63-65页 |
实验方法 | 第65-68页 |
结果 | 第68-70页 |
1. 2-溴棕榈酸是否增加分化期NSCs凋亡 | 第68页 |
2. 2-溴棕榈酸对分化期小鼠NSCs细胞活力的影响 | 第68-69页 |
3. 2-溴棕榈酸对分化期小鼠NSCs增殖的影响 | 第69页 |
4. 2-溴棕榈酸对分化阶段NSCs细胞周期的影响 | 第69页 |
5. 神经干细胞分化过程中命运决定因子的表达 | 第69-70页 |
讨论 | 第70-71页 |
结论 | 第71-72页 |
附图 | 第72-76页 |
第三部分 2-溴棕榈酸影响小鼠胚胎神经干细胞分化的表观遗传学研究 | 第76-89页 |
材料与方法 | 第76-80页 |
实验材料 | 第76-78页 |
实验方法 | 第78-80页 |
结果 | 第80-82页 |
1. 透射电子显微镜观察细胞核内染色质的形态 | 第80页 |
2. 检测染色质的开放程度及其与DNA的结合能力 | 第80-81页 |
3. Western blot技术检测组蛋白H3的甲基化、乙酰化水平 | 第81页 |
4. 免疫荧光技术检测组蛋白H3的乙酰化水平 | 第81页 |
5. 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)检测相关转录因子与乙酰化组蛋白的结合情况 | 第81页 |
6. Western Blot技术检测CBP、P300蛋白的表达量 | 第81-82页 |
7. CBP、P300免疫共沉淀后检测HAT活性 | 第82页 |
讨论 | 第82-83页 |
结论 | 第83-84页 |
附图 | 第84-89页 |
第四部分 2-溴棕榈酸通过EID1调控CBP/P300的机制研究 | 第89-103页 |
材料与方法 | 第89-93页 |
实验材料 | 第89-91页 |
实验方法 | 第91-93页 |
结果 | 第93-95页 |
1. Western Blot技术检测核蛋白EID1的表达量 | 第93页 |
2. 核蛋白EID1与CBP、P300免疫共沉淀后进行Western Blot检测 | 第93-94页 |
3. 转染EID1-shRNA后,通过RT-PCR技术检测分化命运决定因子的表达 | 第94页 |
4. RT-PCR技术检测EIDlmRNA的水平,及其在细胞核与细胞质的分布情况 | 第94页 |
5. 免疫共沉淀技术检测小鼠NSCs在增殖和分化状态下的泛素化水平及体外泛素化重构检测 | 第94页 |
6. 检测EID1是否通过蛋白酶体途径降解 | 第94-95页 |
7. 免疫荧光技术检测2-溴棕榈酸对EID1在亚细胞器分布的影响 | 第95页 |
8. ABE法检测EID1的棕榈酰化水平 | 第95页 |
讨论 | 第95-97页 |
结论 | 第97-98页 |
附图 | 第98-103页 |
文章创新性 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
攻读博士期间发表论文 | 第113-114页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第114-115页 |
英文论文1 | 第115-150页 |
英文论文2 | 第150-174页 |