中文摘要 | 第2-3页 |
ABSTRACT | 第3页 |
第1章 文献综述 | 第7-14页 |
1.1 异源染色体附加系 | 第7-9页 |
1.1.1 异源染色体附加系形成 | 第7页 |
1.1.2 异源染色体附加系识别技术 | 第7-8页 |
1.1.3 异源染色体附加系传代性质 | 第8页 |
1.1.4 异源染色体附加系应用 | 第8-9页 |
1.2 无融合生殖 | 第9-10页 |
1.2.1 无融合生殖的分类 | 第9页 |
1.2.2 无融合生殖的研究进展 | 第9-10页 |
1.3 甜菜杂交种M14的无融合生殖及其研究进展 | 第10页 |
1.4 cDNA-AFLP技术及其应用 | 第10-12页 |
1.4.1 cDNA-AFLP技术基本原理 | 第11页 |
1.4.2 cDNA-AFLP技术特点 | 第11-12页 |
1.4.3 cDNA-AFLP技术的酶选择 | 第12页 |
1.4.4 cDNA-AFLP技术的应用 | 第12页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第12-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-32页 |
2.1 实验材料及处理 | 第14-16页 |
2.1.1 实验材料 | 第14页 |
2.1.2 田间杂交 | 第14页 |
2.1.3 试剂、试剂盒、质粒与菌株 | 第14-15页 |
2.1.4 引物的设计及合成 | 第15-16页 |
2.2 cDNA-AFLP操作过程 | 第16-22页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第16-17页 |
2.2.2 总RNA浓度、纯度及完整性检测 | 第17-18页 |
2.2.3 mRNA纯化 | 第18页 |
2.2.4 合成cDNA第一链 | 第18-19页 |
2.2.5 cDNA第二链合成 | 第19-20页 |
2.2.6 准备模板 | 第20-21页 |
2.2.7 PCR选择性预扩增 | 第21-22页 |
2.3 中性聚丙烯酰胺电泳分析 | 第22-24页 |
2.3.1 制胶 | 第22页 |
2.3.2 电泳 | 第22-23页 |
2.3.3 银染 | 第23-24页 |
2.4 比较扩增差异片段 | 第24页 |
2.5 差异片段的克隆及测序 | 第24-26页 |
2.5.1 目的片段的回收及纯化 | 第24-25页 |
2.5.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
2.5.3 目的片段与pMD 19-T的连接与转化 | 第26页 |
2.5.4 阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第26页 |
2.5.5 差异片段的测序 | 第26页 |
2.6 甜菜GENOMIC DNA的提取及检测 | 第26-28页 |
2.6.1 甜菜Genomic DNA的提取及纯化 | 第27-28页 |
2.6.2 DNA浓度、纯度及完整性检测 | 第28页 |
2.7 PCR验证差异片段 | 第28页 |
2.8 SOUTHERN杂交验证差异片段 | 第28-31页 |
2.9 TDFs在核酸数据库中的比对 | 第31-32页 |
第3章 结果与分析 | 第32-50页 |
3.1 RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
3.2 RNA纯度和含量的测定 | 第33页 |
3.3 cDNA的合成、酶切以及连接接头后的预扩增 | 第33-34页 |
3.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果 | 第34-42页 |
3.5 差异表达片段的二次扩增 | 第42-43页 |
3.6 差异表达基因的测序结果 | 第43页 |
3.7 DNA的提取结果 | 第43页 |
3.8 特异片段PCR验证结果 | 第43-45页 |
3.9 SOUTHERN杂交结果 | 第45页 |
3.10 差异表达基因的序列同源性分析 | 第45-50页 |
第4章 讨论 | 第50-53页 |
第5章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录1 | 第61-64页 |
附录2 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |