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甜菜M14人工授粉后花器官cDNA的差异表达分析

中文摘要第2-3页
ABSTRACT第3页
第1章 文献综述第7-14页
    1.1 异源染色体附加系第7-9页
        1.1.1 异源染色体附加系形成第7页
        1.1.2 异源染色体附加系识别技术第7-8页
        1.1.3 异源染色体附加系传代性质第8页
        1.1.4 异源染色体附加系应用第8-9页
    1.2 无融合生殖第9-10页
        1.2.1 无融合生殖的分类第9页
        1.2.2 无融合生殖的研究进展第9-10页
    1.3 甜菜杂交种M14的无融合生殖及其研究进展第10页
    1.4 cDNA-AFLP技术及其应用第10-12页
        1.4.1 cDNA-AFLP技术基本原理第11页
        1.4.2 cDNA-AFLP技术特点第11-12页
        1.4.3 cDNA-AFLP技术的酶选择第12页
        1.4.4 cDNA-AFLP技术的应用第12页
    1.5 研究的目的和意义第12-14页
第2章 材料与方法第14-32页
    2.1 实验材料及处理第14-16页
        2.1.1 实验材料第14页
        2.1.2 田间杂交第14页
        2.1.3 试剂、试剂盒、质粒与菌株第14-15页
        2.1.4 引物的设计及合成第15-16页
    2.2 cDNA-AFLP操作过程第16-22页
        2.2.1 RNA的提取第16-17页
        2.2.2 总RNA浓度、纯度及完整性检测第17-18页
        2.2.3 mRNA纯化第18页
        2.2.4 合成cDNA第一链第18-19页
        2.2.5 cDNA第二链合成第19-20页
        2.2.6 准备模板第20-21页
        2.2.7 PCR选择性预扩增第21-22页
    2.3 中性聚丙烯酰胺电泳分析第22-24页
        2.3.1 制胶第22页
        2.3.2 电泳第22-23页
        2.3.3 银染第23-24页
    2.4 比较扩增差异片段第24页
    2.5 差异片段的克隆及测序第24-26页
        2.5.1 目的片段的回收及纯化第24-25页
        2.5.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第25-26页
        2.5.3 目的片段与pMD 19-T的连接与转化第26页
        2.5.4 阳性克隆的菌液PCR鉴定第26页
        2.5.5 差异片段的测序第26页
    2.6 甜菜GENOMIC DNA的提取及检测第26-28页
        2.6.1 甜菜Genomic DNA的提取及纯化第27-28页
        2.6.2 DNA浓度、纯度及完整性检测第28页
    2.7 PCR验证差异片段第28页
    2.8 SOUTHERN杂交验证差异片段第28-31页
    2.9 TDFs在核酸数据库中的比对第31-32页
第3章 结果与分析第32-50页
    3.1 RNA琼脂糖凝胶电泳第32-33页
    3.2 RNA纯度和含量的测定第33页
    3.3 cDNA的合成、酶切以及连接接头后的预扩增第33-34页
    3.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果第34-42页
    3.5 差异表达片段的二次扩增第42-43页
    3.6 差异表达基因的测序结果第43页
    3.7 DNA的提取结果第43页
    3.8 特异片段PCR验证结果第43-45页
    3.9 SOUTHERN杂交结果第45页
    3.10 差异表达基因的序列同源性分析第45-50页
第4章 讨论第50-53页
第5章 结论第53-54页
参考文献第54-61页
附录1第61-64页
附录2第64-71页
致谢第71-72页

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