| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-41页 |
| 第一节 种子中淀粉合成的研究进展 | 第15-27页 |
| 1 淀粉和淀粉颗粒的结构 | 第15-16页 |
| 2 淀粉的合成机制 | 第16-23页 |
| 2.1 AGPase催化合成ADPG | 第16-17页 |
| 2.2 GBSS合成直链淀粉 | 第17-18页 |
| 2.3 多种SS合成支链淀粉 | 第18-19页 |
| 2.4 淀粉分支酶参与支链淀粉的生成 | 第19-20页 |
| 2.5 淀粉脱分支酶参与支链淀粉的合成 | 第20-21页 |
| 2.6 支链淀粉合成相关模型 | 第21-23页 |
| 3 淀粉合成相关酶的调节机制 | 第23-25页 |
| 3.1 氧化还原调节 | 第23页 |
| 3.2 蛋白-蛋白互作模式调节 | 第23-24页 |
| 3.3 磷酸化调节 | 第24-25页 |
| 4 影响淀粉合成的新基因 | 第25-27页 |
| 第二节 蛋白质二硫键异构酶的研究进展 | 第27-39页 |
| 1 PDI家族简介 | 第27-32页 |
| 1.1 PDI蛋白的结构特征 | 第27-28页 |
| 1.2 PDI蛋白的分类 | 第28-32页 |
| 2 PDI在内质网催化反应的类型与机制 | 第32-36页 |
| 2.1 内质网中PDI | 第32-33页 |
| 2.2 PDI催化二硫键形成途径 | 第33-34页 |
| 2.3 PDI催化二硫键异构化途径 | 第34-35页 |
| 2.4 PDI分子伴侣活性和抗分子伴侣活性 | 第35页 |
| 2.5 PDI其它活性 | 第35-36页 |
| 3 PDI与蛋白质折叠 | 第36-39页 |
| 3.1 未折叠蛋白质响应 | 第36-37页 |
| 3.2 内质网胁迫与PCD | 第37-39页 |
| 第三节 本研究的目的意义 | 第39-41页 |
| 第二章 水稻粉质突变体与种子蛋白突变体筛选 | 第41-45页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| 1.1 植物材料 | 第41页 |
| 1.2 种子总蛋白的提取 | 第41页 |
| 1.3 SDS-PAGE电泳与染色 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 T3612突变体突变基因的图位克隆与功能研究 | 第45-81页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| 1 材料 | 第46页 |
| 1.1 植物材料 | 第46页 |
| 1.2 菌株与载体 | 第46页 |
| 1.3 培养基 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-63页 |
| 2.1 发育不同时期胚乳的取样 | 第46-47页 |
| 2.2 植物总DNA(SDS法)的提取 | 第47-48页 |
| 2.3 植物总DNA(CTAB大量提法)的提取 | 第48-49页 |
| 2.4 用于定位的分子标记的检测 | 第49-51页 |
| 2.5 半定量RT-PCR | 第51-52页 |
| 2.6 实时荧光定量RT-PCR | 第52页 |
| 2.7 原核表达与蛋白纯化 | 第52-53页 |
| 2.8 Western杂交分析 | 第53-55页 |
| 2.9 胚乳切片的透射电镜观察 | 第55页 |
| 2.10 成熟种子横断面扫描电镜观察 | 第55页 |
| 2.11 种子直链淀粉测定 | 第55页 |
| 2.12 种子支链淀粉链长分布检测 | 第55-56页 |
| 2.13 水稻原生质体提取与亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 2.14 普通碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第57页 |
| 2.15 大量抽提质粒DNA | 第57-58页 |
| 2.16 大肠杆菌感受态制备及热击转化 | 第58页 |
| 2.17 农杆菌感受态制备及冻融法转化 | 第58页 |
| 2.18 转基因互补载体构建 | 第58-59页 |
| 2.19 细胞定位载体构建 | 第59页 |
| 2.20 Bradford法测定蛋白含量 | 第59页 |
| 2.21 PDI分子伴侣活性检测 | 第59页 |
| 2.22 PDI还原酶活性检测 | 第59-60页 |
| 2.23 淀粉合成相关酶酶活测定 | 第60-62页 |
| 2.24 淀粉活性胶的制取与染色 | 第62-63页 |
| 3 结果与分析 | 第63-81页 |
| 3.1 T3612突变体的筛选与遗传分析 | 第63-64页 |
| 3.2 T3612突变体的部分生理生化性状分析 | 第64-65页 |
| 3.3 T3612突变体成熟种子横断面电镜扫描观察分析 | 第65-66页 |
| 3.4 T3612突变体种子中干物质积累速率下降 | 第66页 |
| 3.5 T3612变体种子支链淀粉链长分布分析 | 第66-67页 |
| 3.6 T3612突变体胚乳细胞中淀粉合成相关酶基因的表达分析 | 第67-69页 |
| 3.7 T3612突变体胚乳细胞中淀粉合成相关酶酶活分析 | 第69-71页 |
| 3.8 T3612突变体突变基因的图位克隆 | 第71-72页 |
| 3.9 T3612突变位点分析 | 第72-73页 |
| 3.10 转基因互补检测与鉴定 | 第73-75页 |
| 3.11 PDIL1-1基因的表达分析 | 第75-76页 |
| 3.12 PDIL1-1的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| 3.13 PDIL1-1的还原酶活性分析 | 第77页 |
| 3.14 PDIL1-1的分子伴侣活性分析 | 第77-78页 |
| 3.15 内质网胁迫相关基因荧光定量RT-PCR分析 | 第78-81页 |
| 第四章 全文结论与讨论 | 第81-89页 |
| 1 结论 | 第81-83页 |
| 1.1 T3612突变体种子中淀粉积累受到抑制 | 第81页 |
| 1.2 突变体种子中支链淀粉精细结构发生改变 | 第81-82页 |
| 1.3 T3612是一个PDIL1-1缺失型突变体 | 第82页 |
| 1.4 PDIL1-1编码一个蛋白质二硫键异构酶 | 第82页 |
| 1.5 突变体胚乳细胞内发生严重内质网胁迫 | 第82-83页 |
| 2 讨论 | 第83-88页 |
| 2.1 部分酶活性的变化可能影响到淀粉的正常合成 | 第83页 |
| 2.2 内质网胁迫导致种子呈现粉质表型 | 第83-84页 |
| 2.3 PDIL1-1的缺失同时影响到淀粉和蛋白的合成 | 第84-86页 |
| 2.4 PDIL1-1基因的一因多效 | 第86-88页 |
| 3 本研究创新之处 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-105页 |
| 附录 | 第105-107页 |
| 在读期间发表或待发表的论文 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
